崔淑華，李正義，程 剛，李瑞娟，王 宇，張雪琰，趙 峰

近年來，農(nóng)藥的大量不合理使用使害蟲對(duì)多種常規(guī)農(nóng)藥產(chǎn)生了高水平的抗藥性，為控制害蟲爆發(fā)危害，國內(nèi)外研究者開發(fā)了一些高效、超高效、低毒新型農(nóng)藥品種來防治刺吸式害蟲。氟啶蟲胺腈是新型煙堿類廣譜殺蟲劑，主要通過激活煙堿型乙酰膽堿受體，作用于昆蟲的神經(jīng)系統(tǒng)而表現(xiàn)出殺蟲活性[1]；Pyrifluquinazon是一種具雙酰胺結(jié)構(gòu)的新喹唑啉類殺蟲劑，通過使害蟲停止取食進(jìn)而餓死而殺滅害蟲，在防止植物組織遭受更多損害的同時(shí)，限制一些重要病害的傳播[2]。螺蟲乙酯是新季酮酸衍生物類殺蟲劑，主要通過干擾昆蟲的脂肪生物合成而促使幼蟲死亡，降低成蟲的繁殖能力[3-4]。這3 種新型殺蟲劑可用于防治蔬菜和果樹上蚜蟲類、粉虱類、粉蚧類、葉蟬類、薊馬類等各種刺吸性害蟲，與有機(jī)磷類、擬除蟲菊酯類、新煙堿類等殺蟲劑無交互抗性，具有高效、低毒、低殘留、內(nèi)吸性好、對(duì)非靶標(biāo)生物安全等優(yōu)點(diǎn)，是刺吸式害蟲綜合治理的優(yōu)選藥劑[4-7]，3 種農(nóng)藥的結(jié)構(gòu)式如圖1所示。

圖1 氟啶蟲胺腈（a）、Pyrifluquinazon（b）和螺蟲乙酯（c）結(jié)構(gòu)式Fig. 1 Structural formulas of sulfoxaflor, pyrifluquinazon and spirotetramat

隨著氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯的登記、推廣和使用，作為我國蔬菜、水果主要出口市場的美國、歐盟、韓國、日本、加拿大等國家對(duì)其制定了最大允許殘留限量（maximum residue limits，MRLs）。食品法典也對(duì)氟啶蟲胺腈和螺蟲乙酯的MRLs進(jìn)行了規(guī)定[8-10]。食品法典、美國、墨西哥、韓國、澳大利亞規(guī)定蔬菜和水果中氟啶蟲胺腈MRLs為0.01～6.0 mg/kg；韓國規(guī)定Pyrifluquinazon在蘋果和梨上的MRLs為0.05 mg/kg；日本規(guī)定Pyrifluquinazon在蘋果、梨、土豆上的MRLs分別為0.5、1.0、0.2 mg/kg，其余均實(shí)行0.01 mg/kg的“一律標(biāo)準(zhǔn)”[11]；美國、歐盟、加拿大等國家及食品法典規(guī)定果蔬中螺蟲乙酯MRLs為0.02～9.0 mg/kg。現(xiàn)階段，國內(nèi)外對(duì)蔬菜和水果中螺蟲乙酯殘留量檢測(cè)方法的研究較多[12-18]，對(duì)氟啶蟲胺腈殘留量檢測(cè)方法的報(bào)道較少[1,19-20]，對(duì)Pyrifluquinazon殘留量檢測(cè)方法進(jìn)行檢索發(fā)現(xiàn)，除檢索到筆者申請(qǐng)的幾個(gè)專利[21-23]外，鮮見關(guān)于果蔬中Pyrifluquinazon殘留量檢測(cè)方法的報(bào)道。在已有的報(bào)道中，主要采用乙腈提取，QuEChERS（quick, easy, cheap,effective, rugged, safe）基質(zhì)固相分散萃取凈化或固相萃取凈化后，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜、液相色譜或氣相色譜電子捕獲檢測(cè)器進(jìn)行分析檢測(cè)。采用液相色譜和氣相色譜電子捕獲檢測(cè)器進(jìn)行分析時(shí)，方法的定量限均不低于0.025 mg/kg，不能滿足有些國家對(duì)果蔬中螺蟲乙酯、氟啶蟲胺腈殘留限量的要求。在果蔬生長期間，會(huì)交替或輪換使用防治刺吸式害蟲的這3 種新型殺蟲劑，以延緩農(nóng)藥抗藥性的產(chǎn)生，為保證果蔬安全，需同時(shí)監(jiān)控這3 種農(nóng)藥的殘留狀況。目前，鮮見同時(shí)檢測(cè)果蔬中這3 種新型殺蟲劑殘留量的研究報(bào)道，對(duì)不同分散固相萃取劑凈化效果也未進(jìn)行較系統(tǒng)的研究。本研究在優(yōu)化QuEChERS前處理凈化劑、明確不同化合物基質(zhì)效應(yīng)及影響因素的基礎(chǔ)上，建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，UPLCMS/MS）測(cè)定果蔬中氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯殘留量的同時(shí)檢測(cè)方法，為更好應(yīng)對(duì)國外技術(shù)壁壘提供了有力地技術(shù)支持，將建立的檢測(cè)方法應(yīng)用于實(shí)際樣品檢測(cè)取得了滿意結(jié)果。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

乙腈、甲醇、乙酸銨（均為色譜純） 德國Merke公司；氯化鈉、無水硫酸鎂（均為分析純，用前在450 ℃烘5 h，200 ℃時(shí)取出冷卻備用） 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；十八烷基鍵合相硅膠（C18）凈化劑、乙二胺-N-丙基硅烷（primary secondary amine，PSA）凈化劑天津博納艾杰爾有限公司；QuEChERS分散固相萃取管（15 mL離心管中裝150 mg PSA、900 mg無水硫酸鎂）、QuEChERS分散固相萃取管（15 mL離心管中裝150 mg C18、900 mg無水硫酸鎂）、QuEChERS分散固相萃取管（15 mL離心管中裝150 mg PSA、45 mg石墨化炭黑（Carb）粉末、855 mg無水硫酸鎂）、QuEChERS分散固相萃取管（15 mL離心管中裝150 mg PSA、150 mg C18和900 mg無水硫酸鎂） 美國Agilent公司；標(biāo)準(zhǔn)品：氟啶蟲胺腈（純度≥98.0%）、Pyrifluquinazon（100 μg/mL）、螺蟲乙酯（純度≥98.0%） 德國Dr.Ehrenstorfer GmbH公司。

1.2 儀器與設(shè)備

1290-6460液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀 美國Agilent公司；3K 15型離心機(jī)（配2 mL轉(zhuǎn)子） 德國Sigma公司；ULTRA-TURRAX T-18 basic型均質(zhì)器 德國IKA公司；MilliQ超純水器 美國Millipore公司；Vortex3000型旋渦混合器 德國Wiggens公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取適量螺蟲乙酯標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈配制成質(zhì)量濃度為500 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；取適量100 μg/mL Pyrifluquinazon儲(chǔ)備液和500 μg/mL螺蟲乙酯儲(chǔ)備液，用乙腈配制成質(zhì)量濃度為10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)中間液1；將該標(biāo)準(zhǔn)中間液1和100 μg/mL氟啶蟲胺腈標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用乙腈配制出Pyrifluquinazon、螺蟲乙酯和氟啶蟲胺腈質(zhì)量濃度分別為1、1 μg/mL和10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)中間液2；取空白樣品按樣品前處理過程進(jìn)行處理，得到空白基質(zhì)提取凈化液，用該基質(zhì)溶液稀釋標(biāo)準(zhǔn)中間液2，配制成適當(dāng)質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，用于UPLC-MS/MS定量分析。

1.3.2 樣品處理

將購置于農(nóng)貿(mào)市場的蘋果、葡萄、黃瓜、洋蔥、菠菜、甘藍(lán)、草莓等蔬菜和水果清潔干凈，取可食用部分，粉碎并混合均勻，準(zhǔn)確稱取10 g（精確至0.01 g），置于50 mL離心管中，準(zhǔn)確加入20 mL乙腈溶液，以10 000 r/min均質(zhì)提取1 min，加入4 g無水MgSO4、1 g NaCl，立即渦旋混勻后，以7 000 r/min離心5 min。吸取2.0 mL上層有機(jī)相轉(zhuǎn)移至裝有100 mg C18、50 mg PSA和300 mg無水MgSO4粉末的離心管中，加入后立即將其渦旋混勻2 min，7 000 r/min離心5 min，取上清液過0.22 μm濾膜于進(jìn)樣小瓶中，待UPLC-MS/MS測(cè)定。

1.3.3 色譜條件

色譜柱：Eclipse plus C18柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）；流動(dòng)相A：乙腈，流動(dòng)相B：5 mmol/L乙酸銨溶液，梯度洗脫程序：A初始體積分?jǐn)?shù)為5%，保持0.5 min，0.5～2.0 min，A線性增加至95%，保持3.5 min，5.5～5.6 min回到初始狀態(tài)，并保持到8 min；流速：0.2 mL/min；進(jìn)樣體積：5 μL；柱溫：30 ℃。

1.3.4 質(zhì)譜條件

電噴霧離子源（electrospray ionization，ESI）；正離子掃描多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（multi-reaction monitoring，MRM）模式檢測(cè)；霧化器壓力：275.9 kPa；干燥氣溫度：350 ℃；干燥氣流速：6.0 L/min；鞘氣溫度：350 ℃；鞘氣流速：10.0 L/min；毛細(xì)管電壓：＋3 500 V；監(jiān)測(cè)離子對(duì)、毛細(xì)管出口電壓/碎裂電壓和碰撞能量等質(zhì)譜采集參數(shù)見表1。

表1 氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯質(zhì)譜采集參數(shù)Table 1 Tandem mass spectral parameters for pyrifluquinazon,sulfoxaflor and spirotetramat

2 結(jié)果與分析

2.1 儀器分析參數(shù)的確定

采用1 mg/L的待測(cè)化合物的標(biāo)準(zhǔn)溶液以流動(dòng)注射的方式分別用ESI正離子和負(fù)離子模式進(jìn)行全掃描模式，掃描后發(fā)現(xiàn)氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯在ESI正離子模式下響應(yīng)更高，因此選擇采用正離子掃描在此模式下確定了氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯母離子分別為m/z 278.1、465.2和374.1。用0.1 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在單離子監(jiān)測(cè)分別對(duì)毛細(xì)管出口電壓進(jìn)行優(yōu)化，從中選出豐度最高的毛細(xì)管出口電壓作為最佳毛細(xì)管出口電壓。然后在Product模式下，掃描確定母離子產(chǎn)生的響應(yīng)最高的2 個(gè)子離子作為定量離子和定性離子。然后在MRM模式下，分別對(duì)不同母離子產(chǎn)生的子離子的碰撞能量進(jìn)行優(yōu)化，從中選出豐度最高的碰撞能量作為最佳碰撞能量，建立MRM模式，采集參數(shù)見表1。

圖2 3 種殺蟲劑在黃瓜、蘋果和洋蔥混合空白樣品溶液和10 μg/kg加標(biāo)量條件下的MRM模式色譜圖Fig. 2 MRM chromatograms of mixed blank solution of cucumber,apple and onion and spiked mixture (10 μg/kg sulfoxaflor)

研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)采用甲醇作為有機(jī)流動(dòng)相時(shí)，Pyrifluquinazon響應(yīng)值會(huì)大大降低，因此選擇使用乙腈和5 mmol/L乙酸銨溶液為分析流動(dòng)相。研究發(fā)現(xiàn)，采用不同比例的流動(dòng)相等度洗脫時(shí)，待測(cè)農(nóng)藥的靈敏度和重復(fù)性均不理想，因此，本研究在檢測(cè)過程中采用1.3.3節(jié)色譜條件中的梯度洗脫程序?qū)衔镞M(jìn)行分析。比較了幾個(gè)公司生產(chǎn)的色譜柱，結(jié)果顯示，采用Eclipse plus C18柱（100 mm×2.1 mm，1.8 μm）分析時(shí)，待測(cè)農(nóng)藥保留時(shí)間以及峰形均比較理想。因此，選擇該柱作為分析柱。在上述優(yōu)化后的色譜質(zhì)譜條件下，分別對(duì)黃瓜、蘋果和洋蔥3 種樣品混合空白溶液和添加了3 種殺蟲劑的加標(biāo)回收溶液進(jìn)行分析，MRM色譜圖見圖2，樣品基質(zhì)不干擾3 種新型殺蟲劑的定性分析。

2.2 樣品前處理?xiàng)l件的確定

2.2.1 提取溶劑的選擇

采用進(jìn)行QuEChERS前處理方法時(shí)，為解決堿敏感農(nóng)藥（如抑菌靈、百菌清）的降解問題，采用酸化乙腈等酸性溶液來提取[24-26]，本研究分別采用乙腈和1%乙酸-乙腈對(duì)含有3 種待測(cè)農(nóng)藥的陽性樣品進(jìn)行提取實(shí)驗(yàn)，提取的平均回收率分別為96.8%和95.4%。以PSA作為分散萃取劑，分別將乙腈提取液和1%乙酸-乙腈提取液進(jìn)行固相基質(zhì)分散凈化，用2 種凈化液分別配制同質(zhì)量濃度的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣后發(fā)現(xiàn)，采用1%乙酸-乙腈提取獲得的基質(zhì)匹標(biāo)準(zhǔn)曲線響應(yīng)值更低一些，這可能是因?yàn)榧尤胍宜岬人嵝匀芤簩?duì)PSA的凈化效果產(chǎn)生了影響。因此，本研究確定使用乙腈對(duì)果蔬中殘留的氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯進(jìn)行提取。

2.2.2 基質(zhì)分散凈化劑的選擇

基質(zhì)分散凈化常用的凈化劑有PSA、C18和Carb[27-28]，各種凈化劑在去除雜質(zhì)的同時(shí)也可能對(duì)目標(biāo)化合物產(chǎn)生吸附，為選擇最佳的凈化劑種類和用量，本研究進(jìn)行了優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。

分別將6 mL 20 μg/L氟啶蟲胺腈、2 μg/L Pyrifluquinazon和2 μg/L螺蟲乙酯混合純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)溶液和陰性黃瓜基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)裝有不同種類凈化劑的4 種QuEChERS分散固相萃取管（萃取管具體成分見1.1節(jié)）進(jìn)行渦旋凈化處理，處理后的回收率結(jié)果見表2。

表2 3 種殺蟲劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)PSA、C18和Carb吸附劑處理后的回收率Table 2 Recoveries of 3 insecticides adsorbed by PSA, C18 and Carb

由表2可看出，使用純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行吸附實(shí)驗(yàn)時(shí)，C18對(duì)Pyrifluquinazon產(chǎn)生了很強(qiáng)的吸附，Pyrifluquinazon經(jīng)C18處理后，回收率僅為3.7%，但使用PSA＋C18凈化時(shí)，回收率反而為增大為31.8%；同時(shí)，PSA對(duì)Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯產(chǎn)生了較大的吸附，這2 種殺蟲劑經(jīng)PSA、PSA＋C18和PSA＋Carb處理后回收率為31.8%～69.8%；但使用黃瓜基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶劑進(jìn)行同樣的吸附實(shí)驗(yàn)時(shí)，PSA和C18對(duì)這3 種殺蟲劑均未產(chǎn)生吸附作用，這與使用純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)溶液的實(shí)驗(yàn)結(jié)果很不一致，這可能是因?yàn)镻SA、C18吸附劑上存在很多活性位點(diǎn)，這些活性位點(diǎn)對(duì)待測(cè)物產(chǎn)生了一定程度的吸附，而使用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，吸附劑上的活性位點(diǎn)被基質(zhì)占據(jù)，對(duì)待測(cè)農(nóng)藥吸附作用減小。分別使用陰性蘋果和洋蔥基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)時(shí)，與黃瓜實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。同時(shí)，從表2可以看出，Carb對(duì)Pyrifluquinazon產(chǎn)生了較大的吸附作用。因此，本研究選擇使用PSA和C18作為基質(zhì)分散固相萃取劑。

表3 黃瓜、蘋果和洋蔥混合基質(zhì)樣品中3 種殺蟲劑的基質(zhì)效應(yīng)Table 3 Matrix effects of 3 insecticides in composite matrix of cucumber, apple and onion

表4 黃瓜、蘋果、洋蔥和微波處理洋蔥中3 種殺蟲劑的基質(zhì)效應(yīng)Table 4 Matrix effects of 3 insecticides in cucumber, apple, onion and microwave processed onion

采用散裝凈化劑單獨(dú)稱量的方法進(jìn)行基質(zhì)分散固相萃取凈化實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)：每毫升提取液中PSA添加量超過25 mg時(shí)，添加回收率會(huì)出現(xiàn)一定程度的降低；每毫升提取液中C18添加量只要不超過50 mg，都不會(huì)對(duì)這3 種新型殺蟲劑產(chǎn)生吸附。因此，本研究選擇在每毫升提取液中加入25 mg PSA和50 mg C18對(duì)果蔬中殘留的3 種殺蟲劑進(jìn)行基質(zhì)固相分散凈化。

2.3 樣品基質(zhì)效應(yīng)的考察結(jié)果

UPLC-MS/MS對(duì)化合物進(jìn)行分析時(shí)，ESI容易受樣品基質(zhì)的影響，一般使用正離子模式進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的基質(zhì)減弱效應(yīng)。取不含待測(cè)農(nóng)藥的黃瓜、蘋果和洋蔥樣品，分別經(jīng)乙腈提取后，以相同比例混合獲得空白基質(zhì)溶液，將此溶液經(jīng)上述4 種基質(zhì)分散固相萃取凈化管（即C18、PSA、PSA＋C18和PSA＋Carb基質(zhì)分散提取凈化劑）凈化處理，分別用乙腈和經(jīng)上述基質(zhì)分散固相萃取凈化管（即C18、PSA、PSA＋C18和PSA＋Carb基質(zhì)分散提取凈化劑）處理后的混合提取凈化液配制系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣后得到各自的純?nèi)軇┖突|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。基質(zhì)效應(yīng)＝基質(zhì)匹配校準(zhǔn)曲線斜率/純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)曲線斜率，斜率比越接近1，則基質(zhì)效應(yīng)越小[29-30]，基質(zhì)效應(yīng)結(jié)果見表3。從表3可看出，3 種殺蟲劑基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的基質(zhì)減弱效應(yīng)均很大，螺蟲乙酯受影響最小，但基質(zhì)效應(yīng)范圍仍為0.304～0.517，使用同等量的PSA和C18凈化后，PSA的基質(zhì)減弱效應(yīng)更小一些，使用PSA＋C18作為基質(zhì)分散固相萃取劑時(shí)，3 種農(nóng)藥的基質(zhì)減弱效應(yīng)均最小，應(yīng)該是去除了更多的樣品雜質(zhì)，但即使以PSA＋C18作為基質(zhì)分散凈化劑凈化樣品提取液，3 種殺蟲劑的基質(zhì)減弱效應(yīng)仍較強(qiáng)。

同時(shí)，對(duì)不含待測(cè)農(nóng)藥的黃瓜、蘋果、洋蔥和經(jīng)微波處理的洋蔥樣品經(jīng)PSA＋C18基質(zhì)分散固相萃取處理后分析得到的相應(yīng)基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行了考察，結(jié)果見表4。

從表4可見，經(jīng)PSA＋C18凈化處理后的黃瓜和蘋果空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液中3 種殺蟲劑的基質(zhì)減弱效應(yīng)較?。谎笫[基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的基質(zhì)減弱效應(yīng)特別強(qiáng)，其中螺蟲乙酯的基質(zhì)減弱效應(yīng)更小一些；洋蔥經(jīng)微波處理后，3 種殺蟲劑的基質(zhì)減弱效應(yīng)得到了很大改善，這應(yīng)該是因?yàn)檠笫[經(jīng)微波處理時(shí)，微波將酶破壞，有效避免了含硫化合物的釋放，減少了基質(zhì)干擾，從而使基質(zhì)效應(yīng)降低下來。通過上述實(shí)驗(yàn)可知，基質(zhì)效應(yīng)主要受樣品基質(zhì)種類、農(nóng)藥化合物性質(zhì)和凈化劑種類等因素的影響，雖然采用凈化效果更好的PSA＋C18基質(zhì)分散固相萃取劑進(jìn)行凈化處理，或?qū)悠方?jīng)微波處理以降低基質(zhì)干擾等措施都能一定程度上降低基質(zhì)減弱效應(yīng)，但并不能完全消除基質(zhì)效應(yīng)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，本研究選擇以空白樣品進(jìn)行上述前處理操作后獲得的待檢測(cè)溶液配制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，使標(biāo)樣和樣品溶液具有同樣的離子化條件，從而消除樣品基質(zhì)效應(yīng)。另外，雖然蔥蒜類樣品使用微波處理后可降低雜質(zhì)干擾，減輕基質(zhì)效應(yīng)，但通過微波實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，微波會(huì)造成螺蟲乙酯的分解，因此，不適合使用微波處理進(jìn)行樣品前處理。

2.4 方法的線性范圍

將2.2節(jié)中配制的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，在優(yōu)化的色譜條件和質(zhì)譜條件下進(jìn)行測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)（y），質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x）繪制校準(zhǔn)曲線，3 種殺蟲劑在黃瓜、蘋果、洋蔥單基質(zhì)溶液的線性方程見表4，在黃瓜、蘋果和洋蔥混合樣品提取液經(jīng)PSA＋C18凈化后的基質(zhì)溶液中的線性方程見表3，擬合曲線時(shí)發(fā)現(xiàn)，氟啶蟲胺腈在0.2～100 μg/L之間，Pyrifluquinazon在0.02～10 μg/L之間，螺蟲乙酯在0.1～10 μg/L之間的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999 0。

2.5 方法的檢出限和定量限

方法檢出限以空白樣品基質(zhì)稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低質(zhì)量濃度出峰時(shí)，取信噪比為3和樣品處理過程的稀釋倍數(shù)（本方法稀釋倍數(shù)為2 倍）計(jì)算得出，定量限是以空白樣品基質(zhì)稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低質(zhì)量濃度出峰時(shí)，取信噪比為10和樣品處理過程的稀釋倍數(shù)（本方法稀釋倍數(shù)為2 倍）計(jì)算得出。氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯在黃瓜、蘋果和洋蔥混合基質(zhì)中的檢出限分別為0.100、0.012 2 μg/kg和0.133 μg/kg，定量限分別為0.334、0.040 5 μg/kg和0.378 μg/kg。

2.6 方法的回收率和精密度

在不含氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯的陰性蘋果、葡萄、黃瓜和洋蔥樣品中添加4 個(gè)水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，待農(nóng)藥添加30 min后按上述處理步驟進(jìn)行殘留量測(cè)定，2.0 mg/kg添加量進(jìn)行3 種殺蟲劑殘留量測(cè)定及0.1 mg/kg添加量進(jìn)行Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯殘留量測(cè)定前，分別用乙腈將凈化定容液稀釋至殘留量在線性范圍之內(nèi)，將測(cè)定質(zhì)量濃度與農(nóng)藥理論添加質(zhì)量濃度進(jìn)行比較，得到農(nóng)藥添加回收率，每個(gè)添加水平平行測(cè)定6 次，得其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，測(cè)定結(jié)果見表5。由表5可以看出，氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯在蘋果、葡萄、黃瓜和洋蔥中添加回收率在79.9%～103.9%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.3%～8.8%之間，說明本發(fā)明方法的回收率較高、重復(fù)性好。

表5 樣品中氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯殘留量回收率和精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 5 Mean recoveries and precisions of pyrifluquinazon, sulfoxaflor and spirotetramat in samples spiked at 3 different levels

2.7 實(shí)際樣品檢測(cè)結(jié)果

按照本方法對(duì)菠菜、甘藍(lán)、草莓、蘋果、黃瓜、小蔥等23 個(gè)農(nóng)貿(mào)市場銷售的蔬菜和水果進(jìn)行氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯檢測(cè)，在1 批黃瓜中檢出0.011 mg/kg氟啶蟲胺腈，在另一批黃瓜中檢出0.002 1 mg/kg螺蟲乙酯，其余均未檢出上述3 種殺蟲劑。

3 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)在優(yōu)化樣品前處理?xiàng)l件和儀器條件的基礎(chǔ)上，建立了UPLC-MS/MS測(cè)定蔬菜和水果中氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯殘留量的檢測(cè)方法，該方法采用優(yōu)化的QuEChERS方法進(jìn)行樣品前處理，操作簡便快捷，對(duì)能同時(shí)定性和定量的分析儀器分別建立了相應(yīng)的檢測(cè)方法，滿足了各檢測(cè)應(yīng)用單位的需求，方法采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液外標(biāo)法定量，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，應(yīng)用于實(shí)際蔬菜和水果樣品中氟啶蟲胺腈、Pyrifluquinazon和螺蟲乙酯殘留量的檢測(cè)分析，取得良好效果。

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