王紅麗，展 銳，郭 敏

甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050

射干扶正口服液是甘肅省名中醫(yī)廖志峰主任醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn)方，具有益氣解毒，散瘀消癥之功，用于原發(fā)性肝癌、肝轉(zhuǎn)移瘤、中晚期肝癌及術(shù)后患者的治療，臨床效果顯著［1-3］。處方中君藥為射干，具有清熱解毒、利咽消痰、散血消腫功效［4-7］。射干苷為其主要成分，筆者檢測射干苷含量為射干扶正口服液含量控制標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試藥與試劑 射干扶正口服液(甘肅省中醫(yī)院中藥研究所制備)；射干苷對照品(中國藥品生物制品檢定所提供，批號：111632-200501)；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，并經(jīng)0.45 μm濾膜過濾，所用其他試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)所用藥材飲片由甘肅省中醫(yī)院藥學(xué)部提供。

1.1.2 儀器 1525型高效液相色譜儀，美國Waters公司；B-220型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；10-1112型超聲波清洗儀，寧波新芝生物科技股份有限公司；電子天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；HHS21-4B型電熱恒溫水浴鍋，上海醫(yī)療器械五廠；臺式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：乙腈 - 水（28∶72）；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣體積：10 μL；檢測波長：265 nm；柱溫：30℃。

1.2.2 對照品溶液的制備 取射干苷對照品適量，精密稱定，置25 mL棕色量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得每1 mL中含射干苷368 μg的對照品溶液。

1.2.3 供試品溶液的制備 將射干扶正口服液經(jīng)0.22 μm濾膜過濾即得供試品溶液。

2 結(jié)果

2.1 線性關(guān)系考察 精密量取已配制對照品溶液（368 μg/mL）各 0.5、1.5、2.0、2.5、3.0、5.0 mL，置10 mL棕色量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，按“1.2.1”項(xiàng)色譜條件操作，記錄色譜圖。以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。得到回歸方程為：Y=44.21X-0.6，r=0.999 8，線性范圍為18.40～184.00 μg/mL。表明在此濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2 精密度實(shí)驗(yàn) 精密吸取射干苷對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣 5次，每次 10 μL，以“1.2.1”項(xiàng)下色譜條件測定，記錄色譜圖，峰面積的RSD=0.99%，表明儀器進(jìn)樣精密度較好。

2.3 專屬性考察 分別量取射干苷對照品溶液、射干陰性對照液及樣品溶液適量，按“1.2.1”項(xiàng)色譜條件操作，記錄色譜圖。結(jié)果供試品溶液與對照品溶液均在相同保留時間出現(xiàn)吸收峰，陰性對照無干擾，同時本實(shí)驗(yàn)條件下射干苷與其他組分分離完全。見圖1。

圖1 射干苷含量測定HPLC色譜圖

2.4 回收率實(shí)驗(yàn) 采用加樣回收法，取已知含量（58.35 μg/mL）的同批射干扶正口服液9份，每份約1 mL，精密量取，分別精密加入射干苷對照品溶液（55.20 μg/mL）各 0.5、1、2 mL，每個比例制備3份樣品。按“1.2.3”項(xiàng)下相應(yīng)方法制備供試品溶液。以“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件測定，記錄色譜圖，計(jì)算回收率。結(jié)果提示，高、中、低濃度的方法平均回收率為99.75%，RSD=1.11%。見表1。

表1 射干扶正口服液中射干苷的回收率測定結(jié)果（n=9）

2.5 供試品含量測定 取10批射干扶正口服液，精密量取，按“2.1.1”項(xiàng)方法制備供試品溶液，每批測定3次，計(jì)算射干苷的平均含量為58.35mg/g，RSD=0.05%。見表2。

表2 射干扶正口服液中射干苷的含量測定（n=10）

3 討論

射干扶正口服液由射干、黃芪、虎杖、豬苓、車前子等藥組成。前期研究發(fā)現(xiàn)［1］，該方可調(diào)節(jié)外周血中總T淋巴細(xì)胞，通過抑制腫瘤生長、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫及鎮(zhèn)痛等作用達(dá)到治療腫瘤的效果。本實(shí)驗(yàn)通過對HPLC色譜條件的考察，得到射干苷色譜條件及標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過測定樣品中射干苷的含量，可得到射干扶正口服液的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

參考文獻(xiàn)

［1］王紅麗，張曉明，劉效栓，等.射干扶正口服液對H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及T細(xì)胞功能的影響［J］.蘭州大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2012，38(3):42-44.

［2］王紅麗，張曉明，焦正花，等.正交試驗(yàn)優(yōu)化射干扶正口服液的提取工藝［J］.西部中醫(yī)藥，2012，25(2):23-24.

［3］焦正花，王紅麗，張小華，等.射干口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2011，18(12):62-66.

［4］中華人民共和國國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2015年版一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：285.

［5］邱鷹昆.射干的化學(xué)成分研究［J］.中國藥學(xué)雜志，2006，41(15):1133-1135.

［6］陳云珠.射干藥理作用的現(xiàn)代研究進(jìn)展［J］.中國中醫(yī)藥現(xiàn)代化遠(yuǎn)程教育，2006，4(10):27-29.

［7］郭志輝.HPLC法測定射干配方顆粒中射干苷的含量［J］.藥物分析雜志，2009，29(8):1375-1377.