□ 徐長隆 張曉蕊 王雅麗 范翠翠 漢臣氏(沈陽)兒童制品有限公司
人體腸道是一個巨大的細(xì)菌庫,在人體構(gòu)成微生態(tài)平衡。益生菌可促進(jìn)腸道內(nèi)微生態(tài)平衡,對人體營養(yǎng)吸收、免疫功能等都有一定的促進(jìn)作用。植物乳桿菌作為益生菌的一種,發(fā)酵產(chǎn)生的細(xì)菌素和其他的抑菌物質(zhì),不僅能抑制病原菌,還能提高食品的風(fēng)味。本研究對漢臣氏(沈陽)兒童制品有限公司自主分離的菌株發(fā)酵乳桿 菌(Lactobacillus plantarum)HCS03-011的調(diào)節(jié)腸道菌群特性進(jìn)行研究,為該菌株的進(jìn)一步的開發(fā)、生產(chǎn)提供支持。
ICR小鼠,18~22 g,4~5周齡,60只,雄性,購于遼寧長生生物技術(shù)股份有限公司,許可證號:SCXK(遼)2015-0001。
漢臣氏(沈陽)兒童制品有限公司分離的植物乳桿菌HCS03-011,實驗室保存。
伊紅美藍(lán)瓊脂、疊氮鈉-結(jié)晶紫-七葉苷瓊脂、LBS瓊脂培養(yǎng)基、革蘭氏染液、恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、電子天平、注射器、眼科鑷、手術(shù)剪。
1.4.1 實驗動物分組樣品給予時間
實驗設(shè)三個劑量組,一個空白對照組??瞻讓φ战M同途徑給蒸餾水。
樣品給予時間30 d。分組及給樣方案詳見表1。
1.4.2 實驗步驟
模型建立:小鼠平衡飼養(yǎng)3 d后,按體重隨機分組。在給予受試樣品前,無菌采各組小鼠糞便0.1 g,10倍系列稀釋。培養(yǎng)后,以菌落形態(tài)、革蘭氏染色鏡檢等鑒定菌落,計算出每克濕便中的菌數(shù),取對數(shù)后進(jìn)行統(tǒng)計整理。連續(xù)給樣品30 d后,與實驗前同樣方法。
數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定:應(yīng)用SPSS軟件的單因素分析方法(One-Way-Anova)對試驗前后自身及組間雙歧桿菌、腸球菌、腸桿菌進(jìn)行組間統(tǒng)計學(xué)比較。
根據(jù)各組實驗動物實驗前后腸道菌群變化(表2)可知:實驗前后,溶劑對照組小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌減少22.7%,腸桿菌增多12.3%、乳桿菌減少13.0%、腸球菌增多3.2%;植物乳桿菌(HCS03-001)1 g/kg劑量組小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌減少18.7%,腸桿菌增多10.7%、乳桿菌減少1.5%、腸球菌減少1.8%;植物乳桿菌(HCS03-001)2 g/kg劑量組小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌減少21.4%,腸桿菌增多3.6%、乳桿菌增多7.7%、腸球菌減少2.6%;植物乳桿菌(HCS03-001)3 g/kg劑量組小鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌減少19.7%,腸桿菌增多2.2%、乳桿菌增多8.4%、腸球菌減少5.0%。各組均無統(tǒng)計學(xué)差異。
表1 植物乳桿菌(HCS03-011)調(diào)節(jié)腸道菌群實驗方案
表2 各組實驗動物實驗前后腸道菌群變化
根據(jù)實驗結(jié)果,說明給予樣品30 d,實驗動物腸道內(nèi)雙歧桿菌變化不大;腸桿菌隨著給樣劑量增加有減少的趨勢;乳桿菌隨著給樣劑量增加有增加的趨勢;腸球菌有減少的趨勢。給樣30 d,對實驗動物腸道菌群有一定的調(diào)節(jié)作用,本公司發(fā)酵乳桿菌(HCS03-002),具有一定的開發(fā)潛力。