趙 楠，武秀麗，趙桂華,3*

(1.江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 句容 212400； 2.句容市人民醫(yī)院，江蘇 句容 212400；3.句容市潤泰生物科技有限公司，江蘇 句容 212400)

小龍蝦瘟疫病是由變形藻絲囊霉(AphanomycesastaciSchikora)引起的一種侵染性病害。19世紀(jì)中葉，變形藻絲囊霉通過小龍蝦傳播到歐洲的大部分地區(qū)，導(dǎo)致了小龍蝦瘟疫病的暴發(fā)，被該病原真菌侵染后的小龍蝦幾周即可死亡[1-6]。

1 分布

變形藻絲囊霉自然分布于北美洲，在北美小龍蝦的標(biāo)本上已發(fā)現(xiàn)了該病原[7]。除北美洲以外，其他地方發(fā)現(xiàn)的均為外來病原菌。1859年，變形藻絲囊霉在意大利倫巴第地區(qū)第一次被觀察到，隨后傳染至整個歐洲[8]。20世紀(jì)60年代，該病害在西班牙首次暴發(fā)；20世紀(jì)80年代，不列顛群島、土耳其、希臘和挪威的小龍蝦瘟疫病進一步傳播蔓延[1]。20世紀(jì)60年代后，只要是引進北美小龍蝦的養(yǎng)蝦場都有瘟疫病的傳播發(fā)生[1]。

在大多數(shù)引進小龍蝦的地區(qū)，部分逃到野外，建立了自然繁殖種群。目前尚不清楚所有的種群是否攜帶變形藻絲囊霉，但在歐洲的檢測證實，北美小龍蝦仍是變形藻絲囊霉的攜帶者[9-10]。

2 分類

變形藻絲囊霉隸屬于卵菌綱、水霉目、水霉科，通常被稱為水霉。卵菌的鑒定依據(jù)孢子囊的形態(tài)學(xué)，種的鑒定取決于有性繁殖的形態(tài)學(xué)，但變形藻絲囊霉缺少有性階段，只能根據(jù)無性繁殖階段進行鑒定。除了變形藻絲囊霉外，已知卵菌綱其他真菌也侵染小龍蝦[5,11]。在西班牙和意大利，Royo等[12]報道了信號小龍蝦和小龍蝦上的變形藻絲囊霉分離物不能致死易感病的澳大利亞鰲蝦(Cheraxdestructor)和歐洲高貴小龍蝦(Astacusastacus)。對變形藻絲囊霉分離物進行標(biāo)準(zhǔn)化感染試驗，發(fā)現(xiàn)分離物可產(chǎn)生無性孢子，缺乏有性繁殖。

3 傳播

1859年，小龍蝦瘟疫病菌首次由北美進口小龍蝦攜帶進入意大利，1860年在整個歐洲迅速傳播。1874—1875年，法國中東部的朗格勒高原上小龍蝦大量死亡，在接下來的幾十年，該病在法國暴發(fā)。1877年，小龍蝦瘟疫病擴散到德國，1879年從德國傳播到奧地利，1881年傳播到瑞士。在隨后的幾十年里，該病原菌到達歐洲東部。

1959年，具有相同癥狀的信號小龍蝦被引進到瑞典，雖然它對瘟疫病菌是有抗性的，但在那時沒有被認識到信號小龍蝦是病害的攜帶者，后來發(fā)現(xiàn)了非抗性的歐洲小龍蝦。

小龍蝦瘟疫病最初認為是由芽孢桿菌(Bacillusastaci)引起。1903年，Schikora鑒定該病原菌是屬于絲囊屬(Aphanomyces)的一個種，直到1934年，變形藻絲囊霉被鑒定為一種真正的、高毒性的侵染性病原，造成大量歐洲小龍蝦的死亡[13-14]。

4 宿主種類

龍蝦瘟疫病的主要宿主是高貴小龍蝦(Astacusastacus)、白爪小龍蝦(Austropotamobiuspallipes)、石小龍蝦(Austropotamobiustorrentium)和土耳其小龍蝦(Astacusleptodactylus)；信號小龍蝦、小龍蝦和 叉肢螯蝦(Orconecteslimosus)原產(chǎn)于北美，是該病原真菌的攜帶者，不表現(xiàn)出癥狀；基于分子證據(jù)，芬蘭的高貴的小龍蝦群體是亞臨床感染小龍蝦瘟疫病菌[15]。研究發(fā)現(xiàn)，日本黑螯蝦(Cambaroidesjaponicus)是易感染者[16]。此外，來自澳大利亞不同地區(qū)9種小龍蝦，其中包括澳洲淡水龍蝦(Cheraxquadricarinatus)、原生天空藍魔蝦(Cheraxdestructor)、塔斯馬尼亞巨型螯蝦(Astacopsisgouldi)和新幾內(nèi)亞蝦(Cheraxpapuanus)均為易感染者。實驗條件下可感染中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)[17]。

5 癥狀與危害

變形藻絲囊霉侵染小龍蝦后，病蝦體表具有黃色或者褐色的斑。菌絲進入小龍蝦體內(nèi)，分泌神經(jīng)毒素，損害了蝦中樞神經(jīng)系統(tǒng)和運動器官，致使患病小龍蝦喪失活動能力，導(dǎo)致其大量死亡。后期的蝦尾處和前腹部足關(guān)節(jié)處肌肉出現(xiàn)白色或紅褐色，血液細胞中有菌絲。小龍蝦局部褐色黑化，黑色素斑可作為判斷小龍蝦瘟疫的體表特征。真菌菌絲生長在角質(zhì)層的柔軟、未鈣化部分，迅速增長穿過角質(zhì)層，達到體腔內(nèi)部，造成歐洲小龍蝦在6～10 d內(nèi)死亡。

2006年，瘟疫病在中國臺灣省造成小龍蝦大量死亡，死亡率可達100%，2013年底國內(nèi)養(yǎng)殖小龍蝦發(fā)生瘟疫病，發(fā)病率72%，死亡率約66%。

6 病原分類地位與形態(tài)特征

6.1 病原分類地位

變形藻絲囊霉(AphanomycesastaciSchikora)隸屬于假菌界、卵菌門、卵菌目、水霉目、細囊霉科、絲囊霉屬，到目前為止，共有47個種、變種和專化型。

6.2 病原形態(tài)特點

營養(yǎng)菌絲無隔膜，直徑7～9 μm；生長菌絲致密，多分支，具有粗顆粒狀的細胞質(zhì)團和高折射狀的球形體[18]。外圍老菌絲的細胞質(zhì)中有大液泡，但缺乏內(nèi)含物。當(dāng)把活菌絲轉(zhuǎn)移到河水中培養(yǎng)，在16 ℃條件下20～30 h形成游動孢子囊，在20 ℃時12～15 h形成孢子囊，終端孢子囊是由菌絲基部分隔發(fā)育而來。正在發(fā)育的孢子囊內(nèi)，細胞質(zhì)分裂成一系列伸長單位，這些單個細胞質(zhì)團的兩端圓形，不斷生長、個體變大，直到游動孢子釋放。第1個孢子是1個靜孢子，包在孢子囊孔的泡囊中，孢子釋放很快，只需5 s。泡囊內(nèi)的孢子球形，直徑9～11 μm，在1個孢子囊內(nèi)大多有15～30個孢子。游動孢子囊和游動孢子形成的最適釋放溫度為16～24 ℃[18]。來自西班牙的分離物，最適溫度稍高[19]。次生游動孢子具乳突，在釋放以前，乳突發(fā)育時間較短。游動孢子的細胞質(zhì)出現(xiàn)緩慢，以變形的方式通過乳突頂端狹窄的孔道釋放出去；游動孢子從球形到腎形，具側(cè)生鞭毛，大小為8 μm×12 μm。發(fā)育時間取決于溫度，約為15～20 s；在16～20 ℃，游動孢子可以繼續(xù)游動48 h[18]。

6.3 病原繁殖

小龍蝦瘟疫病菌無性繁殖產(chǎn)生雙鞭毛游動孢子。絲囊霉屬與水霉目的其它屬不同，無有性繁殖，只有無性繁殖階段，具有絲狀游動孢子囊。游動孢子在孢子囊頂部的泡囊里形成初生游動孢子團，成熟之后，這些游動孢子分散在水體中傳染其他小龍蝦。

7 傳播途徑與風(fēng)險

一般情況下，小龍蝦瘟疫病原的傳播途徑有以下4種:1)小龍蝦瘟疫病真菌的游動孢子或游動孢子囊在水中傳播；2)小龍蝦帶菌表皮或組織攜帶病菌；3)隨著被侵染的攜帶者傳播至其他地方；4)已被污染的水體、釣魚工具、水產(chǎn)運輸車、養(yǎng)殖者或經(jīng)營者的鞋子傳播等。

病原菌宿主組織能通過污染水體、機械媒介或污染體傳播。傳播的可能性取決于一些因素，包括在游動孢子釋放地點和游動孢子的數(shù)量，易感病小龍蝦的存在，游動孢子和游動孢子囊傳播的時間等因素[20]。由于小龍蝦瘟疫病原存活時間有限，而機械傳播的數(shù)量顯得更重要。例如，在魚類運輸期間，變形藻絲囊霉通過水體傳播，魚類本身就可作為一種傳播媒介，變形藻絲囊霉游動孢子能在其體外萌發(fā)[21]。但是，仍然有待證明魚體外傳播媒介[20]。從目前的小龍蝦瘟疫病暴發(fā)來看，水體中存在大量的游動孢子或游動孢子囊和機械傳播病原更有效。

在病害發(fā)生過程中，易感病的小龍蝦逐漸癱瘓，顯示出異常行為，例如白天活動(正常的小龍蝦是夜間活動)，這使得感病小龍蝦易被捕食。如果魚類取食病蝦，病原菌可以在消化道內(nèi)存活，和魚的糞便一起排出體外釋放病原菌[20]。

變形藻絲囊霉進一步蔓延的風(fēng)險，因不同地區(qū)而異。在歐洲許多地區(qū)，該病原菌已經(jīng)相當(dāng)普遍，是一種亞臨床感染現(xiàn)象。野生北美小龍蝦攜帶變形藻絲囊霉，稱為潛在侵染源，在歐洲國家之間的傳播方式不同，相應(yīng)的風(fēng)險水平與病原菌攜帶者的關(guān)系也會發(fā)生變化。在英格蘭和威爾士，已確定了小龍蝦的傳播源，包括漁場、自然水域、小龍蝦養(yǎng)殖場、公園池塘，水庫和水族館；確認了變形藻絲囊霉的傳播模式，包括活魚的活動、人類活動，北美小龍蝦的放養(yǎng)、遷移，從飼養(yǎng)設(shè)施排出廢水，小龍蝦餌釣魚，逃逸的小龍蝦，大面積水體的流動，調(diào)查工作，使用的休閑設(shè)備、釣魚設(shè)備、鳥類、洄游魚類和建設(shè)工作等[20]。在不同的國家，這些方式可能會有所差異。作為食品和水族館貿(mào)易，通過北美進口小龍蝦或水產(chǎn)養(yǎng)殖將小龍蝦瘟疫病引入新的地理區(qū)域也是最有可能的。

龍蝦瘟疫真菌唯一的傳播途徑是攜帶病原者的長期移動，即北美小龍蝦、或受傳染的小龍蝦。其他方法的傳播機會，接觸到受污染的水域，魚或鳥的機率非常低，而且只能在絲囊霉繁殖、活動期間生存，通常只有數(shù)天。

8 小龍蝦瘟疫病的負面影響

8.1 經(jīng)濟影響

小龍蝦瘟疫病的傳播導(dǎo)致歐洲本地小龍蝦的消失。自1984年小龍蝦瘟疫病入侵以來，土耳其小龍蝦產(chǎn)量從1984年的8 000 t下降到1990年的不到500 t[22]。對于大多數(shù)歐洲經(jīng)濟體來說，小龍蝦瘟疫病影響本土小龍蝦的保護價值。在過去的20年間，小龍蝦保護計劃的成本已達到數(shù)百萬美元。

8.2 環(huán)境影響

小龍蝦瘟疫病暴發(fā)造成小龍蝦種群數(shù)量下降，影響生態(tài)系統(tǒng)，同時影響食物鏈中的其他物種。在瑞典，小龍蝦瘟疫病影響了本土小龍蝦生存，在20世紀(jì)初期，估計有30 000個高貴小龍蝦群體消失，到2000年只有5%個群體保留下來。小龍蝦瘟疫病對生物多樣性、環(huán)境、漁業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖、原生動物和受保護的物種都產(chǎn)生負面影響。

9 防治方法

目前還無有效防治小龍蝦瘟疫病的化學(xué)藥物防治措施，只能通過養(yǎng)殖技術(shù)措施加以控制。在飼養(yǎng)過程中應(yīng)保持飼養(yǎng)水體清新，并維持正常的水色和透明度。小龍蝦瘟疫病菌是一種生長溫度較低的真菌，當(dāng)水溫高于21 ℃以上時，真菌的生長就受到抑制。因此，只要掌握蝦苗放養(yǎng)和捕撈水溫，就會減少病害發(fā)生。此方法在理論上可行，但在實際操作過程中難以做到。

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