黎翠翠，譚俊青，李藹文，沈素晶，鄧超

(廣東省第二中醫(yī)院，廣東 廣州 510095)

梅毒是由梅毒螺旋體（Treponemapallidum，TP）感染導(dǎo)致的一種常見(jiàn)的性傳播疾病，主要通過(guò)性接觸和血液傳播。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全世界每年新增病例達(dá)到1200萬(wàn)例，已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅人類健康的傳染病之一[1]，因此擴(kuò)大和加強(qiáng)梅毒篩查是十分重要的。梅毒血清學(xué)試驗(yàn)是診斷梅毒的重要依據(jù)之一，但可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。本文應(yīng)用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法（CLIA）及甲苯胺紅不加熱血清學(xué)試驗(yàn)（TRUST）對(duì)本院術(shù)前患者進(jìn)行梅毒篩查，并對(duì)CLIA檢測(cè)的梅毒抗體S/CO為低值樣本使用梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)（TPPA）進(jìn)行復(fù)檢，探討CLIA作為臨床篩查梅毒常規(guī)方法的可行性。

1 資料與方法

1.1 觀察對(duì)象 本組病例取自2017年4月至2017年8月本院常規(guī)術(shù)前住院及門(mén)診患者4471例，其中男2421例，女2050例，年齡20~90歲。采血要求：靜脈采血3ml，3000r/min離心10min，分離血清待檢測(cè)。

1.2 儀器與試劑 采用雅培i2000全自動(dòng)免疫分析儀及配套的梅毒螺旋體抗體試劑盒（美國(guó)雅培）檢測(cè)梅毒抗體(TP-CLIA)。梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)（TPPA）試劑由日本富士株式會(huì)社提供。TRUST試劑由上海榮盛提供。

1.3 方法 所有標(biāo)本用i2000及TRUST同時(shí)檢測(cè)，操作嚴(yán)格按照試劑和儀器說(shuō)明進(jìn)行。雅培i2000說(shuō)明書(shū)標(biāo)注S/CO≥1為陽(yáng)性，S/CO為1～10用TPPA復(fù)檢。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P≤0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 梅毒檢出率 4471例患者中，確診梅毒患者46例，檢出率為1.03%，TP-CLIA陽(yáng)性131例，占2.93%；TRUST陽(yáng)性51例，占1.14%。TP-CLIA單陽(yáng)性 85例（1.90%），TRUST單陽(yáng)性 5例（0.11%），見(jiàn)表1。

表1 4471例梅毒血清學(xué)試驗(yàn)陽(yáng)性的患者TPPA及TRUST試驗(yàn)結(jié)果

2.2 不同年齡段血清梅毒抗體比較 4471例患者中排除既往和現(xiàn)癥梅毒感染發(fā)現(xiàn)71例梅毒假陽(yáng)性，各年齡段患者血清梅毒抗體（TP-CLIA法）假陽(yáng)性率隨年齡的增高有升高的趨勢(shì)，65歲以上患者假陽(yáng)率最高，三組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P<0.05），見(jiàn)表 2。

表2 三組不同年齡段血清梅毒抗體假陽(yáng)性結(jié)果

2.3 同一樣本不同方法復(fù)檢率 TP-CLIA法血清梅毒抗體 S/CO為 1～10為復(fù)檢范圍，復(fù)檢率1.43%。同TPPA比較，復(fù)檢樣本中S/CO為1～5組陽(yáng)性符合率為42.86%，S/CO為5～10組陽(yáng)性符合率為100%，兩組符合率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P<0.05），見(jiàn)表 3。

表3 同一樣本不同方法復(fù)檢結(jié)果比較（n）

3 討論

梅毒的臨床危害性較大，屬于臨床慢性傳染疾病，其臨床特征較為復(fù)雜，患者如果不及時(shí)進(jìn)行診斷和治療，將產(chǎn)生嚴(yán)重的生理和心理痛苦，影響其生活質(zhì)量[2]。梅毒螺旋體感染人體后誘導(dǎo)產(chǎn)生梅毒非特異性抗體和梅毒特異性抗體。特異性抗體有IgM和IgG，分別在感染后2周和4周產(chǎn)生，早期梅毒治療后3～9個(gè)月IgM可消失，晚期梅毒治療后2年IgM可消失，而IgG可終生存在。非特異性梅毒螺旋體抗體在感染后5～7周產(chǎn)生[3]，較特異性抗體晚，隨疾病治愈轉(zhuǎn)陰。梅毒的血清學(xué)診斷也因此分為特異性、非特異性TP抗體檢測(cè)兩大類，對(duì)臨床診斷有著重要的意義。目前臨床上檢測(cè)非特異性TP抗體較多采用甲苯胺紅不加熱血清學(xué)試驗(yàn)（TRUST），由于屬于非特異性檢測(cè)，易導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果，作為梅毒的初篩試驗(yàn)及梅毒療效觀察或隨訪是否復(fù)發(fā)或再感染的指標(biāo)[4]。特異性TP抗體有梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)法（TPPA）、化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法 （CLIA）及ELISA法等。TPPA是最常用梅毒確認(rèn)試驗(yàn)，特異性強(qiáng)且靈敏度高，但由于檢測(cè)時(shí)樣品要進(jìn)行稀釋，操作較為繁瑣，耗時(shí)長(zhǎng)，不適合大批量檢測(cè)[5]，因此，對(duì)于小批量標(biāo)本，基層醫(yī)院適合選擇TPPA作為篩查方法[6]。CLIA具有靈敏度高、快速、自動(dòng)化的優(yōu)勢(shì)，適用于大量樣品的篩查[7]，目前作為梅毒確認(rèn)試驗(yàn)的常規(guī)方法。而對(duì)于初診患者同時(shí)檢測(cè)梅毒非特異性抗體及特異性抗體的梅毒雙陽(yáng)患者，發(fā)現(xiàn)同時(shí)檢測(cè)對(duì)于梅毒的早期診斷及預(yù)后均有一定的意義[8]。

本研究的大樣本來(lái)自醫(yī)院常規(guī)術(shù)前和輸血前篩查的住院和門(mén)診患者，應(yīng)用CLIA和TRUST對(duì)隨機(jī)納入的這些樣本檢測(cè)梅毒特異性抗體和非特異性抗體，結(jié)果發(fā)現(xiàn)4471例患者中，確診梅毒患者46例，檢出率為1.03%，TP-CLIA陽(yáng)性131例，占2.93%；TRUST陽(yáng)性51例，占1.14%。TP-CLIA單陽(yáng)性 85例（1.90%），TRUST單陽(yáng)性 5例（0.11%）。顯然，梅毒感染者在普通人群中占有一定的比例，與張曉紅等[9]報(bào)道相似。我們還發(fā)現(xiàn)85例TPCLIA單陽(yáng)性患者，排除既往和現(xiàn)癥梅毒患者，共有71例梅毒假陽(yáng)性，主要出現(xiàn)在老年患者、惡性腫瘤患者、透析患者和自身免疫性疾病患者，其原因可能是這些患者體內(nèi)存在抗脂類抗體或梅毒螺旋體交叉抗原，老年患者免疫功能減弱，出現(xiàn)一些異種蛋白的干擾[1]。針對(duì)各年齡段患者發(fā)現(xiàn)血清梅毒抗體假陽(yáng)性率隨年齡的增高有升高的趨勢(shì)，65歲以上患者假陽(yáng)率最高，不同年齡段比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與何江才的報(bào)告類似[10]。此外發(fā)現(xiàn)71例梅毒假陽(yáng)性樣本中有64例S/CO為低值樣本，對(duì)這些低值樣本進(jìn)行TPPA復(fù)檢，選取不同的S/CO作為診斷界值進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)S/CO為5～10時(shí)，無(wú)假陽(yáng)性病例，S/CO為1～5時(shí)，假陽(yáng)性病例為24例，真陽(yáng)性率為48.26%，稍低于汪光蓉等報(bào)告[11]，這可能與選取的樣本有關(guān)。由于CLIA方法檢測(cè)梅毒抗體敏感性高，在弱反應(yīng)時(shí)容易出現(xiàn)假陽(yáng)性，故在 S/CO介于 1～5時(shí)，需要行TPPA、TRUST復(fù)檢，排除假陽(yáng)性標(biāo)本，并結(jié)合臨床進(jìn)一步明確診斷。由于目前統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性例數(shù)偏少，未對(duì)假陽(yáng)性樣本進(jìn)行疾病分類，在日后的研究中還需進(jìn)一步補(bǔ)充必要的樣本和臨床資料，進(jìn)行多中心和大樣本的分析。

因此，CLIA血清學(xué)檢測(cè)在臨床中對(duì)梅毒的篩查以及診斷具有較高的敏感性和特異性，了解出現(xiàn)假陽(yáng)性的影響因素顯得尤為重要。對(duì)于梅毒抗體S/CO低值樣本，尤其是S/CO為1～5的樣本，需要行TPPA、TRUST復(fù)檢，排除假陽(yáng)性，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。臨床醫(yī)生也應(yīng)根據(jù)患者的臨床癥狀和體征進(jìn)行綜合分析，降低誤診率，避免不必要的糾紛。

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