趙 越 孔祥峰 姬玉嬌 耿梅梅 李華偉 王占彬

(1.河南科技大學動物科技學院，洛陽 471003；2.中國科學院亞熱帶農業(yè)生態(tài)研究所，亞熱帶農業(yè)生態(tài)過程重點實驗室，長沙 410125；3.中國科學院環(huán)江喀斯特農業(yè)生態(tài)試驗站，香豬研究中心，環(huán)江 547100)

環(huán)江香豬是我國著名的地方品種豬。由于目前的飼養(yǎng)管理粗放，造成環(huán)江香豬的母豬繁殖率低、仔豬成活率低[1]。配種前后飼糧營養(yǎng)水平會影響初產母豬妊娠早期的胚胎成活率[2]；母體營養(yǎng)不足或過剩均會減少母體對胎兒的血液、營養(yǎng)物質和氧氣的供應，阻礙胎兒的生長發(fā)育[3-6]。因此，改善飼糧營養(yǎng)供給，對提高母豬繁殖性能和胎兒生長發(fā)育至關重要。羊水是母體血漿通過胎膜進入羊膜腔的透析液以及通過臍帶和胎盤表面的羊膜產生的液體，其除蛋白質含量稍低外，其余成分與母體血漿相似[7]。在妊娠中后期，胎兒能通過吞咽羊水來攝取養(yǎng)分、活性因子和抗菌物質合成前體，來支持和促進自身的生長發(fā)育和腸道成熟[8]。尿囊液主要源于尿液和尿囊上皮分泌物，其中含有的氨基酸和蛋白質等多種營養(yǎng)物質能被尿膜吸收，進入胎兒-胎盤循環(huán)并最終被胎兒利用[9-10]。前期研究表明，與飼喂低氮能比飼糧相比，飼喂高氮能比飼糧45和75 d后母豬背膘厚(27.2 mm vs. 26.9 mm；36.6 mm vs. 28.1 mm)以及妊娠45、75和110 d胎兒個體重(16.1 g vs. 13.6 g；184.6 g vs. 155.7 g；591.5 g vs. 418.0 g)均有所提高[11]。祝倩等[12]研究表明，飼喂高氮能比飼糧有利于胎豬臍帶血管的發(fā)育。劉俊鋒等[3]研究發(fā)現，妊娠早期環(huán)江香豬的胎兒重與胎盤重量、子宮重量、羊水+尿囊液體積以及生化參數緊密相關?？梢?，羊水與尿囊液化學成分的變化可以反映胎兒-母體間營養(yǎng)素轉運和胎兒生長發(fā)育的狀況[8]。因此，通過改善飼糧組成促進母體血液與羊水、尿囊液之間的物質交換，是促進胎豬生長發(fā)育、提高活產仔數的重要手段。本試驗旨在研究不同氮能比飼糧對妊娠母豬羊水和尿囊液生化參數的影響，為提高妊娠母豬繁殖性能提供營養(yǎng)調控依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物、分組和飼養(yǎng)管理

試驗選用首次妊娠的環(huán)江香豬48頭，隨機分為2組，每組24頭，每組8個重復(欄)，每個重復3頭。2組母豬配種后分別飼喂高氮能比飼糧[參照NRC(2012)飼養(yǎng)標準推薦的營養(yǎng)需要量配制；消化能(DE)為14.73 MJ/kg，粗蛋白質(CP)含量為13.11%，氮能比為0.89]和低氮能比飼糧[參照我國《豬飼養(yǎng)標準》(NY/T 65—2004)中地方豬營養(yǎng)需要量配制；DE為12.24 MJ/kg，CP含量為9.77%，氮能比為0.80]，2種試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。整個試驗期間，每日每欄母豬的總采食量為3頭母豬總體重的2.5%。每日08:30和17:00各飼喂1次，自由飲水。

1.2 樣品采集

分別于妊娠第45天(前期)、第75天(中期)和第110天(后期)，每欄隨機取1頭母豬，心臟放血處死后屠宰，收集每窩胎豬并稱重，選取每窩中最大體重、中間體重和最小體重胎豬對應的羊水和尿囊液[11]，置于10 mL離心管中，液氮速凍后-80 ℃保存。

1.3 羊水和尿囊液生化參數測定

樣品于4 ℃解凍后，用CX4型全自動生化分析儀(Beckman公司)測定羊水和尿囊液中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素(UREA)、尿酸(UA)和葡萄糖(GLU)的含量以及堿性磷酸酶(ALP)、谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)和肌酸激酶(CK)的活性。生化試劑盒購于北京利德曼生化技術有限公司。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

1)預混料為每千克飼糧提供The premix provides the following per kg of diets:VA 12 040 IU，VD32 112 IU，VE 29.7 IU，VK32.8 mg，VB11.2 mg，VB27.1 mg，VB61.3 mg，VB120.03 mg，煙酸 nicotinic acid 42.9 mg，泛酸 pantothenic acid 21.6 mg，葉酸 folic acid 0.44 mg，生物素 biotin 0.12 mg，膽堿choline 320 mg，Fe 80 mg，Cu 40 mg，Zn 140 mg，Mn 52 mg，I 0.56 mg，Co 1.4 mg，Se 0.33 mg。

2)粗蛋白質、粗纖維和粗脂肪為實測值，其余為計算值。CP, CF and EE were measured values, while the others were calculated values.

1.4 數據處理與分析

利用SPSS 17.0軟件對同一妊娠時間和標準體重、不同飼糧組間的數據進行獨立樣本t檢驗，對同一飼糧組和妊娠時間、不同標準體重的數據進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用LSD法進行組間多重比較。數據以“平均值±標準誤”表示。P<0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 妊娠環(huán)江香豬羊水生化參數的變化

飼喂不同氮能比飼糧的妊娠環(huán)江香豬的羊水生化參數數據見表2。

在相同妊娠時間和相同標準體重條件下，與飼喂低氮能比飼糧相比，飼喂高氮能比飼糧可顯著提高妊娠45 d最大體重胎豬ALB、ALT和AST活性與中間體重胎豬ALP活性及最小體重胎豬TP含量，妊娠75 d最大體重胎豬ALB活性和UREA含量及最小體重胎豬ALT活性，妊娠110 d最大體重胎豬ALP和CK活性以及TP、UREA和GLU含量與中間體重胎豬AST和CK活性(P<0.05)；同時，飼喂高氮能比飼糧還可顯著降低妊娠45 d最大和中間體重胎豬CK活性與最小體重胎豬ALT活性(P<0.05)，妊娠75 d最大體重胎豬AST活性、中間體重胎豬TP和GLU含量以及最小體重胎豬ALB、TP和GLU含量，妊娠110 d最大體重胎豬ALT和中間體重胎豬CK活性與最小體重胎豬ALT和CK活性以及GLU含量(P<0.05)。

與相同飼糧和相同妊娠時間的中間體重胎豬相比，高氮能比飼糧組妊娠45 d最大體重胎豬UREA和UA含量以及ALT活性與妊娠75 d最大體重胎豬ALT活性以及ALB、UREA和UA含量均顯著增加(P<0.05)，妊娠45 d最小體重胎豬UA含量、妊娠75 d最小體重胎豬ALB含量均顯著降低(P<0.05)；低氮能比飼糧組妊娠45 d最大體重胎豬TP和UA含量以及ALP活性，妊娠75 d最大體重胎豬UA含量以及ALP、ALT和AST活性，妊娠110 d最大體重胎豬UREA和UA含量以及ALP、ALT和CK活性，最小體重胎豬UREA和GLU含量以及ALT活性均顯著增加(P<0.05)，妊娠45 d最大、最小體重胎豬AST活性以及妊娠110 d最小體重胎豬CK活性均顯著降低(P<0.05)。

隨妊娠時間的延長，低氮能比飼糧組中間體重胎豬TP含量、3個標準體重胎豬ALP活性、最大體重胎豬ALT活性，高氮能比飼糧組中間體重胎豬ALT活性以及最大體重胎豬CK活性，2個飼糧組胎豬UREA和UA含量，除高氮能比飼糧組最小體重胎豬外的其余標準體重胎豬GLU含量和AST活性均逐漸增加。

表2 不同氮能比飼糧對妊娠環(huán)江香豬羊水生化參數的影響

續(xù)表2指標Items妊娠時間Pregnanttime/d低氮能比飼糧組Lownitrogen/energydietgroup最大體重MaximalBW中間體重MiddleBW最小體重MinimalBW高氮能比飼糧組Highnitrogen/energydietgroup最大體重MaximalBW中間體重MiddleBW最小體重MinimalBW尿酸UA/(g/L)451.85±0.18a0.81±0.08b0.88±0.06b2.44±0.40a1.54±0.15b0.70±0.07c753.00±0.23a2.26±0.29b1.64±0.13b3.63±0.36a1.97±0.10b1.56±0.15b11015.20±1.35a9.03±1.11b6.00±2.11b13.10±0.06a8.60±0.06b6.80±1.80b葡萄糖GLU/(nmol/L)450.62±0.070.82±0.150.79±0.180.99±0.221.03±0.110.87±0.20750.75±0.070.95±0.080.97±0.100.85±0.100.70±0.04*0.70±0.05*1100.75±0.06b0.97±0.09b1.46±0.08a1.25±0.01a*0.70±0.06b0.50±0.09b*堿性磷酸酶ALP/(U/L)455.25±0.34a3.05±0.43b4.24±0.55ab5.42±0.624.98±0.74*4.94±0.61755.94±0.84a3.63±0.19b4.99±0.54ab5.33±0.654.53±0.423.74±0.4611011.53±0.44a8.60±1.20b6.60±0.35b22.30±0.06a*11.80±0.06b5.20±0.06c谷丙轉氨酶ALT/(U/L)456.61±0.68b7.70±0.57ab9.71±1.04a10.68±0.80a*7.40±0.70b6.84±0.44b*759.09±0.50a6.49±0.38b6.79±0.55b9.20±0.48b5.91±0.83c12.03±1.11a*11010.40±0.23a8.55±0.79b11.65±0.13a8.50±0.06b*10.40±0.06a6.30±0.06c*谷草轉氨酶AST/(U/L)452.70±0.50c5.94±0.28a3.94±0.43b6.40±0.39a*5.68±0.78ab3.62±0.84b7513.60±1.17a9.73±1.05b6.90±0.67b9.91±0.93*7.73±1.586.90±0.6311026.73±1.03a20.78±3.48ab19.20±0.78b30.30±0.17b61.10±0.06a*20.60±0.06b肌酸激酶CK/(U/L)456.80±0.986.30±0.504.95±0.832.92±0.76*3.58±0.57*4.72±0.77754.61±0.464.97±0.883.66±0.556.70±1.095.31±0.684.17±0.6911015.40±0.92a9.13±1.34b5.90±0.19c25.10±0.05a*3.60±0.05b*3.00±0.21b*

不同小寫字母表示相同飼糧組同行數據間比較差異顯著(P<0.05)；*表示相同妊娠時間和標準體重時與低氮能比飼糧組相比差異顯著(P<0.05)。下表同。

Values of the same diet group in the same row with different small letter superscripts significantly differ (P<0.05); * means significantly differ compared with the low nitrogen/energy diet group under the same pregnant time and standard body weight (P<0.05). The same as below.

2.2 妊娠環(huán)江香豬尿囊液生化參數的變化

飼喂不同氮能比飼糧的妊娠環(huán)江香豬的尿囊液生化參數數據見表3。

在相同妊娠時間和相同標準體重條件下，與飼喂低氮能比飼糧相比，飼喂高氮能比飼糧可顯著提高妊娠45 d最大體重胎豬ALT活性與最小體重胎豬ALB、UA含量和AST活性，妊娠75 d最大體重胎豬UREA和ALB含量與中間體重胎豬TP、UREA、UA和GLU含量及最小體重胎豬UREA、UA和GLU含量以及ALP、ALT和CK活性，妊娠110 d最大體重胎豬GLU含量和ALT活性與中間體重胎豬GLU含量(P<0.05)；同時，飼糧高氮能比飼糧還可顯著降低妊娠45 d最大體重胎豬UA含量和AST活性與中間體重胎豬ALT和CK活性以及最小體重胎豬CK活性，妊娠75 d最大體重胎豬UA含量和CK活性與中間、最小體重胎豬AST活性，妊娠110 d最小體重胎豬AST活性(P<0.05)。

與相同飼糧和相同妊娠時間的中間體重胎豬相比，高氮能比飼糧組妊娠45 d最大體重胎豬ALT活性與最小體重胎豬ALB含量以及ALT和AST活性，妊娠75 d最大體重胎豬UREA含量和AST活性與最小體重胎豬UREA含量以及ALP、AST和CK活性，妊娠110 d最大體重胎豬UA含量和ALT活性與最小體重胎豬TP、UREA和GLU含量以及AST活性均顯著增加(P<0.05)，妊娠45 d最大體重胎豬UA含量和AST活性與妊娠75 d最大體重胎豬CK活性以及妊娠110 d最小體重胎豬UA含量和ALT活性均顯著降低(P<0.05)；低氮能比飼糧組妊娠45 d最大體重胎豬UA含量與最小體重胎豬UA和GLU含量以及CK活性，妊娠75 d最大體重胎豬TP和UA含量以及ALP、AST和CK活性與最小體重胎豬AST活性，妊娠110 d最小體重胎豬ALB含量和CK活性均顯著增加(P<0.05)，妊娠45 d最大體重胎豬ALT和CK活性與妊娠75 d最大體重胎豬ALB含量以及妊娠110 d最大體重胎豬ALT、AST和CK活性和最小體重胎豬ALT活性均顯著降低(P<0.05)。

隨妊娠時間的延長，低氮能比飼糧組最小體重胎豬ALB活性、最大體重胎豬ALT活性，高氮能比飼糧組最小體重胎豬GLU含量、中間體重胎豬ALT活性，2個飼糧組胎豬UA含量，除高氮能比飼糧組最大體重胎豬外的其余標準體重胎豬UREA含量均逐漸增加。

表3 不同氮能比飼糧對妊娠環(huán)江香豬尿囊液生化參數的影響

3 討 論

羊水和尿囊液中的生化成分是胎兒生命活動的物質基礎，其含量或活性的變化可反映胎兒組織細胞通透性與機體新陳代謝狀況。ALP活性可反映成骨細胞活性、骨骼生成和鈣與磷代謝狀況[13]。本研究中，與低氮能比飼糧相比，高氮能比飼糧可顯著提高妊娠45 d中間體重胎豬和妊娠110 d最大體重胎豬羊水中ALP活性以及妊娠75 d最小體重胎豬尿囊液中ALP活性，這有助于胎豬的骨骼生長發(fā)育。血液中AST和ALT活性的升高可反映肝臟損傷情況[14]。與低氮能比飼糧相比，高氮能比飼糧可顯著降低妊娠75 d中間、最小體重胎豬和妊娠110 d最小體重胎豬尿囊液中AST活性，提示飼喂高氮能比飼糧可對胎豬肝臟起到保護作用。UA是嘌呤代謝的終產物，主要經過腎臟排泄，血液中UA含量長期偏高容易引起腎臟和心血管系統(tǒng)疾病[15]。與低氮能比飼糧相比，高氮能比飼糧可顯著降低妊娠45和75 d最大體重胎豬尿囊液中UA含量，這在一定程度上可促進胎豬的腎臟發(fā)育，增強其功能。結構完整和功能正常的肌細胞使得CK極少透出細胞膜[16]。與低氮能比飼糧相比，高氮能比飼糧可顯著降低妊娠45 d最大、中間體重胎豬和妊娠110 d中間體重胎豬羊水中CK活性，以及妊娠45 d中間、最小體重胎豬和妊娠75 d最大體重胎豬尿囊液中CK活性，提示高氮能比飼糧可以保護胎豬肌細胞的完整性，推測高氮能比飼糧中的一些功能性氨基酸作為信號分子調節(jié)了機體關鍵代謝途徑，提高了胎豬的健康水平[17]。GLU是反映動物機體能量平衡的重要指標。高氮能比飼糧可顯著降低妊娠75 d中間、最小體重胎豬和妊娠110 d最小體重胎豬羊水中GLU含量，提示飼喂高氮能比飼糧能夠提高胎豬對GLU的利用效率。

胎兒的生長發(fā)育是一個復雜的過程，不同體重胎豬對營養(yǎng)物質的吸收利用效率不同[18]。TP和ALB含量一方面反映了機體對蛋白質的吸收與代謝狀況，同時也反映了機體的免疫狀況[19]。本試驗中，高氮能比飼糧組妊娠45和75 d以及低氮能比飼糧組妊娠45和110 d時最大體重胎豬羊水中ALB含量均顯著高于最小體重胎豬，可為大體重胎豬供給更多的含氮營養(yǎng)素，這可能是大體重胎豬發(fā)育較快的原因。同時推測，小體重胎豬羊水中營養(yǎng)物質供給不足造成其發(fā)育遲緩[20]。與低氮能比飼糧相比，高氮能比飼糧可顯著提高妊娠45 d最小體重胎豬羊水中TP含量，推測高氮能比飼糧可提高母體蛋白質攝入，提高羊水中TP含量，從而緩解宮內發(fā)育遲緩現象[21]。與低氮能比飼糧相比，高氮能比飼糧顯著增加了妊娠45 d最小體重胎豬尿囊液中ALB含量，推測宮內發(fā)育遲緩胎豬對含氮營養(yǎng)素的利用出現了障礙，導致ALB排出量增多。此外，最大體重胎豬羊水中UA含量普遍顯著高于中間、最小體重胎豬，提示胎豬體重過大其營養(yǎng)需要量會相應增多，進而增加了肝臟代謝負擔[22]。

不同妊娠時間的胎豬對營養(yǎng)物質的利用效率不同[23]。UREA是蛋白質與氨基酸分解代謝的終產物，其含量越低則表明機體的氮利用率越高。本試驗中，隨著妊娠時間的延長，羊水和尿囊液中UREA含量普遍升高，提示妊娠后期胎豬對蛋白質的利用率降低，可適當降低飼糧蛋白質水平，這與郭海燕等[2]的研究結果類似。另外，妊娠110 d時胎豬羊水中ALP活性高于其他妊娠時間的胎豬，提示妊娠后期胎豬的骨骼生長速度加快。

4 結 論

由上可知，飼喂高氮能比飼糧可通過調節(jié)羊水和尿囊液生化參數促進胎豬的生長發(fā)育；與中間、最小體重胎豬相比，最大體重胎豬對蛋白質的利用效率更高。

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