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        高產(chǎn)脂思茅松松節(jié)油組分研究

        2018-05-10 01:23:03李思廣付玉嬪蔣云東張快富許林紅
        四川林業(yè)科技 2018年2期
        關(guān)鍵詞:松節(jié)油思茅松松脂

        李思廣,付玉嬪,蔣云東,張快富,許林紅

        (云南省林業(yè)科學(xué)院,云南 昆明 650201)

        思茅松(Pinuskesiyavar.langbianensis),枝條每年生長2輪以上,是云南省重要的材、脂兼用性樹種,具有速生、高產(chǎn)脂和生態(tài)適應(yīng)性強等特點。在云南省主要分布區(qū)為普洱市的翠云區(qū)、寧洱縣、瀾滄縣、景谷縣、景東縣、鎮(zhèn)沅縣、江城縣、墨江縣等區(qū)縣以及臨滄市、景洪市、紅河州的部分縣。海拔分布范圍為600 m~1 600 m[1]。思茅松林面積約為56.63萬hm2,其立木總蓄積量約為 6 072.9萬m3。中國是世界上最大的脂松香及脂松節(jié)油生產(chǎn)國。2016年云南省松節(jié)油產(chǎn)量約3.5萬t,思茅松松節(jié)油貢獻了云南省松節(jié)油產(chǎn)量的80%左右。思茅松松節(jié)油的主要成分為α蒎烯、β蒎烯和3-蒈烯,松節(jié)油深加工產(chǎn)品如松油醇、樹脂和蒎烷等產(chǎn)品在許多行業(yè)中得到了廣泛的應(yīng)用[2]。很多松節(jié)油組分可以開發(fā)利用,如α-蒎烯和檸檬烯可用做殺蟲劑的原料,β-蒎烯可作為石油燃料的潛在替代品[3]。松香主要成分為樅酸型和海松酸型樹脂酸,主要產(chǎn)品有歧化松香、氫化松香、改性松香、聚合松香和松脂松香[3]。

        對思茅松松脂的遺傳改良主要集中在松脂產(chǎn)量的改良上,通過研究松脂產(chǎn)量的遺傳變異,選育了一批脂用思茅松優(yōu)良家系和無性系[6~7],并對部分單萜類含量進行了無性系的選擇[8~13]。國內(nèi)也有對濕地松松脂化學(xué)組分遺傳開展了相關(guān)研究[14~15]。因此,利用思茅松高產(chǎn)脂無性系測定林,對單萜類、倍半萜組分的選擇及改良,系統(tǒng)研究松節(jié)油化學(xué)組分在無性系間的變異以及松節(jié)油組分間的相關(guān)性,可為松脂品質(zhì)的遺傳改良工作提供理論參考和依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 田間試驗設(shè)計及試驗材料

        15 a生的思茅松高產(chǎn)脂無性系試驗林,位于云南省普洱市景谷縣云海村的高產(chǎn)脂思茅松研究基地(東經(jīng)100°02′~101°07′, 北緯22°49′~23°52′,海拔 1 400 m~1 600 m),年均氣溫21.1 ℃,最冷月(1月)平均氣溫13.0 ℃,最熱月(7月)平均氣溫24.6 ℃,≥10 ℃ 的活動積溫 7 360.9 ℃,年降水量 1 235.4 mm,5月~10 月為雨季,土壤主要為紅壤[1~2]。

        試驗林為隨機區(qū)組設(shè)計,共設(shè)40個高產(chǎn)脂思茅松無性系及1個商品對照共41個處理, 6次重復(fù),6株單列小區(qū),株行距3 m×3 m,試驗林面積2 hm2[1~2]。

        1.2 化學(xué)組分測定

        測定儀器:美國賽默飛世爾公司(Thermo Scientific)生產(chǎn)的Trace GC Ultra ITQ 900氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀。測試藥品:無水乙醇;25%四甲基氫氧化銨-甲醇溶液。樣品前處理:稱取0.05 g松脂至樣品瓶中,加0.5 ml乙醇溶解,加50 μl四甲基氫氧化銨溶液反應(yīng),反應(yīng)液待測。氣相色譜條件:毛細管柱為KB-5MS色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);氣相色譜升溫程序:80 ℃以3 ℃·min-1升到180 ℃,以10 ℃·min-1升到280 ℃;進樣口溫度250 ℃;氦氣流速1.0 ml·min-1;進樣方式為分流進樣,分流比50∶1。質(zhì)譜條件:電子轟擊離子源(EI);電子能力70 eV;離子源溫度230 ℃;氣相色譜儀與質(zhì)譜儀接口溫度250 ℃;質(zhì)量掃描范圍10 amu~900 amu[1~2]。

        通過Xcalibur軟件處理圖譜得到相關(guān)數(shù)據(jù),與NIST譜庫匹配確定未知化合物的名稱及相關(guān)信息,各組分的峰面積歸一化法計算得到。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 思茅松松脂中主要組分含量統(tǒng)計及變異分析

        思茅松松節(jié)油由單萜烯類與倍半萜烯類組成,松香主要由雙萜烯類組成。通過測定40個思茅松無性系松節(jié)油中的主要組分的組成,結(jié)果表明:松節(jié)油占松脂總量的32.93%,松香占松脂總量的63.07%。單萜烯類占松節(jié)油含量的88.21%,倍半萜類占11.79%。

        從表1可以看出:單萜烯類主要組分共檢測出8種,以α-蒎烯、β-蒎烯和β-水芹烯這3種成分為主,占松節(jié)油成分含量的78.89%以上;其次含量較高的還有 3-蒈烯,而莰烯、β-水芹烯、γ-松油烯、β-長葉蒎烯和檸檬烯含量較低。倍半萜烯類組分僅檢測出3種:長葉烯、石竹烯和衣蘭烯,共占松節(jié)油總量的7.46%。

        表1 40個思茅松無性系松節(jié)油中主要組分含量統(tǒng)計和變異分析

        Tab. 1 Variation analysis and statistics of main turpentine components of 40 Simao pine clones

        變量松節(jié)油中含量均值(%)方差標準差極差變異系數(shù)(%)單萜α-蒎烯58.1270.798.4137.5743.96莰烯1.700.050.220.8138.62β-蒎烯13.7034.195.8516.70129.613-蒈烯2.708.022.8313.99317.41β-水芹烯7.082.671.635.9070.19γ-松油烯1.150.270.522.73137.02β-長葉蒎烯1.640.170.421.4977.66檸檬烯1.850.120.351.5256.42倍半萜長葉烯6.101.691.304.8564.62石竹烯0.300.000.050.2354.28衣蘭烯1.060.100.311.0787.55

        單萜烯類中β-蒎烯、3-蒈烯和γ-松油烯的變異系數(shù)最大,而α-蒎烯、莰烯和檸檬烯

        變異系數(shù)相對較小,說明思茅松無性系間松節(jié)油的β-蒎烯、3-蒈烯和γ-松油烯的相對含量差異較大,可以進行有效選擇,例如可以選擇β-蒎烯、3-蒈烯含量高的無性系。倍半萜3種成分的變異系數(shù)均較高。

        2.2 思茅松松節(jié)油中主要組分方差分析

        單萜烯類、倍半萜類組分的無性系遺傳力處于較高水平,在0.53~0.96之間,表明這7個化學(xué)組分受較高的無性系遺傳效應(yīng)控制,可開展相關(guān)的選擇。β-蒎烯遺傳力最高為0.96,β-蒎烯是GB2760-1996中允許使用的香料,主要用以配制肉豆蔻和檸檬等柑橘類香精,是人工合成多種香料,樟腦,冰片、維生素A、E、K、萜烯樹脂等的重要原料。3-蒈烯遺傳力也很高達0.90,3-蒈烯應(yīng)用于多種食用香精配方和農(nóng)藥、醫(yī)藥的合成原料,也是增塑劑、無感染性溶劑等很多化學(xué)品中不可替代的原料之一[16]。β-蒎烯、3-蒈烯均具有較高的實用價值。單萜中的莰烯對某些昆蟲具有較強的拒食性[14],在思茅松松節(jié)油中有相對較高的含量。長葉烯是合成樹脂、合成香料、浮選劑和有機合成的原料,利用長葉烯生產(chǎn)制造出的異長葉烯,異長葉烯酮等可用于香精的調(diào)配,可代替某些價格昂貴的香料。因此在高產(chǎn)脂思茅松的良種選育中,根據(jù)需要可以選育具有較高抗蟲性及β-蒎烯、3-蒈烯含量的優(yōu)良無性系。在思茅松松脂組分選擇育種時,可根據(jù)生產(chǎn)中需要開展某一種或幾種成分的選育,以獲得高產(chǎn)脂、某種成分高含量、高抗的優(yōu)良無性系或家系。

        表2思茅松松節(jié)油中主要化學(xué)組分的方差分析與遺傳力(h2)估算

        Tab. 2 Variance analysis and heritability estimation of main turpentine chemical constituents of Simao pine

        變量F值h2單萜α-蒎烯5.72**0.83莰烯2.13**0.53β-蒎烯26.85**0.963-蒈烯10.07**0.90β-水芹烯12.89**0.92γ-松油烯10.88**0.91β-長葉蒎烯9.95**0.90檸檬烯3.97**0.75倍半萜長葉烯8.81**0.89石竹烯6.25**0.84衣蘭烯16.1**0.93

        注:**表示0.01水平顯著,*表示0.05水平顯著。

        2.3 思茅松松節(jié)油中各主要組分間相關(guān)分析

        為測定思茅松松脂中松節(jié)油各主要組分之間的相關(guān)關(guān)系,對各主要組分兩兩組分之間分別進行線性相關(guān)性分析,查相關(guān)系數(shù)顯著性檢驗表來確定相關(guān)系數(shù)的顯著性。

        從表3可以看出:α-蒎烯與β-蒎烯、β-水芹烯呈極顯著的負相關(guān)關(guān)系,而與莰烯、檸檬烯、長葉烯呈極顯著正相關(guān)關(guān)系。β-蒎烯與β-水芹烯呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,與長葉烯、石竹烯呈極顯著的負相關(guān)關(guān)系;β-水芹烯與所有倍半萜及檸檬烯呈極顯著正相關(guān)關(guān)系。長葉烯與α-蒎烯、莰烯、β-長葉蒎烯呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,而與β-蒎烯、β-水芹烯呈極顯著的負相關(guān)關(guān)系。3-蒈烯與γ-松油烯呈極顯著的正相關(guān)關(guān)系(相關(guān)系數(shù)0.99)。產(chǎn)脂量與α-蒎烯呈顯著的正相關(guān)關(guān)系,可以以α-蒎烯來輔助選擇高產(chǎn)脂思茅松優(yōu)良無性系。

        表3思茅松產(chǎn)脂量及松節(jié)油中各主要組分之間的相關(guān)性分析

        Tab. 3 The correlation between the resin yield of Simao pine and the main turpentine components

        3 結(jié)論與討論

        研究顯示,思茅松松節(jié)油中各成分在無性系間皆差異極顯著,且無性系遺傳力為 0.53~0.96,說明對思茅松松脂化學(xué)組分進行遺傳改良時,通過無性系選擇松脂化學(xué)組分可取得較好的效果。

        從思茅松樹干木質(zhì)部松脂中共檢出11種松節(jié)油主要組分,測定結(jié)果表明單萜及倍半萜中α-蒎烯含量最高(19.14%)。本研究的松脂主要化學(xué)組分及含量與其他文獻的報道相類似[8,12]。

        松節(jié)油中各成分遺傳力均高于0.53以上。這說明化學(xué)組分受中高度遺傳控制,通過無性系選擇,可取得較好的遺傳改良效果。

        α-蒎烯與β-蒎烯呈極顯著的負相關(guān)關(guān)系,此消彼長。因此如選擇出高α-蒎烯的無性系,則其β-蒎烯含量一定很低,反之亦然。α-蒎烯與莰烯呈極顯著正相關(guān)關(guān)系,莰烯對某些昆蟲具有較強的拒食性[14],所以可選擇出高α-蒎烯含量且具有較高抗蟲性能無性系。在無性系選擇時,應(yīng)考慮這些化學(xué)組分此消彼長的相互關(guān)系。

        產(chǎn)脂量與α-蒎烯呈顯著的正相關(guān)關(guān)系,這與趙能等人的研究結(jié)果相類似[17]。因此根據(jù)α-蒎烯的含量可判斷思茅松單株產(chǎn)脂量的高低,也可輔助選擇高產(chǎn)脂思茅松優(yōu)良無性系。

        現(xiàn)階段,國內(nèi)對松脂遺傳研究多注重松脂產(chǎn)量以及松香、松節(jié)油等成分上,很少涉及其主要化學(xué)組分。系統(tǒng)研究思茅松松節(jié)油中主要化學(xué)組分相對含量,分析其在無性系間的相關(guān)關(guān)系和遺傳變異,對松脂更深層次的遺傳改良和選擇具有高附加值松節(jié)油化學(xué)組分的高產(chǎn)脂思茅松無性系具有現(xiàn)實意義。

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