蘭　綱　

(武警浙江總隊(duì)嘉興醫(yī)院胸心外科，浙江　嘉興　314000)

我國(guó)為食管癌高發(fā)地區(qū)，其發(fā)病率及死亡人數(shù)居世界之首〔1，2〕，流行病學(xué)調(diào)查顯示華北地區(qū)和沿海的閩、粵是高發(fā)區(qū)域〔3〕。食管癌的預(yù)后與臨床分期存在直接關(guān)系，中晚期食管癌患者5年生存率為15%～50%〔4，5〕，部分早期患者經(jīng)過(guò)手術(shù)及相關(guān)治療也存在一定復(fù)發(fā)，腫瘤本身的生物學(xué)行為在一定程度上決定了食管癌患者的臨床及預(yù)后〔6〕。因此，如何通過(guò)監(jiān)測(cè)腫瘤標(biāo)志物表達(dá)提高早期食管癌的檢出率和評(píng)估食管癌患者的病情變化，已經(jīng)成為當(dāng)前食管癌研究的重點(diǎn)領(lǐng)域。本文分析基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白(NGAL)及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β1在老年食管癌患者中的水平及臨床意義。

1　對(duì)象及方法

1.1研究對(duì)象選取2013年1月至2015年1月武警浙江總隊(duì)嘉興醫(yī)院收治的老年食管癌患者80例，平均年齡(68.4±5.7)歲，男46例，女34例，所有患者經(jīng)電子胃鏡活檢病理證實(shí)，早期(Ⅰ～Ⅱ期)52例，中晚期(Ⅲ～Ⅳ期)28例，所有病例經(jīng)術(shù)后大體標(biāo)本診斷確診，按有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，分為轉(zhuǎn)移組(19例)，無(wú)轉(zhuǎn)移組(61例)；正常對(duì)照組來(lái)自同期健康體檢的正常老年個(gè)體80例，平均年齡(68.9±5.6)歲，男45例，女35例，兩組實(shí)驗(yàn)對(duì)象對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他腫瘤；②存在心、肝、腦、腎等器官功能不全者；③既往腫瘤病史。兩組年齡、性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2研究方法標(biāo)本采集：抽取兩組空腹不抗凝靜脈血2 ml，置-70℃凍存，用于檢測(cè)血清MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1水平。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)，操作步驟嚴(yán)格按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)要求。主要試劑：MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1試劑盒由比利時(shí)BioSouree公司提供；所有試劑在有效期內(nèi)使用。

1.3觀察指標(biāo)比較兩組年齡、性別、血清MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1水平；比較食管癌不同臨床分期和是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移亞組之間MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行t及χ2檢驗(yàn)。

2　結(jié)　果

老年食管癌患者血清MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1水平明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。早期食管癌的血清MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1水平明顯低于晚期組(P<0.05)，見(jiàn)表2。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1水平明顯高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表1　兩組血清MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1含量

表2　食管癌不同分期血清MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1的水平比較

表3　不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組MMP-9、VEGF、NGAL及TGF-β1的水平比較

3　討　論

食管癌是消化道常見(jiàn)的腫瘤之一，到2035年發(fā)病人數(shù)將達(dá)到43.4萬(wàn)和40.8萬(wàn)，當(dāng)前我國(guó)食管癌死亡位列居民死亡率第四位〔1〕。目前認(rèn)為食管癌的發(fā)病原因包括年齡、性別、飲食習(xí)慣及遺傳易感性等因素〔7～9〕。典型的臨床表現(xiàn)是由食管新生物生長(zhǎng)致管腔狹窄、僵硬，出現(xiàn)進(jìn)行性吞咽困難，最終導(dǎo)致患者日漸消瘦、營(yíng)養(yǎng)狀況下降、體重降低等。早期食管癌起病多隱匿、不典型，可為偶然發(fā)生的吞咽時(shí)異物感、胸骨后疼痛或不適感等，多數(shù)需通過(guò)食管鏡檢查直接針對(duì)懷疑病變進(jìn)行活檢明確，因此早期食管癌臨床診斷較為困難，約80%患者在就診時(shí)已經(jīng)屬于晚期，錯(cuò)過(guò)了最佳手術(shù)時(shí)間。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的生理過(guò)程，它涉及血管的再生、細(xì)胞基質(zhì)的溶解等。MMP是一類(lèi)結(jié)構(gòu)上具有極大同源性、能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的內(nèi)肽酶的總和，得名于其含有金屬離子(鋅、鈣)，可以降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)和基質(zhì)質(zhì)膜成分，而ECM和基底膜是腫瘤生長(zhǎng)擴(kuò)散的屏障，所以此過(guò)程是腫瘤晚期轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵部分。因此有學(xué)者認(rèn)為MMP-9是與腫瘤關(guān)系最為密切的基質(zhì)蛋白酶〔10,11〕。此外，有研究證實(shí)MMP-9還可以通過(guò)刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞因子的釋放刺激腫瘤血管的產(chǎn)生〔12〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示MMP-9的高表達(dá)在食管癌分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮重要作用。腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移需要自身血管的血供，而腫瘤血管的新生需要VEGF的參與。VEGF是血小板源性生長(zhǎng)因子家族中的一個(gè)成員，是一個(gè)重要的細(xì)胞因子，也是目前已知的最強(qiáng)促進(jìn)血管生成因子，其對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化和增殖效果具有特異性。VEGF通過(guò)以下的過(guò)程參與腫瘤血管形成過(guò)程：①增加血管的通透性，纖維蛋白原等蛋白滲出到血管外，為血管的形成提供基礎(chǔ)；②激活纖溶酶原，降解毛細(xì)血管的基底膜；③聚集微血管內(nèi)皮細(xì)胞形成管腔樣的結(jié)構(gòu)〔13〕。新生的血管是腫瘤細(xì)胞外侵的最重要前提，在血管增殖的過(guò)程中，腫瘤細(xì)胞和宿主細(xì)胞會(huì)分泌VEGF。VEGF可以特異地作用于腫瘤組織中的血管內(nèi)皮細(xì)胞，加速腫瘤組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂和增殖，從而加速腫瘤血管的新生，達(dá)到加快腫瘤的生長(zhǎng)的目的〔14,15〕。此外，新生的腫瘤血管壁由于其僅有一層內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞之間間隙及VEGF刺激其釋放膠原酶，從而使腫瘤細(xì)胞分離、脫落，達(dá)到實(shí)現(xiàn)腫瘤遠(yuǎn)期轉(zhuǎn)移的目的。本研究結(jié)果顯示VEGF在肝癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移方面扮演著重要作用。

最初認(rèn)為NGAL的作用在于誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞顆粒釋放，在抗感染方面發(fā)揮作用〔16〕。但后來(lái)發(fā)現(xiàn)其在肺癌、乳腺癌、胰腺癌等表達(dá)上調(diào)，才被證實(shí)其與腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。目前認(rèn)為NGAL參與腫瘤形成的機(jī)制可能如下：①通過(guò)與MMP-9形成復(fù)合物，保護(hù)調(diào)節(jié)MMP-9活性，參與癌癥細(xì)胞的浸潤(rùn)和遠(yuǎn)期轉(zhuǎn)移；②調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的分化；③也有學(xué)者甚至認(rèn)為NGAL本身即癌基因，本研究顯示NGAL在食管癌患者中顯著表達(dá)且與食管癌的分期和遠(yuǎn)期轉(zhuǎn)移正相關(guān)，與既往的研究一致〔17〕。已有研究證實(shí)TGF-β1在腫瘤中的抑癌角色，TGF-β1可在轉(zhuǎn)錄后抑制原癌基因C-myc的表達(dá)，使細(xì)胞生長(zhǎng)停滯于G0期，抑制腫瘤的形成〔18〕。本文結(jié)果表明，食管癌患者在術(shù)前血清TGF-β1水平非常顯著高于正常人組，且晚期的患者及轉(zhuǎn)移的患者明顯高于早期及未轉(zhuǎn)移者。TGF-β1升高的機(jī)制可能是因機(jī)體有效地抑制腫瘤的生長(zhǎng)，加速腫瘤細(xì)胞的凋亡而使體內(nèi)代償性的分泌增多〔19〕。

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