黃晶　郭艷　陳沛?zhèn)ァ罘?/p>

[摘 要] 目的：探討葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1（ UGT1A1）基因G71R突變合并葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺陷對(duì)新生兒膽紅素濃度的影響。方法：2013年1月至2014年5月間62例足月新生兒62例，根據(jù)臍血G6PD水平分組，G6PD缺陷組36例，G6PD正常組26例，檢測(cè)UGT1A1基因G71R突變和出生后3d膽紅素水平變化。結(jié)果：G6PD缺陷組病例與正常組的UGT1A1基因型分布比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩組間等位基因G71R突變頻率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。G6PD缺陷組與正常組病例UGT1A1基因G71R純合子/雜合子型的膽紅素水平在出生后1 d時(shí)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），出生后2 d和3 d比較缺陷組顯著高于正常組（P<0.05）。G6PD正常組出生后1 ～3 d 兩種基因型膽紅素水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：UGT1A1基因G71R突變與G6PD缺陷在加重新生兒膽紅血癥及黃疸方面具有協(xié)同作用，應(yīng)密切觀察和監(jiān)護(hù)該類患兒，及早發(fā)現(xiàn)膽紅素水平異常和早期干預(yù)，以減少因膽紅素血癥引發(fā)的各類危重疾病的發(fā)生。

[關(guān)鍵詞] UGT1A1基因；G71R突變；G6PD缺陷；新生兒膽紅素濃度

中圖分類號(hào)：R722 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-5200（2017）01-126-02

DOI：10.11876/mimt201701051

新生兒高膽紅素血癥可通過(guò)光療治療，但重癥患兒可引起膽紅素腦病，即使幸存，也可能遺留永久性神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥[1]。近些年來(lái)，分子生物學(xué)對(duì)新生兒高膽紅素血癥的基因研究不斷深入。研究發(fā)現(xiàn)葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A1（UGT1A1）基因突變可引發(fā)葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（UGT）的功能和結(jié)構(gòu)性改變，影響膽紅素的結(jié)合[2]，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺陷可致高膽紅素血癥[3]。本文探討UGT1A1基因G71R突變合并G6PD缺陷對(duì)新生兒膽紅素濃度的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究樣本為我院2013年1月至2014年5月間62例足月新生兒，男/女為34/28，平均孕周（39.2±1.2）周，母乳喂養(yǎng)56例，人工喂養(yǎng)6例。排除早產(chǎn)、低體重、敗血癥、肝功能異常、ABO溶血、窒息、顱內(nèi)出血、頭顱血腫、低血糖、紅細(xì)胞增多癥、嚴(yán)重感染患兒以及孕母妊娠期有高危并發(fā)癥患兒。采集新生兒臍血或新生兒娩出后24 h內(nèi)血液。采用熒光分析法檢測(cè)G6PD，≤2.2為G6PD缺陷。根據(jù)G6PD水平將患兒分為G6PD缺陷組36例，G6PD正常組26例，兩組患兒性別、出生時(shí)體質(zhì)量等基本資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法

UGT1A1基因G71R突變檢測(cè)參考文獻(xiàn)[4]，PCR引物為上海生工生物工程技術(shù)有限公司提供。

使用日本APEL公司膽紅素測(cè)定儀，于每日清晨測(cè)定患兒膽紅素水平，連續(xù)測(cè)定3 d。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

相關(guān)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS19.0軟件處理分析，計(jì)數(shù)資料以%表示，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，分別應(yīng)用卡方檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)認(rèn)為數(shù)據(jù)間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組別病例UGT1A1基因型分布和G71R突變頻率

如表1所示，G6PD缺陷組病例與正常組的UGT1A1基因型分布比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩組間等位基因G71R突變頻率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 不同組別病例膽紅素水平測(cè)定結(jié)果

如表2所示，G6PD缺陷組病例出生后1 d UGT1A1基因G71R純合子/雜合子型的膽紅素水平與野生型比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），出生后2 d和3 d純合子/雜合子型的膽紅素水平顯著高于野生型（P<0.05）；G6PD正常組病例出生后1 d、2 d和3 d UGT1A1基因G71R的純合子/雜合子分型與野生型比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

3 討論

3.1 膽紅素

膽紅素主要來(lái)源于血紅蛋白，可非極性與白蛋白結(jié)

合[5]。新生兒膽紅素是判定黃疸的關(guān)鍵指標(biāo)。了解影響新生兒膽紅素水平的機(jī)制對(duì)于改善高膽紅素血癥患兒預(yù)后具有重要意義[6]。

3.2 UGT1A1基因G71R突變

UGT參與膽紅素排出體外的生理過(guò)程，而UGT1A1則與膽紅素的葡萄糖醛酸化密切相關(guān)[7]。UGT家族一般被分為兩個(gè)亞族，分別是UGT1A和UGT2B[8]。UGT1A主要對(duì)膽紅素、苯酚類葡萄糖等具有醛酸化作用，其編碼基因主要位于2號(hào)染色體上，由1599個(gè)核苷酸組成。UGT1A1基因?yàn)閁GT1A蛋白的一種，以肝臟為主要分布臟器，為唯一作用于膽紅素的同工酶[9]。一旦UGT1A1基因編碼區(qū)發(fā)生突變，則對(duì)UGT酶的結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生影響，降低UGT酶的催化結(jié)合作用，影響膽紅素葡萄糖醛酸化，阻礙膽紅素排出體外，進(jìn)而引發(fā)高膽紅素血癥[10-11]。

G71R突變最早在日本人群中發(fā)現(xiàn)[12]，主要表現(xiàn)為UGT1A1的第一外顯子發(fā)生G-A突變，其71位密碼子發(fā)生GGA-AGA突變，使甘氨酸突變?yōu)榫彼醄13]。傅雯萍等[14]

將母乳性黃疸患兒作為研究對(duì)象，證實(shí)了UGT1A1基因G71R突變對(duì)母乳性黃疸的發(fā)生具有促進(jìn)作用，可通過(guò)抑制葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶活性提高患兒機(jī)體內(nèi)膽紅素水平。因而對(duì)于篩查發(fā)現(xiàn)存在UGT1T基因G71R突變患兒，應(yīng)格外注意其黃疸的發(fā)生和膽紅素的濃度變化情況，及時(shí)發(fā)現(xiàn)異常并早期施治，盡早控制病情進(jìn)展[15]。

3.3 G6PD缺陷

G6PD為人體血紅細(xì)胞內(nèi)存在的一種蛋白質(zhì)，由515個(gè)氨基酸構(gòu)成，13個(gè)外顯子與12個(gè)內(nèi)含子編碼，具有協(xié)同葡萄糖實(shí)現(xiàn)人體新陳代謝的作用[16]。G6PD的編碼氨基酸序列發(fā)生結(jié)構(gòu)性異常時(shí)，引起G6PD缺乏癥，造成膽紅素水平升高，但目前對(duì)于G6PD引起高膽紅素的機(jī)制尚不明確。有研究認(rèn)為，存在G6PD缺乏的病例中存在還原型輔酶II缺乏，血紅細(xì)胞有結(jié)構(gòu)和功能性改變，易發(fā)生紅細(xì)胞破裂溶血，進(jìn)而造成膽紅素水平升高[17]。也有報(bào)道認(rèn)為G6PD缺乏時(shí)血紅細(xì)胞膜及血紅蛋白可能發(fā)生氧化性損傷，從而引起溶血，加重黃疸癥狀。

3.4 G6PD缺陷聯(lián)合UGT1A1基因G74R突變

基于G6PD缺陷和UGT1A1基因G74R突變均對(duì)新生兒膽紅素升高存在影響作用，本研究將兩種分子學(xué)指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在G6PD缺陷病例中，患兒出生后第2 d和第3 d，UGT1A1基因G71R純合子/雜合子的膽紅素水平顯著高于野生型，說(shuō)明G6PD缺陷與UGT1A1基因G71R突變聯(lián)合出現(xiàn)時(shí)，對(duì)新生兒膽紅素濃度有顯著影響，可提高膽紅素水平，誘發(fā)或加重黃疸及膽紅素血癥。

綜上所述，UGT1A1基因G71R突變與G6PD缺陷在加重新生兒膽紅血癥及黃疸方面具有協(xié)同作用，該類患兒應(yīng)作為臨床的重點(diǎn)工作對(duì)象，密切觀察和監(jiān)護(hù)，及早發(fā)現(xiàn)膽紅素水平異常和早期干預(yù)，以減少因膽紅素血癥而引發(fā)的各類危重疾病的發(fā)生。

參 考 文 獻(xiàn)

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