于　敏　林哲洙　張　紅　

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院普外三科，遼寧　錦州　121001)

胃腺癌是高度惡性的浸潤(rùn)性上皮源性腫瘤，來(lái)源于胃黏膜上皮，其分化常較差，可以直接蔓延及向周?chē)M(jìn)行播散，侵襲能力強(qiáng)〔1〕。異黏蛋白(MTDH)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)癌基因，已被證實(shí)在人體大部分組織中低表達(dá)，在惡性腫瘤中的表達(dá)不同程度升高，其可以通過(guò)多種信號(hào)通路影響腫瘤形成〔2，3〕。原癌基因C-myc(C-myc)其編碼的蛋白質(zhì)可以介導(dǎo)細(xì)胞外轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的生物信號(hào)，對(duì)細(xì)胞增殖及腫瘤生長(zhǎng)有重要作用〔4，5〕。本文關(guān)注胃腺癌術(shù)后組織中MTDH和C-myc的表達(dá)，探討其臨床意義。

1　材料與方法

1.1臨床資料2014年1月至2016年12月錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院確診為胃腺癌，并行手術(shù)治療的患者87例為觀(guān)察組，其中男45例，女42例，年齡40～86歲，平均59.3歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者或家屬同意觀(guān)察；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有其他器官惡性腫瘤；②有胃部手術(shù)史；③有血液系統(tǒng)疾病；④手術(shù)前行放、化療。其中高分化20例，中分化20例，低分化47例。同時(shí)選取上述患者中距離腫物邊緣>3 cm的正常胃黏膜組織45例為對(duì)照組，其中男25例，女20例，年齡42～81歲，平均58歲。兩組均常規(guī)留取術(shù)后蠟塊組織(取材由病理醫(yī)師完成)。兩組常規(guī)資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2MTDH和C-myc蛋白表達(dá)的檢測(cè)MTDH和C-myc試劑均為濃縮液，按不同比例行預(yù)實(shí)驗(yàn)，然后檢測(cè)其表達(dá)效果，仔細(xì)觀(guān)察并選擇最理想的濃度用在正式實(shí)驗(yàn)(MTDH為1∶100，C-myc為1∶50)。MTDH和C-myc檢測(cè)均應(yīng)用免疫組化二步法，應(yīng)用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作均由同一技師進(jìn)行操作，嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)步驟，減少人為誤差。

1.3MTDH和C-myc結(jié)果判讀MTDH陽(yáng)性表達(dá)部位是細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)，C-myc的陽(yáng)性表達(dá)部位是細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞核，以染成淺黃-棕褐色為著色細(xì)胞，以著色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比的評(píng)分之和進(jìn)行判定。顯色強(qiáng)度評(píng)分：0分，無(wú)；1分，弱；2分，中；3分，強(qiáng)。陽(yáng)性細(xì)胞百分比評(píng)分：選擇5個(gè)400倍的視野，計(jì)數(shù)陽(yáng)性率，取其平均值；0分，<5%；1分，5%～24%；2分，25%～49%；3分，50%～74%；4分，≥75%。取兩項(xiàng)評(píng)分之和的值作為最終評(píng)分結(jié)果。0～2分為陰性，>2分為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線(xiàn)性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1兩組MTDH和C-myc蛋白表達(dá)兩組MTDH和C-myc表達(dá)陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見(jiàn)表1。

表1　兩組MTDH和C-myc蛋白的陽(yáng)性表達(dá)〔n(%)〕

2.2觀(guān)察組中不同臨床特征中MTDH和C-myc表達(dá)比較觀(guān)察組MTDH和C-myc表達(dá)均與腫瘤最大徑和增殖指數(shù)相關(guān)，MTDH表達(dá)與分化程度相關(guān)，C-myc表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。見(jiàn)表2。

2.3觀(guān)察組MTDH和C-myc表達(dá)相關(guān)性MTDH和C-myc表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.52，P<0.05)。

表2　觀(guān)察組不同臨床特征中MTDH和C-myc陽(yáng)性表達(dá)的比較〔n(%)〕

3　討　論

侵襲性胃腺癌進(jìn)展快，腫瘤細(xì)胞分化低，細(xì)胞體積小，易于直接蔓延和播散，對(duì)周?chē)M織的破壞能力強(qiáng)，病變進(jìn)展中相關(guān)蛋白可以出現(xiàn)明顯表達(dá)失?！?〕。分化是胃腺癌形成中內(nèi)在的調(diào)控作用，胃腺癌細(xì)胞常為低分化狀態(tài)，呈現(xiàn)幼稚的細(xì)胞形態(tài)。MTDH是近年發(fā)現(xiàn)的癌基因，其全長(zhǎng)為3 611 bp，包含11個(gè)內(nèi)含子和12個(gè)外顯子，位于人類(lèi)8號(hào)染色體上，其是一種保守蛋白，也是一個(gè)Ⅰb型的膜蛋白〔7，8〕，分子量為64 kD，由于其富含賴(lài)氨酸和絲氨酸殘基，可被翻譯后修飾〔9，10〕。C-myc是原癌基因，氨基端有兩個(gè)磷酸化修飾位點(diǎn)，均可以使C-myc形成泛素化而引起降解，因此C-myc在腫瘤中的嚴(yán)格調(diào)控是其平衡的重要方面〔11，12〕。本研究提示MTDH和C-myc，二者高表達(dá)是促進(jìn)胃腺癌形成的重要蛋白因素。MTDH高表達(dá)時(shí)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖并使其抗凋亡作用增加，其途徑被認(rèn)為是受到磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用。MTDH還可以在轉(zhuǎn)錄水平活化核因子通路，參與周期素蛋白及Bcl-2等多種細(xì)胞的增殖過(guò)程〔13〕。MTDH的促侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制還可能是通過(guò)與內(nèi)皮細(xì)胞上未知受體的相互作用，同時(shí)活化一些與黏附因子相關(guān)的信號(hào)通路引起的〔14〕。張艷艷等〔15〕通過(guò)觀(guān)察MTDH在上皮性卵巢癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其在腫瘤中表達(dá)升高，同時(shí)其對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子有明顯的促進(jìn)作用，認(rèn)為其高表達(dá)在促進(jìn)腫瘤過(guò)程生長(zhǎng)過(guò)程中，對(duì)血管生長(zhǎng)的調(diào)控是其機(jī)制之一。因此MTDH可能具有多種調(diào)節(jié)功能。C-myc也是促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的蛋白因素，當(dāng)外部和內(nèi)部的各種刺激使C-myc基因表達(dá)增加時(shí)，引起分裂周期中的靜息期細(xì)胞增加，引起癌變〔16〕。本研究結(jié)果提示MTDH和C-myc二者高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和腫瘤細(xì)胞的失控性增殖。MTDH參與腫瘤細(xì)胞的幼稚到成熟的演變過(guò)程中。C-myc高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤淋巴道播散的重要因素，因此C-myc高表達(dá)也是轉(zhuǎn)移相關(guān)的因子。MTDH和C-myc二者之間有一定的協(xié)同作用。MTDH啟動(dòng)子區(qū)域發(fā)現(xiàn)其含有兩個(gè)能與C-myc結(jié)合的元件，這種結(jié)構(gòu)上的特點(diǎn)使MTDH可以與C-myc有一定的結(jié)合作用。此時(shí)C-myc作為轉(zhuǎn)錄因子通過(guò)結(jié)合E-box元件，提高了C-myc轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)〔17〕。

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15張艷艷，李紅雨，張慧，等.MTDH和VEGF在上皮性卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.臨床腫瘤學(xué)雜志，2014；19(1)：18-22.

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