吳媛媛　張菁華　秦策　柳志寶　李永生　高敬華

[摘 要] 目的：分析C-myc基因在肺鱗癌、腺癌中的表達(dá)及其對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)價(jià)值，為肺鱗腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)提供參考。方法：選擇51例肺鱗癌、45例肺腺癌及其癌旁組織標(biāo)本，使用免疫組化法檢測(cè)標(biāo)本原癌基因C-myc表達(dá)，并分析其與患者病理類型、組織分化程度、病理分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。結(jié)果：肺鱗癌組織C-myc陽(yáng)性率為70.59%（36/51），高于癌旁組織的11.76%（6/51），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)肺鱗癌組織C-myc表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肺腺癌組織C-myc陽(yáng)性率為91.11%（41/45），高于癌旁組織的15.56%（7/45），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；不同臨床病理特征肺腺癌組織C-myc表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。肺腺癌C-myc陽(yáng)性率高于肺鱗癌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：C-myc在肺鱗癌、腺癌病灶中陽(yáng)性表達(dá)率均高于癌旁組織，其表達(dá)水平與肺鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)具有一定關(guān)聯(lián)。

[關(guān)鍵詞] C-myc；原癌基因；肺鱗癌；肺腺癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；預(yù)測(cè)

中圖分類號(hào)：R734.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-5200（2017）01-085-03

DOI：10.11876/mimt201701034

作為呼吸系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，肺癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟、多階段和多基因改變的過程，癌基因激活、抑癌基因、DNA修復(fù)基因突變或缺失與腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有密切關(guān)聯(lián)[1]。C-myc是原癌基因myc家族中的一員，也是近年來分子生物學(xué)研究的熱點(diǎn)，既往研究發(fā)現(xiàn)，C-myc在子宮內(nèi)膜癌、胰腺癌、乳腺癌等多種腫瘤的生長(zhǎng)、黏附、遷移中均扮演了重要角色[2-3]。但關(guān)于C-myc與肺癌關(guān)系的研究較為缺乏，因此，本研究選擇肺鱗癌、肺腺癌患者癌及癌旁組織標(biāo)本，了解C-myc在肺鱗癌、腺癌中的表達(dá)及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本選擇

51例肺鱗癌、45例肺腺癌患者，入選患者根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟頒布的肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)[4]臨床分期I～Ⅳ期，排除標(biāo)本來源合并其他惡性腫瘤及系統(tǒng)性疾病者[5]。51例肺鱗癌患者中男29例，女22例，年齡46～71歲，平均（58.26±6.44）歲，組織分化程度：高分化15例，中分化19例，低分化17例；TNM分期：Ⅰ期24例，Ⅱ期14例，Ⅲ/Ⅳ期13例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性25例。45例肺腺癌患者中男24例，女21例，年齡43～75歲，平均（57.92±6.39）歲，組織分化程度：高分化13例，中分化15例，低分化17例；TNM分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期11例，Ⅲ/Ⅳ期14例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性23例。

1.2 染色方法

取患者癌及癌旁2cm以上正常組織，標(biāo)本均使用10%中性甲醛固定，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，置于涂有多聚賴氨酸的防脫載玻片上，70℃恒溫烘烤2～3 h，而后采用二步法免疫組化染色[6]，操作方法嚴(yán)格按照通用型PV6000試劑盒（北京中杉生物試劑公司），抗C-myc單克隆抗體由福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司提供，以PBS溶液代替一抗作為陰性對(duì)照，陽(yáng)性對(duì)照由購(gòu)買試劑公司提供。

1.3 結(jié)果判定

采取Garcia半定量法進(jìn)行染色結(jié)果判定，隨機(jī)觀察10個(gè)高倍鏡視野，以陽(yáng)性細(xì)胞（胞核或胞質(zhì)內(nèi)可見淡黃色至棕黃色顆粒）百分比計(jì)分：0分：未見陽(yáng)性細(xì)胞；1分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比<25%；2分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比25%～50%；3分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比50%～75%；4分：陽(yáng)性細(xì)胞百分比>75%。以著色強(qiáng)度計(jì)分：0分：未著色；1分：淡黃色染色；2分：棕黃色染色。陽(yáng)性細(xì)胞百分比計(jì)分、著色強(qiáng)度計(jì)分的乘積為總分，根據(jù)總分判斷染色結(jié)果[7-8]：陰性：0～1分；陽(yáng)性：2～8分（2～4分為弱陽(yáng)性，5～8分為強(qiáng)陽(yáng)性）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS18.0進(jìn)行分析，C-myc表達(dá)陽(yáng)性率以（n/%）表示，并采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺鱗癌及癌旁組織C-myc表達(dá)情況

肺鱗癌組織C-myc陽(yáng)性率為70.59%（36/51），高于癌旁組織的11.76%（6/51），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)肺鱗癌組織C-myc表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 肺腺癌及癌旁組織C-myc表達(dá)情況

肺腺癌組織C-myc陽(yáng)性率為91.11%（41/45），高于癌旁組織的15.56%（7/45），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、組織分化程度、TNM分期肺腺癌組織C-myc表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.3 肺腺癌及肺鱗癌C-myc表達(dá)情況

肺腺癌C-myc陽(yáng)性率為91.11%，高于肺鱗癌的70.59%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

C-myc是原癌基因myc家族中的一員，位于8號(hào)染色體，主要發(fā)揮刺激細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，C-myc過度表達(dá)可造成細(xì)胞脫離正常有絲分裂軌道，并誘導(dǎo)靜止期細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞分裂期，進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞增殖速度上升，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生[9]。與此同時(shí)，諸多研究表明，C-myc表達(dá)的變化與胃癌、胰腺癌等惡性腫瘤的增殖及分化狀態(tài)具有密切關(guān)聯(lián)，其表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞生長(zhǎng)、分化及惡性轉(zhuǎn)化中發(fā)揮的調(diào)節(jié)作用也已得到證實(shí)[10-11]。

本研究就C-myc在肺鱗癌、腺癌中的表達(dá)進(jìn)行了觀察，結(jié)果表明，無論是肺鱗癌還是肺腺癌，癌組織中C-myc陽(yáng)性率均明顯高于癌旁組織，說明C-myc參與了腫瘤的形成過程。C-myc原癌基因表達(dá)的方式以基因擴(kuò)增、過表達(dá)為主，其異常表達(dá)往往在癌變?cè)缙诩窗l(fā)生，并通過影響細(xì)胞生長(zhǎng)代謝、周期變化、惡性轉(zhuǎn)化以及刺激血管增生、加劇基因不穩(wěn)定型，啟動(dòng)腫瘤發(fā)生、促進(jìn)癌性增生[12-13]。

C-myc異常激活的機(jī)制包括染色體易位、基因突變、基因擴(kuò)增、DNA的甲基化等，是導(dǎo)致原癌基因異常高表達(dá)、促進(jìn)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的主要原因[14]。最新研究發(fā)現(xiàn)，C-myc在細(xì)胞凋亡過程中亦扮演了重要角色，其過度表達(dá)、不適時(shí)表達(dá)均可造成細(xì)胞凋亡加劇，但生長(zhǎng)因子存在時(shí)，激活擴(kuò)增的C-myc往往以促增殖作用為主，而細(xì)胞內(nèi)基因調(diào)控失衡的加劇亦使得細(xì)胞分化進(jìn)一步抑制，為細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化創(chuàng)造了一定條件[15-16]。本研究結(jié)果亦顯示，C-myc異常高表達(dá)與肺鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)具有密切關(guān)聯(lián)，說明C-myc陽(yáng)性肺鱗癌患者具有更高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，但與肺腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)無明顯相關(guān)性，考慮與肺腺癌普遍伴隨著C-myc表達(dá)上調(diào)有關(guān)[17]。表明，C-myc不僅在肺鱗癌、腺癌的發(fā)生過程中發(fā)揮了重要作用，也是促使肺鱗癌細(xì)胞浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的重要基因，因此，可以認(rèn)為，早期檢測(cè)肺鱗癌患者病灶組織C-myc表達(dá)能夠預(yù)測(cè)或了解其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)，為治療策略的制定與調(diào)整提供一定參考，但C-myc表達(dá)情況無法預(yù)測(cè)肺腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)。

Tsai等[18]發(fā)現(xiàn)，病灶組織C-myc陽(yáng)性肺癌患者，其5年生存率明顯低于C-myc陰性者，考慮與C-myc陽(yáng)性者病灶惡性表型轉(zhuǎn)化能力更強(qiáng)、腫瘤細(xì)胞增殖速度較快有關(guān)，該研究結(jié)果亦說明根據(jù)C-myc表達(dá)情況有望預(yù)測(cè)患者生存質(zhì)量，關(guān)于這一方面的研究，有待日后大樣本、長(zhǎng)期隨訪加以觀察。

綜上所述，C-myc在肺鱗癌、腺癌病灶中陽(yáng)性表達(dá)率均高于癌旁組織，其在肺鱗癌發(fā)生發(fā)展、腫瘤細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化中扮演了重要角色，且與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有密切關(guān)聯(lián)，根據(jù)C-myc表達(dá)情況預(yù)測(cè)肺鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、評(píng)估預(yù)后質(zhì)量，有望為臨床診治提供一定參考，值得進(jìn)一步深入研究。

參 考 文 獻(xiàn)

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