王艷艷， 趙 飛， 白 璐， 劉 霆， 曾 圣， 杜 強

(貴州省水產研究所，貴州貴陽 550025)

鱘魚(AcipensersturioLinnaeus)隸屬于硬骨魚綱(Osteichthyes)輻鰭亞綱(Actinopterygii)軟骨硬鱗總目(Chondrostei)鱘形目(Acipenseriformes)，是現(xiàn)存最古老的脊椎動物之一，也是受廣大消費者青睞的名貴水產品[1]。隨著天然資源數(shù)量與市場需求差距日漸增大[2-3]，鱘魚養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展[4-6]。貴州地下水年排泄量259億m3，此外，全省水庫、河流眾多，水質良好，給鱘魚的養(yǎng)殖生產提供了良好的條件[7]。為此，1999年貴州開始引進俄羅斯鱘進行馴化養(yǎng)殖，并陸續(xù)向全省范圍推廣。目前，鱘魚已成為貴州冷水魚主要養(yǎng)殖品種，其產量占全省冷水魚產量的90%以上[8]。然而，鱘魚性成熟晚、繁殖周期長，雌魚產卵間隔在1～6年[9]，致使鱘魚苗種及受精卵多從省外或國外購買，極大地制約了鱘魚產業(yè)的發(fā)展。

仔魚開口培育階段(即由內源營養(yǎng)向外源營養(yǎng)轉化的階段)是魚類早期生活史中的關鍵時期[10]，也是鱘魚養(yǎng)殖過程中死亡率高的重要臨界期[11]。開口餌料是決定仔魚順利實現(xiàn)初次攝食的主要因素，也是影響仔魚生長、存活的關鍵因子，選擇恰當?shù)臅r間投喂合適的餌料，可明顯提高苗種的成活率[12]。仔魚開口期生長的細微差別對其存活以及整個生活史階段的生長都有著重要的影響[13]。因此，開口餌料的選擇及其投喂技術已成為魚類早期生活史研究的主要內容之一[14]。國內外學者就不同餌料[15-16]、初次投喂時間[17]、投喂頻率和投餌率[18]等對鱘魚仔魚生長發(fā)育的影響進行了研究。

消化酶活力是反映魚類消化生理狀況和對各種營養(yǎng)物質利用的重要指標[19]。國內外學者對鱘魚投喂頻率[20]、不同餌料對鱘魚仔魚生長發(fā)育與消化酶活性[12]、鱘魚消化酶的活性與分布[21-22]進行了報道，但對鱘魚苗種不同開口期消化酶情況及餌料種類的選擇和對生長發(fā)育的影響報道較少。本研究探討了鱘魚苗種不同發(fā)育時期消耗酶活力及不同餌料對雜交鱘仔魚生長發(fā)育的影響，以期了解不同發(fā)育時期雜交鱘消化酶活性情況，為提高雜交鱘仔魚對餌料的消化利用率提供基礎數(shù)據(jù)，為雜交鱘在苗種培育階段餌料的選擇提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗魚及分組

1.2 餌料種類與投喂方法

本試驗分為熟蛋黃、輪蟲、人工配合顆粒飼料、水絲蚓4種餌料。其中熟蛋黃溶水后經(jīng)200目篩絹過濾后投喂；輪蟲為自己擴繁蟲(密度約100 ind./L)；水絲蚓購自花鳥市場，暫養(yǎng)7 d以上，投喂前用1%～3%食鹽水浸泡10 min，打漿投喂；人工配合飼料為鱘魚專用微粒飼料，用水泡成漿狀投喂。

1.3 試驗過程及管理

每2 h觀察1次，查看有無死亡，及時撈出死魚并對其計數(shù)。日投餌量保持在魚體質量的100%；每2 h投喂1次，每次投喂時間控制在0.5 h以內，投喂結束后用虹吸管清除箱底殘餌糞便。試驗過程中保持水質清新，每天換1/3養(yǎng)殖用水。

1.4 指標的測定

1.4.1 生長指標的檢測 分別在試驗開始和結束時隨機抽取20尾測量各組仔魚的體長、體質量，每天記錄各組仔魚的死亡情況。計算公式如下：

1.4.2 粗酶液的制定 選取1日齡仔魚、4日齡仔魚和10日齡仔魚樣品，用濾紙吸干水分后放入1.5 mL離心管中，置于-80 ℃冰箱保存。

將樣品加入10倍體積(m/V)預冷重蒸水，在玻璃勻漿器中冰浴勻漿，9 000～10 000 r/min冷凍離心30 min，上層為油層，下層為沉淀，小心取中間層，3 000 r/min再次離心后取上清液進行消化酶活性的測定。酶液置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆茫?4 h內分析完畢。

1.5 測定項目及方法

1.5.1 餌料基本營養(yǎng)成分的測定 不同餌料中水分含量參照GB/T 5009.3—2003方法進行測定，粗蛋白質含量參照GB/T 5009.5—2003方法進行測定，粗脂肪含量參照GB/T 5009.6—2003方法進行測定，粗灰分含量參照GB/T 5009.4—2003方法進行測定，粗纖維含量參照GB/T 5009.10—2003方法進行測定。

1.5.2 消化酶活性的測定 胰蛋白酶、胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性含量采用南京建成生物技術公司測試盒測定。蛋白含量采用考馬斯亮藍法測定。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)用“平均值±標準差”表示，采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，用LSD多重比較分析試驗結果的差異顯著性，當P<0.05時為差異顯著，P>0.05時為差異不顯著。

2 結果與分析

2.1 不同餌料的一般營養(yǎng)成分

由表1可知，3種餌料一般營養(yǎng)成分存在較大差異。水絲蚓、熟蛋黃水分含量較高[含量分別為(83.40±1.40)%、(50.47±0.47)%]，粗蛋白質含量較低[含量分別為(8.20±0.18)%、(15.82±0.33)%]，但熟蛋黃粗蛋白質的含量顯著高于水絲蚓；人工配合飼料粗蛋白含量較高，為(45.15±0.94)%，除人工配合飼料外其他2種餌料均未檢出粗纖維。

表1 不同餌料一般營養(yǎng)成分的含量 %

注：同一列數(shù)據(jù)上標字母相同者表示差異不顯著(P>0.05)；小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

2.2 不同開口餌料對雜交鱘仔魚生長及成活率的影響

由表2可見，投喂水絲蚓組末體質量最高，為(0.052±0.01)g，其次是投喂人工配合飼料組，為(0.047±0.00)g，投喂輪蟲和投喂熟蛋黃組的末體質量無顯著差異(P>0.05)，且顯著低于投喂人工配合飼料和水絲蚓組(P<0.05)。投喂水絲蚓組的末體長最大，為(2.17±0.08)cm，顯著高于其他投喂組(P<0.05)，投喂人工配合飼料、輪蟲和熟蛋黃組末體長無顯著差異(P>0.05)。投喂水絲蚓組成活率為72%，投喂人工配合飼料和熟蛋黃開口組成活率均為60%，投喂輪蟲組成活率最低，為49%。

表2 不同開口餌料對雜交鱘仔魚生長及成活率的影響

注：同列數(shù)據(jù)后；不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.3 不同開口餌料對雜交鱘魚生長性能的影響

由表3可知，投喂水絲蚓組的特定生長率最高，為8.0%，其次是投喂人工配合飼料組，為5.5%；投喂輪蟲組和熟蛋黃組特定生長率較低(分別為2.8%和1.8%)。投喂水絲蚓組的增質量率最高，為52.9%，其次是投喂人工配合飼料組，為38.2%，投喂輪蟲組和熟蛋黃組較低(分別為17.6%和11.8%)。投喂人工配合飼料組肥滿度最高，為0.60%，其次為投喂熟蛋黃組、水絲蚓組和輪蟲組(分別為0.52%、0.51%和0.49%)。

2.4 雜交鱘仔魚不同發(fā)育時期消化酶活性

由表4可知，孵化初期，4種消化酶活性均較低，隨著不斷生長發(fā)育，4種消化酶活性逐漸升高。同一發(fā)育期，脂肪酶活性均顯著低于其他3種消化酶(P<0.05)，蛋白酶(胃蛋白酶和胰蛋白酶)活性顯著高于脂肪酶和淀粉酶活性(P<0.05)。

表3 不同開口餌料對雜交鱘仔魚生長性能的影響

表4 不同發(fā)育時期消化酶活性 U/mg prot

注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。同行后不同大寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

3 討論

魚類早期發(fā)育過程中，其消化系統(tǒng)尚不成熟，仔魚在卵黃期其消化系統(tǒng)的酶活性非常低，主要由內源性營養(yǎng)維持，隨著消化系統(tǒng)的發(fā)育，一些酶類伴隨著外源性營養(yǎng)的吸收開始合成[28]。試驗結果顯示，孵化初期，仔魚胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均很低，可見開口期消化酶活性弱是造成該時期死亡率高的重要原因之一[19]。孵化早期，仔魚消化能力較低，雖然攝食量少，但在投喂時，餌料的量要充足。

4 結論

孵化早期，雜交鱘消化能力低，開口時宜選擇易被雜交鱘仔魚消化的餌料，以水絲蚓作為開口餌料效果較好。飼養(yǎng)管理時，適當減少單次投喂量，并增加投喂次數(shù)，隨著仔魚規(guī)格的增大，消化能力的增強，適當調整投喂量及投喂次數(shù)。配合飼料也可以作為雜交鱘仔魚開口餌料。

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