夏培培
如皋糧食儲(chǔ)備庫(kù) 江蘇南通 226500
小麥的不完善粒包括:蟲蝕粒、病斑粒(黑胚粒和赤霉病粒)、破損粒、生芽粒、生霉粒[1]。小麥感染赤霉病后,不僅減產(chǎn)嚴(yán)重,而且品質(zhì)惡化,種用利用價(jià)值降低。近年來,由于氣候適宜赤霉病的流行,麥粒中毒素檢出量都很高。嘔吐毒素又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON),與雪腐鐮刀菌烯醇均屬于單端孢霉烯族化合物。主要由某些鐮刀菌產(chǎn)生的,常出現(xiàn)在玉米(穗腐?。⑿←満痛篼湥ǔ嗝共。┥稀C咕ǔO埠脻窭錃夂?,菌呈白色或紅色。因它可以引起豬的嘔吐而得名,對(duì)人體有一定危害作用,可引起人畜急慢性中毒。急慢性中毒會(huì)導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀,嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡。嘔吐毒素可能對(duì)免疫系統(tǒng)有影響,還具有很強(qiáng)的皮膚毒性和細(xì)胞毒性。小麥赤霉病的主要病原菌是禾谷鐮刀菌。相關(guān)研究表明,小麥赤霉病發(fā)病程度和籽粒中嘔吐毒素含量密切相關(guān),病小麥穗率高則嘔吐毒素含量也高,反之亦然[2]。
相關(guān)研究表示要降低嘔吐毒素含量,對(duì)于小麥赤霉病含量高的處理方法有近紅外、比重分離、水漂法等多種方法[3]。在收購(gòu)過程中對(duì)于赤霉病粒高的小麥安全入倉(cāng),最好、最快、適合大批量的處理方法是比重分離。比重清選機(jī)原理根據(jù)清選種子中外形尺寸與其相同而比重不同的各類輕雜和重雜,通過分離去除雜質(zhì)和輕質(zhì)嚴(yán)重病粒,將赤霉病粒含量降到近一半,再根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)決定等級(jí)是否能入倉(cāng)。
1.1.1 小麥
試樣扦取如皋糧食儲(chǔ)備庫(kù)收購(gòu)時(shí)節(jié)種糧大戶來糧車、船小麥樣10份。
1.1.2 主要儀器和試劑
酶標(biāo)儀;嘔吐毒素酶聯(lián)免疫法試劑盒(華安麥科);電熱恒溫培養(yǎng)箱;大型比重清選機(jī)(新鄉(xiāng)博華機(jī)械型號(hào)BD700);移動(dòng)式環(huán)保清理篩(型號(hào)TCQYYIS);組合式裝卸輸送帶(云龍糧機(jī)型號(hào)YL)。
現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB1351—2008《小麥》取消了原標(biāo)準(zhǔn)中赤霉病粒4%的限量要求,赤霉病粒仍歸病斑粒,由不完善粒總量控制。小麥?zhǔn)欠衲馨踩雮}(cāng),則根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB2761—2017《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》,由嘔吐毒素含量是否超標(biāo)來確定,其限量為≤1000μg/kg[4]。
嘔吐毒素的檢驗(yàn)方法有同位素稀釋液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、免疫親和柱層析凈化高效液相色譜法、薄層色譜法、酶聯(lián)免疫法。酶聯(lián)免疫法又分試劑盒法和膠體金快速定量法。由于收購(gòu)的條件限制,可以用赤霉病粒的多少來間接判斷嘔吐毒素是否超標(biāo)。對(duì)于嚴(yán)重感染赤霉病的小麥通過比重分選減少赤霉病粒,控制嘔吐毒素的含量。為了提高判斷的準(zhǔn)確性,我們通過大量的試驗(yàn),找到了赤霉病粒與嘔吐毒素含量的關(guān)系,有效地提高小麥?zhǔn)召?gòu)速度。經(jīng)分選處理后的小麥赤霉病??梢钥刂圃谝欢ǚ秶蛊溥_(dá)到安全入倉(cāng)的標(biāo)準(zhǔn),避免因誤判導(dǎo)致嘔吐毒素超標(biāo)小麥入庫(kù),給企業(yè)帶來?yè)p失。
1.2.1 不完善粒的檢測(cè)
按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5494—2008《糧油檢驗(yàn) 糧食、油料的雜質(zhì)、不完善粒檢驗(yàn)》[5]進(jìn)行。赤霉病粒單獨(dú)計(jì)算。
1.2.2 赤霉病小麥比重分選處理方法
經(jīng)檢驗(yàn)后赤霉病粒高的小麥,經(jīng)過清雜處理后,用輸送帶送入比重分選機(jī),利用糧食的空氣動(dòng)力學(xué)特性,將質(zhì)量不同的小麥進(jìn)行分級(jí)分層,與篩面接觸的較重小麥赤霉病含量小,從進(jìn)料端至排料端向高處運(yùn)行,而較輕的赤霉病含量高的小麥向低處運(yùn)行,從而達(dá)到分離目的。
1.2.3 嘔吐毒素檢測(cè)
按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.111—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測(cè)定》[6]第四法 酶聯(lián)免疫吸附篩查法,先將分選前后小麥試樣粉碎至20目篩,稱取5.0g至100mL具塞三角瓶中,加去離子水25mL,振蕩10min,靜置3min,定量濾紙過濾,取1mL+4mL水稀釋,再取50μL進(jìn)樣。其它步驟按試劑盒說明書:先加標(biāo)準(zhǔn)樣/樣品50μL/孔→加酶標(biāo)物50μL/孔再加抗試劑50μL/孔輕輕振搖→蓋板膜蓋板25℃避光反應(yīng)15min→拿出將孔內(nèi)液體甩出250μL/孔洗液洗板,5次每次間隔10s在吸水紙拍干→顯色:加底物液100μL/孔→蓋板膜蓋板25℃避光反應(yīng)5min→加終止液50μL/孔→上酶標(biāo)儀450nm處測(cè)定吸光度。
由表1看出,赤霉病嚴(yán)重的小麥通過比重分選處理,去除雜質(zhì)、輕質(zhì)重病小麥后,樣品中赤霉病粒含量變化是呈減少的趨勢(shì),分選后最多的減少52.3%、最少的減少48.1%。所有樣品經(jīng)過比重分選處理,赤霉病粒平均含量減少了近一半,嘔吐毒素的含量也相應(yīng)降低,降低幅度接近。
表1 面條評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
本檢測(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表明,可以得出小麥的嘔吐毒素含量基本是隨赤霉病粒含量的增加而增加,二者呈正相關(guān)線性關(guān)系,擬合出直線方程 y=201.5x+537.6,其 R2=0.909,小麥赤霉病粒含量與嘔吐毒素含量呈顯著正相關(guān),其相關(guān)性曲線見圖1。根據(jù)擬合所得的直線方程,可以推算得出嘔吐毒素含量滿足國(guó)標(biāo)限量要求時(shí)(小麥嘔吐毒素含量≤1000μg/kg),赤霉病粒含量應(yīng)≤2.3%。即,當(dāng)小麥赤霉病粒含量低于2.3%時(shí),其嘔吐毒素含量不超過食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的限量要求。
圖1 赤霉病含量與DON含量相關(guān)性曲線
蘇憲慶[2]等研究的結(jié)果也認(rèn)為隨著小麥赤霉病粒含量的增加,嘔吐毒素含量也逐漸增加,二者呈正相關(guān)線性關(guān)系,擬合出直線方程 y=297.6x+135.96,其 R2=0.9821,相關(guān)性較為顯著,從而推得嘔吐毒素含量滿足國(guó)標(biāo)限量要求時(shí),赤霉病粒含量應(yīng)≤2.9%。另外,艾蘭虹[7]的研究也認(rèn)為,控制小麥赤霉病含量≤3%,可確保小麥嘔吐毒素含量符合國(guó)家糧食衛(wèi)生指標(biāo)規(guī)定(≤1000μg/kg)。
為此,從嚴(yán)把質(zhì)量安全關(guān)來考慮,將赤霉病粒含量輔助標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整為≤2%,或在收購(gòu)過程中,糧庫(kù)結(jié)合當(dāng)時(shí)當(dāng)?shù)貙?shí)際情況對(duì)赤霉病粒含量確定一個(gè)限量。對(duì)赤霉病超過限量的小麥,通過比重分選處理后,檢測(cè)能達(dá)到要求的方可入庫(kù),而檢測(cè)不合格的小麥,則作為飼料糧另行存放或由售糧人自行處理,確保入庫(kù)小麥嘔吐毒素含量不超標(biāo)。
除收購(gòu)過程中把好關(guān)外,每天收購(gòu)結(jié)束對(duì)倉(cāng)房?jī)?nèi)小麥扦取綜合樣,用膠體金快速定量法進(jìn)行檢測(cè)非常必要,可及時(shí)了解倉(cāng)房?jī)?nèi)整個(gè)小麥嘔吐毒素含量,并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果在接下來的收購(gòu)過程中及時(shí)調(diào)整赤霉病粒的控制量。另外,在整倉(cāng)收購(gòu)?fù)瓿珊螅捎妹嘎?lián)免疫法或高效液相色譜法準(zhǔn)確測(cè)定嘔吐毒素含量,作為以后相關(guān)驗(yàn)收及銷售的憑證。
糧食企業(yè)在糧食收購(gòu)過程中既要保證收到符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的小麥,又要切實(shí)解決農(nóng)民賣糧難的問題。對(duì)赤霉病粒超標(biāo)嚴(yán)重的小麥通過風(fēng)選加比重分選的工藝去除雜質(zhì)和輕質(zhì)病重小麥,從而將赤霉病粒含量減少,以期達(dá)到收購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)。再通過赤霉病含量的檢測(cè)來輔助判斷嘔吐毒素是否超標(biāo),這樣操作簡(jiǎn)便、快速,對(duì)收購(gòu)小麥入倉(cāng)很有幫助,并可降低檢測(cè)成本。
鑒于小麥赤霉病粒的檢測(cè)主要依靠感官判定,存在一定的人為誤差風(fēng)險(xiǎn)。為有效確保儲(chǔ)備小麥嘔吐毒素符合國(guó)標(biāo)限量要求,在實(shí)際工作中不能只依靠檢測(cè)赤霉病粒含量來判斷嘔吐毒素是否超標(biāo)。仍然必須及時(shí)了解倉(cāng)房?jī)?nèi)整個(gè)小麥嘔吐毒素含量,并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果及時(shí)調(diào)整赤霉病粒的控制量。
為了減少小麥赤霉病的發(fā)生,在本區(qū)域種植范圍內(nèi)應(yīng)杜絕使用易感病品種(揚(yáng)麥13、揚(yáng)麥20、鎮(zhèn)麥9),選擇適宜的播種期追足基肥減少生育進(jìn)程的差異,減少秸稈還田稻麥連作降低田間菌源量等。
[1]GB1351—2008小麥[S]
[2]蘇憲慶,顧偉,王曉波,等.小麥嘔吐毒素含量與赤霉病粒含量的相關(guān)性研究[J],糧食與油脂,2015(12):22-24
[3]卞科,關(guān)二旗,李萌萌,等.赤霉病小麥中嘔吐毒素消減去除方法研究[C].中國(guó)糧油學(xué)會(huì)儲(chǔ)藏分會(huì)成立30周年學(xué)術(shù)交流會(huì),2015
[4]GB2761—2017食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量[S]
[5]GB/T5494—2008糧油檢驗(yàn) 糧食、油料的雜質(zhì)、不完善粒檢驗(yàn)[S]
[6]GB/T5009.111—2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測(cè)定[S]
[7]艾蘭虹.小麥赤霉病及嘔吐毒素的分析檢測(cè)[J].糧油食品科技,2011(5):46-47