王卉丹

摘要：當前，大量的使用農(nóng)藥不僅引發(fā)了環(huán)境污染問題，而且對人類的健康也造成了影響，農(nóng)藥的使用深受人們的高度重視，食品當中的農(nóng)藥殘留檢測也被納入到重點工作中來。因為需要檢測的樣品數(shù)量增多，對農(nóng)藥殘留檢測的靈敏度提出了更高的要求，為了提高檢測的效率與精確度，應當采取科學的檢測方法，加大免疫分析法的應用力度，為檢測工作的開展提供可靠的保障。因此，本文針對免疫分析法在水稻農(nóng)藥殘留檢測中的應用及前景進行了分析，從而為提升水稻農(nóng)藥殘留檢測的質(zhì)量奠定良好的基礎。

關(guān)鍵詞：免疫分析法；水稻；農(nóng)藥殘留；抗原

一、免疫分析法的基本類型

所謂免疫分析法，其指的是將抗原和抗體的特異性結(jié)合在一起，將其作為基礎，利用生物化學檢測器，對蛋白質(zhì)和化合物等實施定量與定性的分析。根據(jù)標記物區(qū)分的類型，對免疫分析法進行分類，抗原分成酶免疫分析法（EIA）和熒光免疫分析法（RIA）等，再對這些方法進行延伸，形成了流動免注射免疫法，以及免疫傳感器等，在農(nóng)藥免疫分析法中，比較重要的是酶標記免疫分析法[1]。

對于酶免疫分析法而言，其用酶標記抗原或者是抗體，因為抗原與抗議存在特異性免疫反應，將其與酶的高效催化作用有機的整合在一起，因為酶標記抗體的保存時間比較長，敏感度比較高，所以顯示的結(jié)果更加準確，為農(nóng)藥殘留檢測提供了便利。另外，根據(jù)抗體與抗原是否存在競爭結(jié)合的情況，將免疫分析法分成兩大類型，主要是競爭性ELISA法與非競爭性ELISA法。通常情況下，對一般目標檢測物是大分子，進行檢測時，采用非競爭性ELISA法；如果是小分子目標檢測物，應當采取競爭性ELISA法，由于大部分農(nóng)藥的分子量在1000以下，因而不具備免疫原性，在制備抗體時，開展農(nóng)藥殘留免疫檢測過程中，都應當運用競爭性酶聯(lián)免疫反應，從而達到最佳的檢測效果。

二、免疫分析法的主要方法

（一）抗原包被直接競爭法

目前，對于抗原包被直接競爭法而言，其是免疫分析法的主要方法主要，簡稱為E-Ab法，通過將人工抗原包被到酶標板之上，再加入酶標記的抗體，以及待檢測的農(nóng)藥產(chǎn)品，基于競爭性結(jié)合，反應之后再洗滌，在反應板上，只存留了和包被抗原結(jié)合的酶標抗體，然后加入酶的底物，產(chǎn)生了有色物質(zhì)，利用比色法，對需要檢測的農(nóng)藥實施定量與定性測定。

（二）間接競爭ELISA法

間接競爭ELISA法指的是運用人工抗原包被酶反應板后，加入了抗血清與需要檢測的農(nóng)藥，能夠進行競爭性結(jié)合反應，將反應板進行洗滌，留下了和包被原結(jié)合的抗體，即第一抗體，加入酶標記的第二抗體，和第一抗體予以選擇性的結(jié)合，當洗滌之后，加入了酶的底物。對于酶催化反應的產(chǎn)物量，和被結(jié)合的第一抗體、酶標第二抗體量呈正比，與需要檢測樣品相比，農(nóng)藥量呈現(xiàn)反比?？傊?，免疫分析法是一種有效的方法，在農(nóng)藥期間，得到了廣泛的應用，當然，在科學技術(shù)水平不斷提升的背景下，也應當明確免疫分析法的發(fā)展方向，對前景進行展望，從而確保免疫分析法的技術(shù)水平得到進一步提升。

三、免疫分析法在水稻農(nóng)藥殘留檢測中的應用

（一）在殺菌劑殘留檢測中的應用

目前，在稻農(nóng)藥殘留檢測過程中，為了保證檢測的效果，應用到了免疫分析法，其中，酶聯(lián)免疫吸附法是免疫分析法的一種，在使用該方法時，利用到特克多光譜殺菌劑，提取水稻樣品，檢測限是0.2ng/ml，與以往的檢測結(jié)果相比，檢測結(jié)果更加準確，從而為增強水稻農(nóng)藥殘留檢測的質(zhì)量發(fā)揮了至關(guān)重要的作用[2]。

（二）除草劑殘留檢測中應用免疫分析法

在對除草劑殘留進行檢測期間，運用到了免疫分析法，通過采取制備的2，4-D多克隆抗體，對土壤與食品中的2，4-D的殘留實施檢測，檢測的限已經(jīng)達到了1ng/ml。同時，對吡草胺加以檢測，檢測限制達到了0. 05ng/ml。另外，在對除草劑實施免疫分析過程中，通過對免疫分析方法，以及條件等進行篩選，構(gòu)建了三種農(nóng)藥免疫分析的方法，也就是E-Ab直接ELISA法、間接ELISA法，和E-H直接ELISA法，針對氯黃隆標樣進行測定，檢測限在0. 01～ 0. 06ng/ml范圍之內(nèi)[3]。

（三）檢測殺蟲劑殘留

在對水稻進行殺蟲時，會利用到殺蟲劑，常見的殺蟲劑包含了有機磷殺蟲劑和擬除蟲菊酯殺蟲劑等，這些都是農(nóng)藥中較大的一類，無論是對環(huán)境，還是對農(nóng)產(chǎn)品均造成一定的影響，都產(chǎn)生了嚴重的影響。從目前看，有機磷殺蟲劑是使用最為廣泛法一類殺蟲劑，在對水稻殘留的硫磷予以檢測時，利用了免疫分析法，通過設計、合成了半抗原，再與不同的載體蛋白進行偶聯(lián)系，繼而產(chǎn)生了人工抗原，實施免疫指之后，可以得到甲基對磷酸的高效抗體，繼而促進對水稻農(nóng)藥殘留的檢測。近年來，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥發(fā)展的速度比較快，擬除蟲菊酯類農(nóng)藥常常和有機磷農(nóng)藥混合使用，對檢測難度大的農(nóng)藥殘留時，具有十分顯著的效果。通過運用自制的具有特異性，而且另名都較高的氰戊菊酯抗體，實施ELISA分析，檢測的結(jié)果在30± 6. 2μg/ L之間。此外，該類農(nóng)藥和其他擬除蟲菊酯類農(nóng)藥幾乎沒有交叉反應，取得了顯著的效果，對水稻農(nóng)藥殘留檢測中的有效應用奠定了良好的基礎。

四、免疫分析法在水稻農(nóng)藥殘留檢測中應用的前景展望

為了向人們提供安全、可靠的水稻農(nóng)產(chǎn)品，應當降低農(nóng)藥殘留，繼而避免對消費者的健康構(gòu)成威脅。在實際開展水稻農(nóng)藥殘留檢測過程中，為了增強檢測的精確度，需要采取高效、靈敏的農(nóng)藥殘留檢測方法，以此提高水稻農(nóng)藥殘留檢測的質(zhì)量[4]。當然，研發(fā)比較靈敏和快速的水稻農(nóng)藥殘留檢測方法顯得尤為重要，盡管免疫分析法還有很多地方需要完善，但其也有多的優(yōu)勢，在水稻農(nóng)藥殘留檢測期間，其發(fā)揮了極其重要的作用，對進一步提高水稻藥殘留檢測的精確度具有主要的意義。在環(huán)境問題日益突出的條件下，水稻農(nóng)藥殘留深受關(guān)注，當前，免疫分析法是比較具有競爭力的分析檢測技術(shù)，由此可知，在未來的階段，免疫分析法必然取得良好的發(fā)展，而且越來越健全，而且和其他的技術(shù)有機的整合在一起為重要的發(fā)展反向，從而在水稻農(nóng)藥檢測中發(fā)揮其最大的作用，所以免疫分析法具有良好的發(fā)展前景。

結(jié)束語：

綜上所述，食品安全和環(huán)境是社會比較關(guān)注的問題，所以農(nóng)藥檢測工作尤為重要。免疫分析法作為一種有效的檢測方法，在水稻農(nóng)藥殘留檢測過程中，通過應用到免疫分析法，對提升檢測的精確度發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。隨著科學技術(shù)水平的不斷提升，免疫分析法也應當逐步的完善，并明確日后的發(fā)展方向，從而不斷的提升免疫分析法的檢測精確度，為水稻農(nóng)藥殘留工作的高效開展創(chuàng)造有利的條件。

參考文獻

[1]丁明偉，黃榮茂，金林紅，等.烯效唑的色譜分析方法[J].山地農(nóng)業(yè)生物學報，2009，28（6）：559-562.

[2]水稻細菌性條斑病種子帶菌檢測技術(shù)研究[Z].浙江省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所.

[3]王慧敏.甲基對硫磷特異性單克隆抗體和單鏈抗體的制備及應用[D].山東：山東農(nóng)業(yè)大學，2017.

[4]閆旭.農(nóng)藥多殘留酶聯(lián)免疫分析方法研究[D].江蘇：南京農(nóng)業(yè)大學，2013.

（作者單位：哈爾濱市糧食質(zhì)量監(jiān)測站）