毛俊舟 董 麗 王淑楠 彭 眾 仲召鑫 屈國(guó)敏 喻禮懷*

(1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州 225009；2.溧陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，常州 213300)

仔豬斷奶時(shí)腸道發(fā)育不完善、機(jī)體免疫功能低下，易引起斷奶應(yīng)激綜合征，導(dǎo)致腸道菌群紊亂和腹瀉，嚴(yán)重影響仔豬生長(zhǎng)發(fā)育[1]?？股睾透咪\因能有效緩解仔豬斷奶應(yīng)激造成的不利影響被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐[2]。但是，研究人員發(fā)現(xiàn)使用抗生素和高鋅有諸多弊端，如抗生素導(dǎo)致的藥物殘留、細(xì)菌耐藥性等；動(dòng)物飼用高劑量的鋅，鋅由于消化率低會(huì)隨著糞便大量排出體外，造成資源浪費(fèi)和環(huán)境污染[3]，歐盟、荷蘭和美國(guó)等多個(gè)國(guó)家已經(jīng)限定仔豬飼料中鋅的添加量。因此，探索鋅的合理利用方法，積極尋找有效緩解仔豬斷奶應(yīng)激的抗生素替代品勢(shì)在必行。在已知方法中，使用納米氧化鋅是替代傳統(tǒng)氧化鋅的潛在可行方案，與傳統(tǒng)氧化鋅比，納米氧化鋅效果更加顯著[4]。納米氧化鋅具有顆粒小、比表面積大、吸收率高等特性，其粒徑為1～100 nm，能夠調(diào)節(jié)動(dòng)物免疫力和繁殖性能[5]。研究已經(jīng)證明飼糧中添加200～1 000 mg/kg納米氧化鋅對(duì)家畜和家禽均具有不同程度促生長(zhǎng)作用，能夠改善動(dòng)物機(jī)體腸道黏膜形態(tài)、降低腹瀉率等，還能夠刺激生物體細(xì)胞、體液及非特異免疫功能，提高機(jī)體抗病能力[6-8]；Zhao等[9]研究發(fā)現(xiàn)飼喂肉雞60 mg/kg納米氧化鋅能夠提高后期日增重；Long等[10]在斷奶仔豬飼糧中添加500 mg/kg納米氧化鋅發(fā)現(xiàn)能夠顯著提高日增重、日采食量，降低腹瀉率，效果優(yōu)于3 000 mg/kg氧化鋅。但高劑量納米氧化鋅具有毒性負(fù)作用[11]。

凹凸棒土(attapulgite)簡(jiǎn)稱凹土，又稱為坡縷石(palygorskite)，是一種以硅酸鹽為主要成分的黏土礦[理論化學(xué)式為Si8Mg5O20(OH)2.4H2O]，無毒、無味、無刺激性，廉價(jià)易得。凹土具有表面多孔、比表面積大、陽(yáng)離子可交換特性，且對(duì)鉛離子(Pb2+)、銅離子(Cu2+)、抗生素等具有良好的吸附效果[12-15]。此外，有研究表明黏土類礦物質(zhì)是一種控釋載體，能夠控制生物活性分子、藥物及營(yíng)養(yǎng)素等物質(zhì)的釋放[16-18]。因此，凹土自2011年起被列入飼料添加劑名單[19]。研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中添加2 000 mg/kg凹土能顯著提高仔豬平均日采食量，提高飼料轉(zhuǎn)化率，且有效改善仔豬腸道健康[20]；Tang等[21]發(fā)現(xiàn)飼糧中添加1 800 mg/kg凹土能顯著增加仔豬平均日增重，減少腹瀉，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)，提高經(jīng)濟(jì)效益。但大量研究表明，凹土添加劑量過高，會(huì)影響仔豬生長(zhǎng)發(fā)育[21-23]。前人研究均局限于添加高劑量凹土，尚未發(fā)現(xiàn)低劑量凹土在仔豬中使用效果，同時(shí)有關(guān)500～1 000 mg/kg納米氧化鋅在仔豬飼糧中添加效果褒貶不一。因此，本試驗(yàn)立足于前人研究結(jié)果，結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)成本考慮，將同比例低劑量凹土與不同水平納米氧化鋅顆粒結(jié)合，組成凹土納米氧化鋅，并通過在斷奶仔豬飼糧中添加凹土納米氧化鋅，探索低劑量凹土和納米氧化鋅結(jié)合體在斷奶仔豬飼養(yǎng)前期的適宜添加量和替代抗生素及高鋅成為新型綠色健康添加劑的可能性。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所用氧化鋅(白色粉末狀)、納米氧化鋅(白色粉末狀，純度≥99%，平均粒徑45 nm)和凹土納米氧化鋅(純度為85%，由80%納米氧化鋅和20%凹土組成，其中納米氧化鋅理化特性同上，凹土主要成分為硅酸鹽，雙層鏈狀結(jié)構(gòu))由揚(yáng)州大學(xué)化工學(xué)院提供；50%喹乙醇、15%金霉素、10%硫酸黏菌素由揚(yáng)州大學(xué)飼料廠提供；試驗(yàn)仔豬為21日齡杜×長(zhǎng)×大斷奶仔豬，由蘇州市太倉(cāng)金諸農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司提供。

試驗(yàn)所用硫酸黏菌素為2016年9月生產(chǎn)，根據(jù)中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第2428號(hào)規(guī)定可使用至2017年4月30日，本試驗(yàn)時(shí)間符合使用標(biāo)準(zhǔn)。且以上材料僅限于試驗(yàn)研究使用，旨在替代抗生素的使用。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取21日齡體重相近[(6.30±0.51) kg]的健康杜×長(zhǎng)×大斷奶仔豬210頭，隨機(jī)分為7組，分別為對(duì)照組(CON組，飼喂基礎(chǔ)飼糧)、抗生素組(ANT組，飼喂基礎(chǔ)飼糧+100 mg/kg 50%喹乙醇+150 mg/kg 15%金霉素+50 mg/kg 10%硫酸黏菌素)、氧化鋅組(ZO組，飼喂基礎(chǔ)飼糧+3 000 mg/kg氧化鋅)、納米氧化鋅組(NZO組，飼喂基礎(chǔ)飼糧+800 mg/kg納米氧化鋅)、低凹土納米氧化鋅組(LA-ZO組，飼喂基礎(chǔ)飼糧+700 mg/kg凹土納米氧化鋅)、中凹土納米氧化鋅組(MA-ZO組，飼喂基礎(chǔ)飼糧+1 000 mg/kg凹土納米氧化鋅)和高凹土納米氧化鋅組(HA-ZO組，飼喂基礎(chǔ)飼糧+1 300 mg/kg凹土納米氧化鋅)，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5頭豬。試驗(yàn)于2017年4月在江蘇省太倉(cāng)金諸種豬場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)預(yù)試期3 d，正試期9 d。

1.3 飼養(yǎng)管理及試驗(yàn)飼糧

豬場(chǎng)屬于規(guī)?；a(chǎn)，設(shè)備齊全，防疫及管理措施完善。試驗(yàn)仔豬均在同一舍內(nèi)飼養(yǎng)，飼糧為粉料，仔豬自由采食(每日飼喂4次，飼喂時(shí)間分別為06：30、10：30、14：30和18：30，每次添加量以料槽中略有剩余為宜)，自由飲水。每天清掃欄舍，保持欄內(nèi)衛(wèi)生，自然通風(fēng)，日常管理、消毒與防疫按照豬場(chǎng)常規(guī)程序進(jìn)行。

試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧參照NRC(2012)仔豬營(yíng)養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐配制，其組成和營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供The premix provided the following per kilogram of the diet：VA 6 000 IU,VD33 400 IU,VE 30 mg,VK32 mg,VB13.5 mg,VB25.5 mg,VB63.5 mg,VB1225.0 μg,生物素 biotin 0.05 mg,葉酸 folic acid 0.3 mg,D-泛酸D-pantothenic acid 20 mg,煙酸 niacin 20 mg,氯化膽堿 choline chloride 500 mg,Fe (as ferrous sulfate) 110 mg,Zn(as zinc sulfate) 100 mg,Cu (as copper sulfate) 20 mg,Mn (as manganese sulfate) 40 mg,Se (as sodium selenite) 0.30 mg,I (as potassium iodide) 0.40 mg。

2)營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。Nutrient levels were calculated values.

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)期間，全程以重復(fù)為單位記錄采食量，試驗(yàn)第1天和結(jié)束當(dāng)天08：00對(duì)每頭仔豬空腹稱重，計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及料重比(F/G)。

1.4.2 腹瀉率及腹瀉指數(shù)

試驗(yàn)期內(nèi)每天07：00觀察仔豬糞便，按照Castillo等[24]的方法對(duì)糞便進(jìn)行評(píng)分。0分：糞便條形或粒狀；1分：軟糞、能成形；2分：稠裝、不成形、糞水未分離；3分：液狀、不成形、糞水分離。當(dāng)糞便評(píng)分為2或以上時(shí)認(rèn)為仔豬發(fā)生腹瀉。計(jì)算試驗(yàn)期內(nèi)各組腹瀉率和腹瀉指數(shù)，計(jì)算公式如下：

腹瀉率(%)=100×試驗(yàn)期內(nèi)每組仔豬腹瀉頭次/(試驗(yàn)天數(shù)×每組仔豬頭數(shù))；腹瀉指數(shù)=100×試驗(yàn)期內(nèi)每組仔豬腹瀉總評(píng)分/每組仔豬頭數(shù)。

1.4.3 器官指數(shù)

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天屠宰，采血后，取心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胸腺、胰腺，吸水紙吸干表明多余血液，立即稱重，記錄，計(jì)算各器官指數(shù)。

器官指數(shù)(g/kg)=器官濕重(g)/豬活體重(kg)。

1.4.4 血液生化指標(biāo)

在試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天08：00，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1頭體重接近平均體重的仔豬，空腹前腔靜脈采血3 mL于抗凝管中，測(cè)定血液中堿性磷酸酶(ALP)和乳酸脫氫酶(LDH)活性以及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量，并計(jì)算白球比(A/G)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與處理

先用Excel 2010對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理，再用SPSS 20.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，用Duncan氏法對(duì)各組間平均數(shù)進(jìn)行多重比較，以P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，飼糧中添加抗生素、氧化鋅、納米氧化鋅和凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬末重及F/G無顯著影響(P>0.05)；與CON組相比，飼糧添加凹土納米氧化鋅顯著提高斷奶仔豬ADFI(P<0.05)，顯著提高ADG(P<0.05)；此外，HA-ZO組ADFI較ANT組提高34.78%(P<0.05)。

表2 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)相同字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬腹瀉的影響

由表3可知，與CON組相比，LA-ZO組、HA-ZO組斷奶仔豬腹瀉率顯著降低(P<0.05)，且LA-ZO組腹瀉率顯著低于ANT組(P<0.05)。與

CON組相比，凹土納米氧化鋅組腹瀉指數(shù)均顯著降低(P<0.05)；與ANT組和NZO組相比，LA-ZO組斷奶仔豬腹瀉指數(shù)顯著降低(P<0.05)。

表3 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬腹瀉的影響

2.3 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬器官指數(shù)的影響

由表4可知，與CON組相比，飼糧中添加不同水平的凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胸腺指數(shù)均無顯著影響(P>0.05)；與ANT組和NZO組相比，隨著凹土納米氧化鋅添加劑量增加，心臟指數(shù)有上升趨勢(shì)(P>0.05)；與NZO組相比，LA-ZO組和MA-ZO組胰腺指數(shù)顯著增加(P<0.05)。

表4 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬器官指數(shù)的影響

2.4 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響

由表5可知，與CON組相比，飼糧中添加不同水平的凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬血液ALP、LDH活性和TP、ALB、GLB、LDL含量以及A/G均無顯著影響(P>0.05)。與CON組相比，LA-ZO組和MA-ZO組血液TG含量顯著降低(P<0.05)。MA-ZO組血液TC含量與CON組相比降低23.04%(P<0.05)，與ZO組相比降低25.94%(P<0.05)。LA-ZO組血液HDL含量與CON組、ANT組和NZO組相比無顯著差異(P>0.05)，但顯著低

于ZO組(P<0.05)；MA-ZO組血液HDL含量與CON組和ANT組相比均提高54.55%(P<0.05)；相比于CON組、ANT組，HA-ZO組血液HDL含量均提高16.36%(P<0.05)。

表5 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

仔豬早期斷奶導(dǎo)致腸道發(fā)育不完善，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收率低，腹瀉頻率高，嚴(yán)重影響其生長(zhǎng)發(fā)育，而采食量和飼料轉(zhuǎn)化率是決定斷奶仔豬生長(zhǎng)速度的主要因素[25-26]。有研究表明，凹土和納米氧化鋅能有效緩解仔豬斷奶應(yīng)激，提高仔豬生長(zhǎng)性能。Wang等[27]等指出在斷奶仔豬飼糧中添加1 200 mg/kg納米氧化鋅相比于添加硫酸黏桿菌素-氧化鋅混合物改善了腸道屏障功能，從而保護(hù)腸道，降低了腹瀉率，且研究發(fā)現(xiàn)仔豬組織和排泄物中鋅的含量更低，說明減少了鋅的富集，提高了鋅的吸收利用，從而飼用少量納米氧化鋅達(dá)到高劑量傳統(tǒng)氧化鋅的效果。Long等[10]研究表明，飼糧中添加500 mg/kg納米氧化鋅能顯著提高斷奶仔豬ADG、ADFI和飼料轉(zhuǎn)化率，與3 000 mg/kg氧化鋅作用效果相當(dāng)。孟艷莉[28]研究發(fā)現(xiàn)在1～21日齡和22～42日齡仔豬飼糧中添加3 000 mg/kg凹土能提高腸道內(nèi)消化酶活性，促進(jìn)糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化，加快營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化，從而提高仔豬ADG和ADFI。從本試驗(yàn)結(jié)果看，減少凹土使用量也能夠達(dá)到上述相似結(jié)論，不同的是本試驗(yàn)所用添加劑非單一物質(zhì)，低劑量凹土所具體的功效有待進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)研究凹土與納米氧化鋅顆粒結(jié)合的凹土納米氧化鋅的應(yīng)用效果，發(fā)現(xiàn)與CON組相比，凹土納米氧化鋅能顯著提高斷奶仔豬ADG和ADFI，且LA-ZO組和MA-ZO組ADG和ADFI與ZO組效果相當(dāng)，同時(shí)LA-ZO組改善生長(zhǎng)性能方面優(yōu)于ANT組，促生長(zhǎng)功效在數(shù)值上優(yōu)于NZO組，且F/G最低，說明降低鋅和凹土的使用量能夠維持相近效果，這與前人研究結(jié)果相似，但不同的是隨著凹土納米氧化鋅劑量的增加，飼料轉(zhuǎn)化率逐漸降低。已有研究發(fā)現(xiàn)，凹土棒土具有黏性、流變性及離子交換性，能夠形成膠狀薄膜，提高凹土在仔豬腸道內(nèi)存留時(shí)間，改善絨毛生長(zhǎng)[18,20,28-29]，因此我們推測(cè)出現(xiàn)此試驗(yàn)結(jié)果的一個(gè)可能原因是凹土能夠形成膠狀薄膜，覆蓋于腸道黏膜表面，減少了黏膜的損傷以及與有害物質(zhì)的接觸，保證了黏膜完整性，并且隨著凹土與黏膜的緊密接觸，使凹土攜帶的納米氧化鋅微粒逐漸被腸道吸收，而且凹土本身攜帶的離子能夠與消化道中離子發(fā)生置換反應(yīng)，置換出的離子可能被腸道吸收后促進(jìn)各種消化酶的釋放，加快飼糧的轉(zhuǎn)化吸收，進(jìn)而提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能；但隨著凹土納米氧化鋅劑量的增加，仔豬腸道黏膜表面可能會(huì)覆蓋過量凹土納米氧化鋅，反過來阻礙了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而降低了飼料轉(zhuǎn)化率，但未達(dá)到顯著水平。此外，納米氧化鋅還能夠提高回腸中Lgr5和Bmil干細(xì)胞的增值速度，這類細(xì)胞增值加快能促進(jìn)腸道上皮細(xì)胞更新，改善腸道吸收和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[30-31]。因此，凹土和納米氧化鋅共同作用于腸道，從而促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)發(fā)育。

3.2 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬腹瀉的影響

仔豬斷奶后，因機(jī)體防御系統(tǒng)不完善，對(duì)外界不良環(huán)境抵抗力差，易應(yīng)激引起腸道菌群紊亂，降低腸道優(yōu)勢(shì)菌群對(duì)大腸桿菌等有害菌的抑制，使其大量定植，從而導(dǎo)致腹瀉[32]。研究發(fā)現(xiàn)，凹土在治療人類和反芻動(dòng)物腹瀉中效果良好[33-35]，但在仔豬上應(yīng)用較少。納米氧化鋅在斷奶仔豬中應(yīng)用較多，且效果良好，能有效降低腹瀉發(fā)生頻率[25-26]。Hu等[1]研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中添加500和750 mg/kg蒙脫石-氧化鋅混合物(鋅的含量為25%)能顯著降低4～14日齡斷奶仔豬腹瀉指數(shù)，其中500 mg/kg蒙脫石-氧化鋅混合物與2 000 mg/kg氧化鋅添加量效果相當(dāng)，并指出500和750 mg/kg蒙脫石-氧化鋅混合物能夠改善腸道黏膜完整性并提高胰腺和小腸內(nèi)的消化酶活性，加快營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分解，減緩固態(tài)飼糧對(duì)腸道的持續(xù)刺激，從而降低仔豬腹瀉。韓萌[31]在斷奶仔豬飼糧中分別添加2 000 mg/kg傳統(tǒng)氧化鋅和500 mg/kg納米氧化鋅對(duì)比發(fā)現(xiàn)，2組腹瀉發(fā)生率均顯著降低，并且納米氧化鋅組與傳統(tǒng)氧化鋅組無差異，主要原因是納米氧化鋅能顯著降低仔豬腸道通透性，提高回腸和結(jié)腸的絨毛高度與絨隱比，改善腸道環(huán)境。本試驗(yàn)結(jié)果提示，飼糧中添加3個(gè)水平凹土納米氧化鋅均能有效降低斷奶仔豬腹瀉率及腹瀉指數(shù)，添加劑量為700 mg/kg時(shí)腹瀉率及腹瀉指數(shù)最低，低于3 000 mg/kg氧化鋅組和800 mg/kg納米氧化鋅組，顯著優(yōu)于ANT組，即低劑量凹土納米氧化鋅的添加抗腹瀉效果良好。140 mg/kg的凹土根據(jù)其性質(zhì)且與納米氧化鋅結(jié)合，可能因此能夠與添加200 mg/kg凹土達(dá)到相同止瀉效果；1 000 mg/kg添加量時(shí)腹瀉指數(shù)與3 000 mg/kg氧化鋅相近，這些結(jié)果與Hu等[1]研究結(jié)果相似。由此可知：飼糧中添加700 mg/kg凹土納米氧化鋅抗腹瀉效果最佳。飼糧中添加凹土納米氧化鋅能有效降低仔豬腹瀉率的原因可能是凹土攜帶的納米氧化鋅能夠提高腸道黏膜蛋白o(hù)ccludin、claudin的表達(dá)，這類蛋白有利于腸道物理屏障的修復(fù)，且納米氧化鋅能夠殺死大腸桿菌等革蘭氏陰性菌以及抗高溫高壓孢子，協(xié)助腸道有益菌的定植并成為優(yōu)勢(shì)菌群[36]。此外，凹土具有吸附性，能夠吸附霉菌毒素，保護(hù)腸道屏障，兩者相互協(xié)同，共同維護(hù)腸道完整性與菌群穩(wěn)定，減少腹瀉[37]。本試驗(yàn)在飼養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)CON組及ANT組多為輕度腹瀉和軟便，因此腹瀉率較高，但抗生素對(duì)仔豬生長(zhǎng)具有促進(jìn)效果，能夠改善飼料利用率，從而F/G低于CON組；高劑量氧化鋅能緩解仔豬腹瀉，但可能影響仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收轉(zhuǎn)化從而降低了飼料轉(zhuǎn)化率。

3.3 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬器官指數(shù)的影響

內(nèi)臟器官是動(dòng)物機(jī)體重要組成成分，維持機(jī)體正常生長(zhǎng)發(fā)育，抵抗外界環(huán)境變化和病原侵入。器官指數(shù)能夠體現(xiàn)動(dòng)物各器官生長(zhǎng)發(fā)育、新陳代謝、功能、健康狀態(tài)等情況是否正常，從而反映出動(dòng)物生長(zhǎng)性能和生理狀況等，而胰腺是胃腸道的重要組成部分，其分泌的內(nèi)源消化酶活性影響胃腸道對(duì)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收與利用[38]。組織器官的良好發(fā)育是動(dòng)物機(jī)體緩解應(yīng)激的重要因素，能夠影響仔豬生長(zhǎng)發(fā)育及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。本試驗(yàn)結(jié)果提示，相比于添加800 mg/kg納米氧化鋅，飼糧中添加700和1 000 mg/kg凹土納米氧化鋅能夠顯著提高仔豬胰腺重量，且略高于CON組，但隨著凹土納米氧化鋅添加劑量的增加，胰腺指數(shù)越來越低。已有研究發(fā)現(xiàn)，高劑量納米氧化鋅會(huì)對(duì)小鼠器官生長(zhǎng)產(chǎn)生毒性作用，影響小鼠發(fā)育[12]。因此我們猜測(cè)這可能是因?yàn)殇\添加量的提高，會(huì)抑制胰腺中某些抗應(yīng)激相關(guān)酶的活性和含量或部分干細(xì)胞的分化，加劇了胰腺氧化應(yīng)激，對(duì)器官生長(zhǎng)產(chǎn)生負(fù)作用，導(dǎo)致胰腺發(fā)育受損，而凹土具有一定緩解損傷作用，其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)；心臟指數(shù)則隨著凹土納米氧化鋅添加劑量的增加有增加趨勢(shì)，且高于ANT組，但均與CON組間無顯著差異，表明凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬心臟發(fā)育無顯著影響，且對(duì)其他器官生長(zhǎng)也無顯著作用。

3.4 凹土納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響

血液是機(jī)體內(nèi)環(huán)境重要組成部分，血液生化指標(biāo)的變化能夠間接反映出機(jī)體內(nèi)器官組織和新陳代謝的變化，良好的新陳代謝能夠促進(jìn)仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收以及各種酶類的釋放，從而維持機(jī)體營(yíng)養(yǎng)平衡，改善仔豬生長(zhǎng)性能，提高生產(chǎn)效益。TG由脂肪分解或某些糖類轉(zhuǎn)化得到，能夠?yàn)闄C(jī)體提供能量，血清中TG含量的高低能夠反映脂肪分解和體脂變化情況，TG含量下降，則脂肪分解加強(qiáng)或轉(zhuǎn)化為體脂增強(qiáng)，適量TG有利于機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)[39]。TC是一種脂類物質(zhì)，是多種類固醇激素的合成材料，其含量能夠反映機(jī)體內(nèi)脂類物質(zhì)的吸收和代謝狀況。孟艷莉[28]研究表明在斷奶仔豬飼糧中添加3 000 mg/kg凹凸棒石對(duì)仔豬血液中TG含量無顯著影響；徐奇友等[41]研究指出，肉雞飼糧中添加40 mg/kg納米氧化鋅在28日齡后血清中的TC含量顯著降低。本試驗(yàn)在仔豬飼糧中添加1 000 mg/kg凹土納米氧化鋅結(jié)果顯示，血清中TC含量與后者研究結(jié)果相似，與前者結(jié)果不同，可能的原因是凹土對(duì)血液中TG和TC的含量無顯著影響，但納米氧化鋅能夠影響它們的生成和轉(zhuǎn)化，適量降低TG和TC含量，從而促進(jìn)仔豬脂肪分解和脂類物質(zhì)的轉(zhuǎn)化與吸收，提高能量利用率，改善生長(zhǎng)性能。HDL具有重要的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，能夠?qū)⒛懝檀嫁D(zhuǎn)運(yùn)到腎上腺等組織進(jìn)行代謝，還能將其從周圍組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟以膽酸形式排泄，緩解動(dòng)脈粥樣硬化[42]。王彬等[43]發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加150和300 mg/kg納米氧化鋅能增加斷奶仔豬血清中HDL含量，但與高鋅組無顯著差異，并指出新型納米氧化鋅能夠提高飼糧中粗蛋白質(zhì)的吸收利用率，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)。本試驗(yàn)結(jié)果提示，1 000 mg/kg凹土納米氧化鋅的添加劑量能顯著提高血液中HDL含量，且顯著高于ANT組，但與ZO組差異不顯著，說明凹土納米氧化鋅能夠提高血液中HDL合成速率，加快膽固醇轉(zhuǎn)化，加快組織間物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝與吸收，從而提高動(dòng)物生產(chǎn)性能。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加凹土納米氧化鋅可顯著提高斷奶仔豬ADG和ADFI，降低仔豬腹瀉率，改善仔豬生長(zhǎng)性能，但隨著添加劑量的增加，F(xiàn)/G逐漸提高。

② 飼糧中添加1 000 mg/kg凹土納米氧化鋅可顯著降低血液TG和TC含量，顯著提高血液HDL含量，促進(jìn)脂肪分解，加快膽固醇等脂類物質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)脂代謝。

③ 綜合本試驗(yàn)結(jié)果，700 mg/kg凹土納米氧化鋅在提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能和降低腹瀉率方面可替代抗生素、800 mg/kg納米氧化鋅和3 000 mg/kg氧化鋅，并以低劑量鋅應(yīng)用于斷奶仔豬飼糧中，可提高生產(chǎn)效益，因此本試驗(yàn)推薦凹土納米氧化鋅適宜添加量為700 mg/kg。

參考文獻(xiàn)：

[1] HU C H,SONG J,YOU Z T,et al.Zinc oxide-montmorillonite hybrid influences diarrhea,intestinal mucosal integrity,and digestive enzyme activity in weaned pigs[J].Biological Trace Element Research,2012,149(2):190-196.

[2] HOFER U.Microbiome:effects of in-feed antibiotics on pig microbiota[J].Nature Reviews Microbiology,2014,12(4):234-234.

[3] BARTON M D.Antibiotic use in animal feed and its impact on human health[J].Nutrition Research Reviews,2000,13(2):279-299.

[4] SAHOO A,SWAIN R K,MISHRA S K.Effect of inorganic,organic and nano zinc supplemented diets on bioavailability and immunity status of broilers[J].International Journal of Advanced Research,2014,2(11):828-837.

[5] SWAIN P S,RAJENDRAN D,RAO S B N,et al.Preparation and effects of nano mineral particle feeding in livestock:a review[J].Veterinary World,2015,8(7):888-891.

[6] 田麗娜,姜建陽(yáng),朱風(fēng)華,等.納米氧化鋅對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能和屠宰性能的影響[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2009,25(2):1-5.

[7] MISHRA A,SWAIN R K,MISHRA S K,et al.Growth performance and serum biochemical parameters as affected by nano zinc supplementation in layer chicks[J].Indian Journal of Animal Nutrition,2014,31(4):384-388.

[8] SAHOO A,SWAIN R K,MISHRA S K,et al.Serum biochemical indices of broiler birds fed on inorganic,organic and nano zinc supplemented diets[J].International Journal of Recent Scientific Research,2014,5(11):2078-2081.

[9] ZHAO C Y,TAN S X,XIAO X Y,et al.Effects of dietary zinc oxide nanoparticles on growth performance and antioxidative status in broilers[J].Biological Trace Element Research,2014,160(3):361-367.

[10] LONG L N,CHEN J S,ZHANG Y G,et al.Comparison of porous and nano zinc oxide for replacing high-dose dietary regular zinc oxide in weaning piglets[J].PLoS One,2017,12(8):e0182550.

[11] SWAIN P S,RAO S B N,RAJENDRAN D,et al.Nano zinc,an alternative to conventional zinc as animal feed supplement:a review[J].Animal Nutrition,2016,2(3):134-141.

[12] WANG B,FENG W Y,WANG M,et al.Acute toxicological impact of nano-and submicro-scaled zinc oxide powder on healthy adult mice[J].Journal of Nanoparticle Research,2008,10(2):263-276.

[13] CHEN H,WANG A Q.Kinetic and isothermal studies of lead ion adsorption onto palygorskite clay[J].Journal of Colloid and Interface Science,2007,307(2):309-316.

[14] WANG W B,TIAN G Y,ZHANG Z F,et al.A simple hydrothermal approach to modify palygorskite for high-efficient adsorption of methylene blue and Cu(Ⅱ) ions[J].Chemical Engineering Journal,2015,265:228-238.

[15] ZHOU S Y,XUE A L,ZHANG Y,et al.Novel polyamidoamine dendrimer-functionalized palygorskite adsorbents with high adsorption capacity for Pb2+and reactive dyes[J].Applied Clay Science,2015,107:220-229.

[16] BERHANE T M,LEVY J,KREKELER M P S,et al.Adsorption of bisphenol A and ciprofloxacin by palygorskite-montmorillonite:effect of granule size,solution chemistry and temperature[J].Applied Clay Science,2016,132-133:518-527.

[17] MONTE M B M,MIDDEA A,PAIVA P R P,et al.Nutrient release by a Brazilian sedimentary zeolite[J].Anais da Academia Brasileira de Ciências,2009,81(4):641-653.

[18] RAHIMI M,MOBEDI H,BEHNAMGHADER A,et al.Fat-soluble vitamins release based on clinoptilolite zeolite as an oral drug delivery system[J].Letters in Drug Design & Discovery,2012,9(2):213-217.

[19] THE EUROPEAN COMMISSION.Commission regulation (EU) 575/2011 of 16 June 2011 on the catalogue of feed materials[J].Official Journal of the European Union,2011,159:25-65.

[20] ZHANG J M,LV Y F,TANG C H,et al.Effects of dietary supplementation with palygorskite on intestinal integrity in weaned piglets[J].Applied Clay Science,2013,86:185-189.

[21] TANG C H,WANG X Q,ZHANG J M.Effects of supplemental palygorskite instead of zinc oxide on growth performance,apparent nutrient digestibility and fecal zinc excretion in weaned piglets[J].Animal Science Journal,2014,85(4):435-439.

[22] LV Y F,TANG C H,WANG X Q,et al.Effects of dietary supplementation with palygorskite on nutrient utilization in weaned piglets[J].Livestock Science,2015,174:82-86.

[23] ZHANG L,YAN R,ZHANG R Q,et al.Effect of different levels of palygorskite inclusion on pellet quality,growth performance and nutrient utilization in broilers[J].Animal Feed Science and Technology,2017,223:73-81.

[25] DUNSHEA F R.Sexual dimorphism in growth of sucking and growing pigs[J].Asian-Australasian Journal of Animal Sciences,2001,14(11):1610-1615.

[26] SPREEUWENBERG M A M,VERDONK J,GASKINS H R,et al.Small intestine epithelial barrier function is compromised in pigs with low feed intake at weaning[J].The Journal of Nutrition,2001,131(5):1520-1527.

[27] WANG C,ZHANG L G,SU W P,et al.Zinc oxide nanoparticles as a substitute for zinc oxide or colistin sulfate:Effects on growth,serum enzymes,zinc deposition,intestinal morphology and epithelial barrier in weaned piglets[J].PLoS One,2017,12(7):e0181136.

[28] 孟艷莉.凹凸棒石、蒙脫石及其復(fù)合物對(duì)斷奶仔豬腸道的保護(hù)作用研究[D].碩士學(xué)位論文.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2011.

[29] 羅友文,周巖民,王恬.凹凸棒石粘土的生物學(xué)功能及其在動(dòng)物生產(chǎn)上的應(yīng)用[J].硅酸鹽通報(bào).2006,25(6):159-164.

[30] 肖金松,羅有文.凹凸棒石黏土在動(dòng)物生產(chǎn)上的應(yīng)用及其作用機(jī)制[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2008,20(10):97-99.

[31] 韓萌.納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬腸道菌群平衡及黏膜免疫的影響[D].碩士學(xué)位論文.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2017.

[32] LI Y,GUO W,HAN S S,et al.The evolution of the gut microbiota in the giant and the red pandas[J].Scientific Reports,2015,5:10185.

[33] KATOULI M,MELIN L,JENSEN-WAERN M,et al.The effect of zinc oxide supplementation on the stability of the intestinal flora with special reference to composition of coliforms in weaned pigs[J].Journal of Applied Microbiology,1999,87(4):564-573.

[34] 紅瑋,王賀,童春暉.具有藥用前景的天然礦物——凹凸棒石[J].藥學(xué)進(jìn)展,2005,29(1):43-45.

[35] ROUSSEL A J,Jr,BRUMBAUGH G W.Treatment of diarrhea of neonatal calves[J].Veterinary Clinics of North America:Food Animal Practice,1991,7(3):713-728.

[36] ARABI F,IMANDAR M,NEGAHDARY M,et al.Investigation anti-bacterial effect of zinc oxide nanoparticles upon life of Listeria monocytogenes[J].Annals of Biological Research,2012,3(7):3679-3685.

[37] 梁曉維,李發(fā)弟,張軍民,等.蒙脫石和凹凸棒石對(duì)霉菌毒素吸附性能的研究[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2014,41(11):133-138.

[38] 黃強(qiáng),徐穩(wěn),王恬,等.日糧補(bǔ)充亮氨酸對(duì)超早期斷奶宮內(nèi)發(fā)育遲緩仔豬內(nèi)源消化酶活性及胰腺抗氧化能力的影響[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2017,40(1):123-129.

[39] ZIMMERMANN R,STRAUSS J G,HAEMMERLE G,et al.Fat mobilization in adipose tissue is promoted by adipose triglyceride lipase[J].Science,2004,306(5700):1383-1386.

[40] DUKES H H.The physiology of domestic animals[M].New York:Comstock Publishing Associates,1955.

[41] 徐奇友,劉立波,侯奉雨,等.納米氧化鋅對(duì)肉仔雞血清生化指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2007,19(1):76-80.

[42] TOTH P P,DAVIDSON M H.Therapeutic interventions targeted at the augmentation of reverse cholesterol transport[J].Current Opinion in Cardiology,2004,19(4):374-379.

[43] 王彬,劉路杰,祝佳,等.納米氧化鋅對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、血清免疫和生化指標(biāo)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2016,28(11):3626-3633.