楊成聰,沈馨,馬雪偉,楊夢(mèng)麗,董蘊(yùn),郭壯,*
(1.湖北文理學(xué)院食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院鄂西北傳統(tǒng)發(fā)酵食品研究所,湖北襄陽(yáng)441053;2.襄陽(yáng)出入境檢驗(yàn)檢疫局綜合實(shí)驗(yàn)室,湖北襄陽(yáng)441003)
作為一種酸甜適口的傳統(tǒng)發(fā)酵食品,米酒通常以糯米為主要原料,接入酒曲發(fā)酵而成[1]。米酒中的有機(jī)酸包括草酸、乙酸、乳酸、蘋果酸、琥珀酸、檸檬酸和酒石酸等,其通常由微生物發(fā)酵或后期添加形成[2]。適量的酸可以在米酒中起到調(diào)節(jié)和緩沖諸味的作用,但當(dāng)酸度過(guò)高或過(guò)低時(shí),均會(huì)造成米酒品質(zhì)下降[3]。由此可見(jiàn),有機(jī)酸作為米酒中重要的呈味物質(zhì),對(duì)米酒產(chǎn)品的滋味品質(zhì)有著較大的影響,因而明確米酒中有機(jī)酸的種類及含量是極為必要的。
除酸堿滴定法外[4],研究人員亦可以采用旋光法[5]、氣相色譜法(Gas Chromatography,GC)[6]和高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)[7]對(duì)米酒中的有機(jī)酸含量進(jìn)行測(cè)定。值得一提的是,雖然旋光法和酸堿滴定法較為經(jīng)濟(jì),但其準(zhǔn)確度較低,重復(fù)性亦較差[8]。此外,因有機(jī)酸具有較高的沸點(diǎn),不容易氣化,因而在使用氣相色譜法對(duì)其測(cè)定時(shí),需先對(duì)檢測(cè)物進(jìn)行衍生,方法較為復(fù)雜[9]。高效液相色譜法具有方法簡(jiǎn)便快捷、分離度高、結(jié)果準(zhǔn)確和對(duì)所測(cè)組分沸點(diǎn)沒(méi)有要求等優(yōu)點(diǎn),因而廣泛的應(yīng)用于食品中有機(jī)酸的測(cè)定[10]。GB 5009.157-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品有機(jī)酸的測(cè)定》采用該方法約束了果汁飲料及果汁、果味碳酸飲料、果凍、水果罐頭、膠基糖果、固體飲料、面包、餅干、糕點(diǎn)、烘焙食品餡料和生濕面制品中有機(jī)酸的測(cè)試方法。然而令人遺憾的是,米酒并不在上述約束范圍內(nèi)。
本研究采用HPLC法對(duì)米酒中草酸、乙酸、乳酸、蘋果酸、琥珀酸、檸檬酸和酒石酸含量進(jìn)行了測(cè)定,通過(guò)色譜條件的優(yōu)化和方法性能的評(píng)價(jià),實(shí)現(xiàn)了米酒中7種有機(jī)酸的快速分離和定量分析,為米酒生產(chǎn)廠家產(chǎn)品的自我檢測(cè)提供了參考。
米酒:市售;草酸、乙酸、乳酸、蘋果酸、琥珀酸、檸檬酸和酒石酸標(biāo)準(zhǔn)品:西隴科學(xué)股份有限公司;磷酸二氫鉀、磷酸氫二銨和磷酸(均為分析純):天津市北辰方正試劑廠;甲醇和異丙醇(均為色譜純):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;0.45 μm微孔濾膜:上海半島實(shí)業(yè)有限公司凈化器材廠。
LC-20ADXR高效液相色譜儀(配置有SIL-20A XR自動(dòng)進(jìn)樣器、LC-20AD XR四元低壓梯度泵、CTO-10AS vp柱溫箱、SPD-M20A二極管陣列紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器)、Inertsil ODS-SP C18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm):日本島津公司;PGJ-10-AS 品冠純水機(jī):武漢品冠儀器設(shè)備有限公司;2-6E小型臺(tái)式離心機(jī):德國(guó)Sigma實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)股份有限公司;PHS-25型數(shù)顯pH計(jì):上海儀電科學(xué)儀器有限公司;HHS-2數(shù)顯恒溫水浴鍋:長(zhǎng)豐儀器設(shè)備廠;PS-100A超聲波清洗機(jī):深圳市潔匯超聲洗凈設(shè)備有限公司。
1.2.1 樣品的處理方法
用天平稱取20.00 g試樣置于培養(yǎng)皿中,然后轉(zhuǎn)移至研缽中磨至粉碎,之后轉(zhuǎn)移至100 mL的容量瓶中,用流動(dòng)相定容后靜置一段時(shí)間。將定容后的樣品轉(zhuǎn)移至離心杯中,12 000 r/min離心10 min,取上清液過(guò)0.45 μm微孔纖維素濾膜,濾液備用。
1.2.2 色譜條件的優(yōu)化
1.2.2.1 供試樣品的制備
分別稱取草酸0.15g、蘋果酸0.30 g、檸檬酸0.60 g、酒石酸0.75 g以及乳酸、醋酸和琥珀酸各1.50 g溶解后于50 mL的容量瓶中定容,制成母液待用。
分別取各母液1.0 mL,再加入0.2 mL 1.0 mol/L的磷酸,用超純水定容至10 mL,混勻后作為供試樣品待用。
1.2.2.2 流動(dòng)相中磷酸鹽的選擇
流動(dòng)相:分別配制濃度均為0.01 mol/L的磷酸二氫鉀和磷酸氫二銨溶液,流動(dòng)相中不添加乙腈,調(diào)節(jié)pH 值為 2.30;進(jìn)樣量:20 μL;檢測(cè)器:SPD-M20A;色譜柱:InertsilODS-SPC18 色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);柱溫:30℃;流速:0.8 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):215 nm。
1.2.2.3 流動(dòng)相中磷酸鹽濃度選擇
流動(dòng)相:分別配制0.01、0.05 mol/L和0.08 mol/L的磷酸二氫鉀溶液,流動(dòng)相中不添加乙腈,調(diào)節(jié)pH值為 2.30;進(jìn)樣量:20 μL;檢測(cè)器:SPD-M20A;色譜柱:InertsilODS-SPC18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);柱溫:30℃;流速:0.8 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):215 nm。
1.2.2.4 流動(dòng)相pH值的選擇
流動(dòng)相:分別配制pH值為2.30、2.50和2.90,濃度為0.01 mol/L的磷酸二氫鉀溶液,流動(dòng)相中不添加乙腈;進(jìn)樣量:20 μL;檢測(cè)器:SPD-M20A;色譜柱:In ertsilODS-SPC18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);柱溫:30℃;流速:0.8 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):215 nm。
1.2.2.5 流動(dòng)相中乙腈比例的選擇
流動(dòng)相:濃度為0.01 mol/L的磷酸二氫鉀溶液,分別設(shè)置乙腈和水相的體積比為0∶100、5∶95和10∶90;調(diào)節(jié)pH值為2.30;進(jìn)樣量:20 μL;檢測(cè)器:SPDM20A;色譜柱:InertsilODS-SPC18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);柱溫:30 ℃;流速:0.8 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):215 nm。
1.2.2.6 柱溫的選擇
分別設(shè)置柱溫為 25、30、35、40 ℃,流動(dòng)相:濃度為0.01 mol/L的磷酸二氫鉀溶液,流動(dòng)相中不添加乙腈,調(diào)節(jié)pH值為 2.30;進(jìn)樣量:20 μL;檢測(cè)器:SPD-M20A;色譜柱:InertsilODS-SPC18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流速:0.8 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):215 nm。
1.2.2.7 流速的選擇
分別設(shè)置流動(dòng)相流速為0.5、0.8、1.0 mL/min和1.2 mL/min;流動(dòng)相:濃度為0.01 mol/L的磷酸二氫鉀溶液,流動(dòng)相中不添加乙腈,調(diào)節(jié)pH值為2.30;柱溫為 25 ℃;進(jìn)樣量:20 μL;檢測(cè)器:SPD-M20A;色譜柱:InertsilODS-SPC18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);檢測(cè)波長(zhǎng):215 nm。
1.2.3 米酒中7種有機(jī)酸的測(cè)定
1.2.3.1 米酒樣品的采集
從襄陽(yáng)市武商廣場(chǎng)購(gòu)物中心購(gòu)買10種品名的米酒樣品,依次編號(hào)為MJ1~MJ10。
1.2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
分別稱取草酸0.15 g、蘋果酸0.30 g、檸檬酸0.60 g、酒石酸0.75 g以及乳酸、醋酸和琥珀酸各1.50 g分別溶解后于50 mL的容量瓶中定容,制成母液待用。分別吸取 0.1、0.2、0.5、1.0、1.4 mL,在加入 0.2 mL 1.0 mol/L 磷酸后,用流動(dòng)相定容至10 mL。分別配制各個(gè)梯度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,溶液過(guò)0.45 μm濾膜待用。每個(gè)濃度重復(fù)進(jìn)樣,分別以7種有機(jī)酸的濃度為自變量x,色譜峰面積的均值為因變量y,采用外標(biāo)法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算。
色譜條件:流動(dòng)相:濃度為0.01 mol/L的磷酸二氫鉀溶液,流動(dòng)相中不添加乙腈,調(diào)節(jié)pH值為2.30;進(jìn)樣量:20 μL;檢測(cè)器:SPD-M20A;色譜柱:InertsilODSSPC18 色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);柱溫:25℃;流速:1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):215 nm。
1.2.3.3 結(jié)果計(jì)算
米酒樣品中的有機(jī)酸含量按照以下公式進(jìn)行計(jì)算:
式中:X為樣品中有機(jī)酸的含量,g/kg;C為由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得樣品中某有機(jī)酸的濃度,μg/mL;V為樣品的最后定容體積,mL;m為樣品質(zhì)量,g。
1.2.3.4 米酒中7種有機(jī)酸含量的測(cè)定
所有的試樣均按照1.2.1中的處理方法進(jìn)行處理,按照1.2.3.2中的色譜條件進(jìn)行測(cè)定,按照1.2.3.3中的計(jì)算方法進(jìn)行計(jì)算。
1.2.4 方法性能評(píng)價(jià)
1.2.4.1 重復(fù)性試驗(yàn)
取MJ5樣品2 mL于10 mL容量瓶中,加入0.2 mL 1 mol/L磷酸后定容。12 000 r/min離心10 min,上清液過(guò)0.45 μm濾膜后,按照1.2.3.1中的色譜條件進(jìn)行7種有機(jī)酸峰面積的測(cè)定,試驗(yàn)重復(fù)5次,同時(shí)對(duì)其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差值(relative standard deviation,RSD)進(jìn)行計(jì)算。
1.2.4.2 精密度試驗(yàn)
將1.2.2.1中的供試樣品,不間斷進(jìn)樣5次,色譜條件同1.2.3.2,分別對(duì)7種有機(jī)酸的峰面積進(jìn)行測(cè)定,同時(shí)對(duì)其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)進(jìn)行計(jì)算。
1.2.4.3 加標(biāo)回收率試驗(yàn)
取MJ5樣品2 mL于10 mL容量瓶中,加入0.2 mL 1 mol/L磷酸后定容。12 000 r/min離心10 min,上清液過(guò)0.45 μm濾膜備用。濾液分為4份,1份不做任何處理,另外3份添加一定量的7種有機(jī)酸的混合溶液。色譜條件同1.2.3.2。
1.2.5 統(tǒng)計(jì)分析
使用島津高效液相色譜自帶軟件Labsolution將色譜圖轉(zhuǎn)化為數(shù)據(jù)矩陣后,利用Origin 8.5軟件(O-riginLab,MA,USA)作圖。
2.1.1 流動(dòng)相中磷酸鹽種類的選擇
在色譜柱為Inertsil ODS-SP C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱溫為 30℃,流動(dòng)相流速為0.8mL/min,pH值為2.30,流動(dòng)相中不添加乙腈,磷酸鹽濃度為0.01 mol/L的固定條件下,分別選擇磷酸二氫鉀和磷酸氫二銨作為流動(dòng)相中的磷酸鹽,探討了磷酸鹽種類對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響,其結(jié)果如圖1所示。
由圖1可知,磷酸二氫鉀和磷酸氫二銨對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響不大,但當(dāng)緩沖鹽的種類選擇磷酸二氫鉀時(shí),其基線要比磷酸氫二銨更平整,且噪音較小。綜上所述,本研究選擇磷酸二氫鉀作為流動(dòng)相中的緩沖鹽。
2.1.2 流動(dòng)相中磷酸鹽濃度選擇
在色譜柱為Inertsil ODS-SP C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱溫為 30℃,流動(dòng)相流速為0.8mL/min,pH值為2.30,流動(dòng)相中不添加乙腈的固定條件下,分別配制磷酸二氫鉀的濃度為0.01、0.05、0.08mol/L,探討了磷酸二氫鉀濃度對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響,其結(jié)果如圖2所示。
由圖2可知,磷酸鹽的濃度對(duì)7種有機(jī)酸的保留時(shí)間沒(méi)有較大的影響,但較高的鹽濃度會(huì)對(duì)色譜柱和整個(gè)流路系統(tǒng)造成損害,因此在其分離效果相同的條件下選擇磷酸二氫鉀的濃度為0.01 mol/L。
圖1 流動(dòng)相磷酸鹽種類對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響Fig.1 Effect of phosphate type of mobile phase on the separation of 7 kinds organic acids
圖2 流動(dòng)相磷酸二氫鉀濃度對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響Fig.2 Effect of monopotassium phosphate concentration in mobile phase on the separation of 7 kinds organic acids
2.1.3 流動(dòng)相pH值的選擇
在色譜柱為Inertsil ODS-SP C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱溫為30℃,流動(dòng)相流速為0.8mL/min,流動(dòng)相中不添加乙腈,磷酸二氫鉀濃度為0.01 mol/L的固定條件下,分別設(shè)置流動(dòng)相的pH值為2.30、2.50和2.90,探討了流動(dòng)相pH值對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響,其結(jié)果如圖3所示。
由圖3可知,流動(dòng)相的pH值會(huì)對(duì)7種有機(jī)酸的保留時(shí)間造成影響,當(dāng)pH值為2.30時(shí)7種有機(jī)酸均可被較好的分離,但當(dāng)pH值為2.50或2.90時(shí),草酸和酒石酸的峰均不能很好的分開(kāi)。值得一提的是,隨著流動(dòng)相pH值的升高,部分有機(jī)酸的出峰時(shí)間出現(xiàn)縮短的情況。綜上所述,本研究選擇流動(dòng)相pH值為2.30。
2.1.4 流動(dòng)相中乙腈比例的選擇
在色譜柱為Inertsil ODS-SP C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱溫為30℃,流動(dòng)相流速為0.8mL/min,pH值為2.30,磷酸二氫鉀濃度為0.01 mol/L,分別設(shè)置乙腈與緩沖鹽溶液的體積比為0∶100、5∶95和10∶90,探討了流動(dòng)相中乙腈比例對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響,其結(jié)果如圖4所示。
由圖4可知,隨著乙腈體積比例的增加,各個(gè)有機(jī)酸的保留時(shí)間均相應(yīng)縮短,當(dāng)乙腈與緩沖鹽溶液的體積比是5∶95時(shí),草酸、酒石酸、乳酸和乙酸均不能達(dá)到基線分離,當(dāng)乙腈與緩沖鹽溶液的體積比是10∶90時(shí),7種有機(jī)酸均不能達(dá)到基線分離。綜上所述,本研究選擇流動(dòng)相中不添加乙腈。
圖3 流動(dòng)相pH值對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響Fig.3 Effect of pH of mobile phase on the separation of 7 kinds organic acids
圖4 流動(dòng)相中乙腈比例對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響Fig.4 The effect of acetonitrile percentage in mobile phase on the separation of 7 kinds organic acids
2.1.5 柱溫的選擇
在色譜柱為Inertsil ODS-SP C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流動(dòng)相流速為0.8mL/min,pH值為2.30,流動(dòng)相中不添加乙腈,磷酸二氫鉀濃度為0.01 mol/L的固定條件下,分別設(shè)置柱溫為25、30℃和35℃,探討了柱溫對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響,其結(jié)果如圖5所示。
由圖5可知,柱溫的改變對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響并不大,但隨著溫度的升高,色譜柱損傷亦隨之增大。綜上所述,本試驗(yàn)最后選擇的柱溫為25℃。
2.1.6 流動(dòng)相流速的選擇
在色譜柱為Inertsil ODS-SP C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),柱溫為 25 ℃,pH 值為 2.30,流動(dòng)相中不添加乙腈,磷酸二氫鉀濃度為0.01 mol/L的固定條件下,分別設(shè)置流速 0.5、0.8、1.0、1.2 mL/min,探討了流動(dòng)相流速對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響,其結(jié)果如圖6所示。
由圖6可知,隨著流速的增加,有機(jī)酸的保留時(shí)間隨之提前。在保證分離效果和壓力適中的前提下,應(yīng)盡可能快的使待檢測(cè)組分被檢出,進(jìn)而達(dá)到縮短檢測(cè)時(shí)間的目的。綜上所述,本試驗(yàn)最后選擇的流動(dòng)相流速為1.0 mL/min。
圖5 柱溫對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響Fig.5 Effect of column temperature on the separation of 7 kinds organic acids
圖6 流動(dòng)相流速對(duì)7種有機(jī)酸分離效果的影響Fig.6 Effect of flow rate of mobile phase on the separation of 7 kinds organic acids
2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)回歸方程
按照1.2.3.2中方法,分別以草酸、酒石酸、蘋果酸、乳酸、乙酸、檸檬酸和琥珀酸7種有機(jī)酸的濃度為自變量x,色譜峰面積為因變量y,進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程的計(jì)算,結(jié)果如表1。
由表1可知,7種有機(jī)酸線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)均在0.9960以上。由此可見(jiàn),各有機(jī)酸的濃度和峰面積之間具有良好的線性關(guān)系,這亦可間接證明本研究所采用的色譜條件可以實(shí)現(xiàn)米酒樣品中7種有機(jī)酸的精確定量。
表1 7種有機(jī)酸的回歸方程Table 1 Linear regression equations of detection for 7 kinds organic acids
2.2.2 米酒中7種有機(jī)酸含量的測(cè)定
取2 mL樣品加入0.2 mL 1 mol/L磷酸后,用流動(dòng)相定容,12 000 r/min離心10 min后,上清液過(guò)0.45 μm濾膜后上機(jī),按照1.2.3.2中的色譜條件對(duì)米酒中7種有機(jī)酸的含量進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果如表2所示。
2.3.1 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果
按照1.2.1制作MJ5米酒樣品5份,5份樣品分別進(jìn)樣,色譜條件同1.2.3.2,測(cè)定樣品中7種有機(jī)酸的含量,同時(shí)計(jì)算RSD。結(jié)果如表3所示。
表2 10個(gè)米酒樣品中7種有機(jī)酸的含量(n=3)Table 2 Contents of 7 kinds organic acids in 10 rice wine samples(n=3)
表3 重復(fù)性試驗(yàn)Table 3 Result of repetitive test
由表3可知,7種有機(jī)酸的RSD值均在1.0%以下,由此可知,本試驗(yàn)所采用的研究方法在測(cè)定上述7種有機(jī)酸時(shí)具有良好的重復(fù)性。
2.3.2 精密度試驗(yàn)結(jié)果
準(zhǔn)確吸取1.2.2.1節(jié)中7種有機(jī)酸的混合供試溶液,按照1.2.3.2節(jié)中的色譜條件進(jìn)行測(cè)定,不間斷進(jìn)樣5次,分別測(cè)量7種有機(jī)酸的峰面積和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差值,其結(jié)果如表4。
由表4可知,7種有機(jī)酸的RSD值均在1.0%以下,由此可知,本試驗(yàn)具有較好的精密性,可以滿足試驗(yàn)要求。
表4 精密度試驗(yàn)結(jié)果Table 4 Results of precision test
2.3.3 加標(biāo)回收率試驗(yàn)結(jié)果
按照1.2.4.3的樣品處理方法制作MJ5米酒供試樣品,同時(shí)按1.2.3.2中的色譜條件對(duì)樣品中7種有機(jī)酸的含量進(jìn)行測(cè)定,其含量和加樣回收率結(jié)果如表5所示。
表5 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Results of spike recovery test
由表5可知,7種有機(jī)酸的平均回收率在98.74%和101.00%之間,由此可見(jiàn),HPLC法對(duì)米酒中7種有機(jī)酸含量測(cè)定時(shí)回收率較高,在試驗(yàn)允許的范圍內(nèi),可以很好的滿足定量分析的要求。
本研究建立了高效液相色譜法測(cè)定米酒中草酸、酒石酸、蘋果酸、乳酸、乙酸、檸檬酸和琥珀酸7種有機(jī)酸的方法,其中檢測(cè)器為二極管陣列紫外-可見(jiàn)光檢測(cè)器,檢測(cè)波長(zhǎng)215 nm,Inertsil ODS-SP C18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),柱溫為 25℃,流動(dòng)相為0.01 mol/L的磷酸二氫鉀溶液,pH值為2.30,流速為1.0 mL/min。
[1]王玉榮,張俊英,胡欣潔,等.湖北孝感和四川成都地區(qū)來(lái)源的酒曲對(duì)米酒滋味品質(zhì)影響的評(píng)價(jià)[J].食品科學(xué),2015,36(16):207-210
[2]Shen F,Ying Y,Li B,et al.Prediction of sugars and acids in Chinese rice wine by mid-infrared spectroscopy[J].Food Research International,2011,44(5):1521-1527
[3]于博,郭壯,湯尚文,等.不同發(fā)酵時(shí)間米酒滋味品質(zhì)變化的研究[J].食品研究與開(kāi)發(fā),2015,36(10):15-18
[4]Luana N,Rossana C,Curiel J A,et al.Manufacture and characterization of a yogurt-like beverage made with oat flakes fermented by selected lactic acid bacteria[J].International journal of food microbiology,2014,185(8):17-26
[5]鄭大貴,余泗蓮,祝顯虹,等.影響旋光法測(cè)定2-酮基-D-葡萄糖酸含量的因素[J].上饒師范學(xué)院學(xué)報(bào),2012,32(3):52-55
[6]Harris R L N,Lacey M J,Brown W V,et al.Determination of 2-methoxy-3-alkylpyrazines in wine by gas chromatography/mass spectrometry[J].Vitis,1987,26(4):201-207
[7]魏銘,顧盼,李程潔,等.高效液相色譜法測(cè)定篤斯越桔制品中7種有機(jī)酸的含量[J].中國(guó)釀造,2014,33(11):145-148
[8]Gacek M M,Berg J C.The role of acid-base effects on particle charging in apolarmedia[J].Advances in colloid and interface science,2015,220(6):108-123
[9]Ye Q,Liu L,Chen Z.Analysis of phthalate acid esters in environmental water by magnetic graphene solid phase extraction coupled with gas chromatography-mass spectrometry[J].Journal of chromatography A,2014,1329(2):24-29
[10]Pérez-Masiá R,López-Nicolás R,Periago M J,et al.Encapsulation of folic acid in food hydrocolloids through nanospray drying and electrospraying for nutraceutical applications[J].Food chemistry,2015,168(2):124-133