歸巧娣，施瑞潔，張向陽，宮艷艷

陜西省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科(西安710068)

肺炎支原體(Mycoplasma pneumonia，MP)是一種介于病毒與細(xì)菌之間的病原微生物。MP是兒童呼吸道感染的常見病原體之一，可引起以間質(zhì)性肺炎為主的肺部病變及肺外并發(fā)癥，嚴(yán)重危害兒童健康。肺炎支原體主要通過飛沫傳播，一年四季均有發(fā)生，發(fā)病情況與地區(qū)、季節(jié)、年齡、性別的不同而存在差異。肺炎支原體因?yàn)闆]有細(xì)胞壁，所以MP對作用于細(xì)胞壁合成的藥物耐藥，臨床推薦大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、喹諾酮類等影響蛋白質(zhì)合成類藥物進(jìn)行治療[1-2]。但近年來隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，MP產(chǎn)生耐藥性，本研究擬分析陜西省人民醫(yī)院2016年5月至2017年4月兒科呼吸道感染患兒肺炎支原體感染及耐藥情況，為臨床診斷及治療提供理論支持。

對象與方法

1 研究對象 選取陜西省人民醫(yī)院2016年5月至2017年4月就診的年齡12歲以下急性呼吸道感染患兒為研究對象，共收集2837例患兒，其中男1512例，女1325例。

2 研究方法

2.1 采集咽拭子：取無菌拭子，在患兒咽喉部捻轉(zhuǎn)數(shù)次，放回拭子管，待接種。

2.2 支原體培養(yǎng)：采用安圖生物研發(fā)的肺炎支原體6 h快速培養(yǎng)基，進(jìn)行肺炎支原體培養(yǎng)。具體方法參考試劑說明書。培養(yǎng)條件：37℃溫箱培養(yǎng)6 h以上，觀察結(jié)果。結(jié)果判定 測試孔由紅變黃為陽性，若培養(yǎng)基內(nèi)顏色不變則為陰性，若陰性對照孔變黃測試無效。

2.3 藥敏結(jié)果判讀：對乙酰螺旋霉素(ACE)、羅紅霉素(ROX)、阿奇霉素(AZI)、克林霉素(CLI)、多西環(huán)素(DOX)、左氧氟沙星(LEV)、加替沙星(GAT)七種藥物進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果判讀：上下兩孔均黃為耐藥，上孔黃色下孔紅色為中介，兩孔均紅為敏感。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 總體情況 2837例患兒咽拭子標(biāo)本，其中MP培養(yǎng)陽性410例，陽性率為14.45%。

2 肺炎支原體陽性率與性別的關(guān)系 見表1。肺炎支原體與患兒性別：女性陽性率(208/1325，15.70%)高于男性(202/1512，13.36%)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表1 不同性別MP陽性率

3 肺炎支原體陽性率與年齡的關(guān)系 見表2。MP感染率與兒童年齡有一定關(guān)系，其中0～3歲組兒童陽性率最高，為16.74%；10～12歲組兒童陽性率最低，為9.42%。各年齡段陽性率之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.71，P<0.05)。

表2 不同年齡段MP陽性率

4 肺炎支原體陽性率與季節(jié)關(guān)系 見表3。統(tǒng)計(jì)顯示各月陽性率范圍在8.49%～17.30%，各月份陽性率折線圖，見圖1。年平均陽性率為14.41%。MP檢出率與季節(jié)分布有一定關(guān)系，結(jié)果顯示夏季陽性率最低，為11.62%，冬季最高，為15.38%，冬夏季節(jié)陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.91，P<0.05)。

表3 不同季節(jié)MP陽性率

圖1 1～12月MP陽性率

5 肺炎支原體陽性菌株的藥敏情況 見表4。410株MP陽性標(biāo)本對羅紅霉素等七種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的藥敏情況，藥敏結(jié)果顯示410株MP陽性標(biāo)本對七種藥物敏感率均大于90%，其中多西環(huán)素敏感性最高97.80%，加替沙星敏感性最低為91.95%，僅發(fā)現(xiàn)2株對4種以上藥物耐藥的肺炎支原體。

表4 410株MP陽性標(biāo)本對七種藥物的藥敏情況

討 論

肺炎支原體是兒童獲得性呼吸道感染的常見病原之一，可引起非典型性肺炎、咽炎及其他呼吸道感染性疾病，有文獻(xiàn)報(bào)道兒童獲得性肺炎中有40%是由肺炎支原體感染引起[3]。目前有多種方法檢測MP感染，如培養(yǎng)法、血清學(xué)抗體檢測、抗原檢測法、PCR核酸檢測法等[4]。支原體培養(yǎng)是診斷支原體感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法由于MP生長條件苛刻且緩慢，一般需要2～3 d才出現(xiàn)典型的“荷包蛋”樣菌落，給臨床及時(shí)診斷帶來困難。本次研究采用咽拭子6 h快速培養(yǎng)法，標(biāo)本取材簡便，其優(yōu)點(diǎn)在于培養(yǎng)液中加入了青霉素和醋酸駝，可抑制細(xì)菌和其他支原體生長，根據(jù)MP生長過程中代謝產(chǎn)物使培養(yǎng)基顏色變化從而判讀有無MP生長及藥敏結(jié)果，6 h即可報(bào)告，更便于臨床診斷及指導(dǎo)治療[5]。

肺炎支原體在全球均可流行，發(fā)生率因國家或地區(qū)不同有很大差異，國外有報(bào)道肺炎支原體感染率可高達(dá)50%。本研究結(jié)果顯示西安地區(qū)全年兒童MP陽性率為14.45%，稍低于近年國內(nèi)報(bào)道的18.7%～24.55%[6-7]，分析可能與支原體流行、標(biāo)本取樣、檢測方法、藥物使用等有關(guān)。MP流行周期與其不同基因型及亞型之間呈交替流行有關(guān)。MP臨床分離株標(biāo)本可被分為兩型，Ⅰ型和Ⅱ型[8-9]，西安地區(qū)本年度流行株基因型還需進(jìn)一步研究。

本次統(tǒng)計(jì)顯示：冬季標(biāo)本量占標(biāo)本總量41.48%，而夏季標(biāo)本量僅占11.53%，且冬季陽性率最高為15.38%，夏季陽性率最低為11.62%，冬夏季陽性率之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從圖1中可以看出MP陽性率最高月份在11月為17.30%，最低月份為6月為8.49%，季節(jié)交替時(shí)MP陽性率通常有大小不同程度增高，以春夏交季、秋冬交季最為明顯。春秋冬三季陽性率略高于夏季，冬季節(jié)是西安地區(qū)肺炎支原體高發(fā)季節(jié)。MP陽性率最高年齡組為0～3歲，陽性率為16.74%，說明幼兒對MP普遍易感，且MP陽性率隨年齡增長降低，分析可能隨年齡增長兒童免疫力增強(qiáng)，肺炎支原體感染率下降。女性兒童感染率稍高于男性，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

由于MP缺少細(xì)胞壁，對β-內(nèi)酰胺類、糖肽類和磺胺類等藥物存在固有耐藥。臨床多采用大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、喹諾酮類抗生素治療。但對于兒童，由于四環(huán)素類藥物因可引起牙齒著色故在妊娠后期、新生兒以及8歲以下兒童中限制使用，氟喹諾酮類可引起軟骨發(fā)育異常，因此不能應(yīng)用于兒童，故兒童臨床推薦使用大環(huán)內(nèi)酯類藥物[3]。由本次統(tǒng)計(jì)顯示，MP對大環(huán)內(nèi)酯類藥物普遍高度敏感，敏感度均在90%以上。本研究僅發(fā)現(xiàn)2株對4種以上藥物耐藥的肺炎支原體，所以大環(huán)內(nèi)酯類藥物仍是治療兒童MP感染的首選。肺炎支原體對大環(huán)內(nèi)酯類的耐藥機(jī)制主要與靶位點(diǎn)突變有關(guān)[10-12]，臨床可根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果選擇敏感抗菌藥物進(jìn)行治療。有研究報(bào)道[13]采用中西醫(yī)結(jié)合治療小兒支原體肺炎比單用大環(huán)內(nèi)酯類藥物療效顯著。對于存在高危因素的難治性肺炎支原體肺炎的患兒[14]臨床可采用激素治療[15]。

[1] 郭紅年.阿奇霉素治療小兒支原體肺炎臨床療效[J].新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，25(1):54-55.

[2] 劉禧杰，辛德莉，李 靖，等.肺炎支原體對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的耐藥分子機(jī)制[J].實(shí)用兒科臨床雜志，2008，23(22)：1730-1733.

[3] 陸 權(quán).兒童社區(qū)獲得性肺炎管理指南(試行)(上)[J].中華兒科雜志，2007，44(2):83-90.

[4] 王 楠，張 凱，張國成.兒童肺炎支原體西安流行株的基因分型[J].臨床兒科雜志，2013，31(5):455-458.

[5] 張金蓉.小兒肺炎支原體的快速培養(yǎng)鑒定法[J].中國誤診學(xué)雜志，2008，8(16):3819-3820.

[6] 錢新宏，張國成，許東亮.肺炎支原體快速鑒定培養(yǎng)基在兒童支原體感染快速診斷中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，21(5):71-72.

[7] 焦西英，錢新宏，宋 琳，等.西安地區(qū)兒童肺炎支原體感染的流行病學(xué)分析[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，26(2)：123-124.

[8] Chaudhry R，Nisar N，Hora B，etal.Expression and immunological characterization of the carboxy-terminal region of the P1 adhesin protein of Mycoplasma pneumonia[J].J Clin Microbiol，2005，43(1)：321-325.

[9] Dankert J，Zaat SAJ. Genotyping of Mycoplasma pneumonia clinical isolates reveals eight P1 subtypes within two genomic groups [J].J Clin Microbiol，2000，38(3)：965-970.

[10] 劉 艷，黃澤智，蒙松年，等.肺炎支原體對紅霉素體外耐藥性與耐藥基因相關(guān)性研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2017，38(2)：148-150.

[11] 辛德莉，韓 旭，糜祖煌，等.肺炎支原體對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥性及耐藥機(jī)制研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2008，31 (5):543-546.

[12] Stakenborg T，Vicca J，Butaye P，etal.Characterization of in vivo acquired resistance of Mycoplasma hyopneumoniae to macrolides and lincosamides〔J〕.Microb Drug Resist，2005，11(3):290-4.

[13] 馮璐璐.中醫(yī)辨證聯(lián)合西藥治療小兒支原體肺炎38例[J].陜西中醫(yī)，2008，29(3)282-283.

[14] 楊 勇，崔 巍，王利東，等.小兒難治性肺炎支原體肺炎高危因素分析[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2010，39(11)：1498-1500.

[15] 楊 勇，吉朝利，劉 艷，等.不同劑量甲基強(qiáng)的松龍治療兒童難治性肺炎支原體肺炎對照分析[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2013，42(7):890-892.