王平平

（山西省陽泉市第一人民醫(yī)院病理科 山西 陽泉045000）

近些年來,因條件導(dǎo)致的致病性真菌所引發(fā)的系統(tǒng)性真菌感染不斷增多,各種器官移植、導(dǎo)管技術(shù)的發(fā)展，各種抗腫瘤藥物的應(yīng)用都是其重要的因素。而肺真菌感染性疾病是其中主要的類型。肺真菌感染性疾病臨床癥狀缺乏明顯特征，較難鑒別，極其容易誤診，從而影響治療。鑒于此，如何準(zhǔn)確快速的診斷出真菌類型，是治療的關(guān)鍵。

1.一般臨床資料

1.1 一般資料

選取我院在近兩年收治的最終確診為肺真菌感染性疾病患者60例,其中男性患者34例，女性患者26例，年齡范圍從20歲到84歲不等，平均年齡（52.2±7.3）歲。這60例患者，有15例患者支氣管黏膜活檢，有8例患者肺穿刺活檢，有37例患者外科手術(shù)肺活檢。60例患者中，有基礎(chǔ)病的患者有48例，占比80%，其中高血壓、糖尿病患者有30例，惡性腫瘤有10例，肺結(jié)核有5例，余下有氣管炎、哮喘等基礎(chǔ)病。經(jīng)治療后，有2例患者完全康復(fù)，有54例患者完全康復(fù)，有4例患者死亡。

1.2 試劑與方法

本實(shí)驗(yàn)采用4中方法進(jìn)行分析：（1）常規(guī)HE染色法。（2）傳統(tǒng)手工PAS染色法：將切片進(jìn)行脫蠟，放入水中，用0.5%濃度的高碘酸液氧化10分鐘，2分鐘流水沖洗，蒸餾水洗2次，15分鐘左右的雪夫試劑染，然后進(jìn)行分化、返藍(lán)、水洗、脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固等。（3）傳統(tǒng)手工六胺銀染色法：其試劑包括六胺銀貯備液和六胺銀蹦沙染色液。將切片進(jìn)行脫蠟處理，放入水中，采用5%鉻酸水溶液氧化1小時(shí)，5分鐘流水沖洗；浸泡1%亞硫酸鈉水溶液1分鐘，使用自來水沖洗5分鐘，蒸餾水洗滌，去除鉻酸；放入六胺銀硼砂染色液內(nèi)60℃溫箱1小時(shí)，待鏡下觀察切片呈黃褐色、真菌呈黑褐色為止，蒸餾水洗3次；進(jìn)行5分鐘的O.2%氯化金水溶液調(diào)色，自來水沖洗；隨后利用乙醇進(jìn)行脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固；（4）全自動(dòng)特殊染色法染PAS和六胺銀∶使用全自動(dòng)特殊染色儀，PAS時(shí)長39分鐘，六胺銀時(shí)長120分鐘，兩種染色可同時(shí)進(jìn)行，時(shí)長120分鐘。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料用（平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）來表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)量資料以%加以表示；實(shí)驗(yàn)對(duì)比差采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05時(shí)，差異對(duì)比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果上來看，全自動(dòng)特殊染色法在操作步驟上更加的簡(jiǎn)單，化學(xué)試劑已經(jīng)商品化，更加的規(guī)范，受溫度、濕度、時(shí)間等外界因素影響要小，而且染PAS和六胺銀所花費(fèi)的時(shí)間更短，脫片和復(fù)染張數(shù)更少，全面優(yōu)于傳統(tǒng)手工特殊染色法。

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，肺真菌確診率從低到高依次臨床初步診斷（30%）、HE染色法（33.3%）、HE染色聯(lián)合傳統(tǒng)手工特殊染色法染PAS和六胺銀（96.6%）、HE染色聯(lián)合全自動(dòng)特殊染色法染PAS和六胺銀（98.3%）；真菌分型率從低到高依次是臨床初步診斷（20%）、HE染色法（33.3%）、HE染色聯(lián)合傳統(tǒng)手工特殊染色法染PAS和六胺銀（86.7%）、HE染色聯(lián)合全自動(dòng)特殊染色法染PAS和六胺銀（93.3%）。除后兩種方法在分型率差異對(duì)比上不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其他4種方法從確診率和真菌分型率兩方面比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05。

經(jīng)最終病理診斷，肺真菌感染共分出類型者58例，曲霉菌（36例）、隱球菌（11例）、毛霉菌（9例）位于前列。（詳見表）

表 60例肺真菌感染確診患者診斷真菌分布與最終病理診斷結(jié)果比較（n）

3.結(jié)論

由于肺真菌感染疾病的患者日益增多與臨床誤診率居高不下的矛盾，臨床醫(yī)療中迫切的需要一種規(guī)范化特殊染色技術(shù)對(duì)肺真菌感染疾病病理進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷。本文以我院在近兩年收治的最終確診為肺真菌感染性疾病患者60例作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，發(fā)現(xiàn)HE染色聯(lián)合全自動(dòng)特殊染色法染PAS和六胺銀更加規(guī)范，操作簡(jiǎn)單、流程規(guī)范、受人工環(huán)境影響小、耗時(shí)短、準(zhǔn)確率高，對(duì)于肺真菌感染性疾病病理診斷具有重要的意義。

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