◎ 陳海元
(阿克蘇地區(qū)食品安全檢測中心,新疆 阿克蘇 843000)
試樣中的叔丁基羥基茴香醚(BHA)和2,6-二叔丁基對甲酚(BHT)用石油醚提取,通過層析柱使BHA與BHT凈化,濃縮后,經(jīng)氣相色譜分離后用氫火焰化檢測器檢測,根據(jù)試樣峰面積與標準峰面積比較定量[1]。
石油醚,沸程30~60 ℃;二氯甲烷,分析純;二硫化碳,分析純;無水硫酸鈉,分析純;硅膠G,60~80目于120 ℃活化4 h放干燥器備用;弗羅里矽土,60~80目于120 ℃活化4 h放干燥器中備用;BHA、BHT標準液,濃度1 000 μg/mL,不確定度1%(k=2),北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司制。
2.2.1 標準貯備液(100 μg/mL)
分別吸取BHA、BHT標準溶液1.0 mL于10 mL容量瓶中,用乙醇溶液定容至刻度,每毫升含100.0 ng BHA、BHT標準使用液。
2.2.2 標準曲線工作液
分別準確吸取標準貯備BHA、BHT液液0.50、1.0、1.5、2.0、2.0、4.0 mL于10 mL容量瓶、5 mL容量瓶中,用乙醇溶液定容至刻度,即得到BHA為5、10、15、20、40 mg/L的標準系列溶液,BHT為10、20、30、40、80 mg/L的標準系列溶液。
氣相色譜儀,附氫火焰化檢測器,日本島津公司,GC-2010;氣相色譜柱,RTX-5(柱長100 m,內(nèi)徑0.25 mm,膜厚0.25 μm);電子天平,感量為0.1 mg,賽多利斯科學儀器有限公司,BSA224S。
(1)稱取混合均勻試樣2.00 g,放入50 mL的燒杯中,加入30 mL石油醚溶解,轉移到層析柱上,再用10 mL石油醚分數(shù)次洗滌燒杯,并轉移到層析柱,用100 mL二氯甲烷分5次淋洗,合并淋洗液,減壓濃縮近干,用乙醇定容至2.0 mL,該溶液為待測溶液。
(2)注入氣相色譜1.0 μL標準使用液進入色譜中測定。
(3)測定條件:檢測器溫度200 ℃,進樣口200 ℃,柱溫140 ℃。
(4)標準曲線信息,如圖1、2所示。
圖1 BHA標準曲線圖
圖2 BHT標準曲線圖
圖1:線性方程為Y=aX+b,其中a=1.515649×10-3,b = 0.0,相關系數(shù)為 0.9994701,外標法定量,校準曲線為線性,通過原點。
圖2:線性方程為Y=aX+b,其中a=1.490645×10-3,b = 0.0,R =0.9991070,外標法定量,校準曲線為線性,通過原點。
(5)BHA、BHT在色譜中的保留時間和濃度,見表1。
表1 BHA、BHT在色譜中保留時間和濃度表
圖3 樣品測試圖譜圖
(7)樣品測試結果,見表2。
表2 樣品測試表
①BHA和BHT曲線線性相關性良好,相關系數(shù)均達到0.999以上;②帶入質(zhì)量計算,樣品A中BHA計算結果為115.7 mg/kg和117.6 mg/kg,BHT計算結果為168.1 mg/kg和177.6 mg/kg,相對相差分別為1.63%、5.50%;樣品B中BHA計算結果為178.8 mg/kg和183.5 mg/kg,BHT計算結果為126.1 mg/kg和123.3 mg/kg,相對相差分別為2.59%、2.25%。相對相差小于國家標準GB/T 5009.30-2003《食品中叔丁基羥基茴香醚(BHA)與2,6-二叔丁基對甲酚(BHT)的測定》中15%的要求。
油分的存在會嚴重影響色譜分離的效果,且會污染色譜柱,對色譜柱壽命產(chǎn)生極大的影響。所以,該實驗的關鍵就是在保證高回收率的前提下去油。采用石油醚提取,毛細管氣相色譜技術同時測定植物油中的合成抗氧化劑BHA、BHT,方法簡便、快速、靈敏、精密度好、回收率高,可以一次實現(xiàn)定性和定量分析,可用于植物油及基質(zhì)復雜的BHA、BHT的同時檢測和驗證。該方法的建立對于監(jiān)督食用油中合成抗氧化劑的使用,保護人體健康,具有非常重要的現(xiàn)實意義。
[1]中國國家標準化管理委員會.GB/T 5009.30-2003 食品中叔丁基羥基茴香醚(BHA)與2,6-二叔丁基對甲酚(BHT)的測定[S].北京:中國標準出版社,2003.