張仲寬 張卓琳

（1.天津市兒童藥廠，天津300270；2.南京醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，江蘇南京211166）

0 引言

有關(guān)物質(zhì)是指藥品中除主成分以外的雜質(zhì)，它既可能是原料藥合成過程中帶入的原料、中間體、試劑、副產(chǎn)物、聚合體、異構(gòu)體、不同晶體和對映異構(gòu)體，又可能是制劑在生產(chǎn)、貯藏、運(yùn)輸過程中產(chǎn)生的降解產(chǎn)物、聚合物或晶型轉(zhuǎn)變的特殊雜質(zhì)等[1]。葉酸片為《中國藥典》（2015年版）二部收錄的品種[2]。在《中國藥典》（2010年版）中，葉酸片并沒有“有關(guān)物質(zhì)”這一檢查項(xiàng)，在2012年10月1日實(shí)施的《中國藥典》（2010年版）第一增補(bǔ)本中，葉酸片增加了“有關(guān)物質(zhì)”檢查項(xiàng)[3]。

葉酸作為維生素類藥品，化學(xué)名為N-[4-[（2-氨基-4-氧代-1，4-二氫-6-蝶啶）甲氨基]苯甲?；鵠-L-谷氨酸，用于預(yù)防胎兒先天性神經(jīng)管畸形，是妊娠期、哺乳期婦女的預(yù)防用藥。因此，控制好葉酸片的有關(guān)物質(zhì)，不僅關(guān)系到藥品質(zhì)量本身，還關(guān)系到孕婦和嬰幼兒的身體健康。

本文以規(guī)格為0.4 mg的葉酸片為例，考察葉酸片濕顆粒在不同干燥溫度下，干燥過程對有關(guān)物質(zhì)的影響。

1 材料

1.1 設(shè)備與儀器

小試設(shè)備：200齒盤式粉碎機(jī)（丹東某制藥機(jī)械廠）、CH-20型槽式混合機(jī)（丹東某制藥機(jī)械廠）、YK-90型搖擺顆粒機(jī)（丹東某制藥機(jī)械廠）、電熱鼓風(fēng)干燥箱（天津天宇技術(shù)實(shí)業(yè)有限公司）、單沖式壓片機(jī)（上海某制藥機(jī)械有限公司）。

檢測儀器：BSA2235電子天平（賽多利斯）、LC-2010CHT高效液相色譜儀（島津）、HE53快速水分測定儀（梅特勒）、Labonce-250SD藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱（北京某技術(shù)有限公司）。

1.2 物料與試劑

物料：葉酸（河北冀衡藥業(yè)集團(tuán)）、輔料A（遼寧營口奧達(dá)）、輔料B（遼寧營口奧達(dá)）、硬脂酸鎂（遼寧營口奧達(dá)）。

試劑：磷酸二氫鉀（天津市贏達(dá)稀貴化學(xué)試劑廠）、四丁基氫氧化銨（Aladdin Industrial Co.）、甲醇（天津市康科德科技有限公司）、葉酸對照品（100074-201214，中國食品藥品檢定研究院）。

2 試驗(yàn)方案

2.1 處方

本次葉酸片試驗(yàn)量：10萬片，葉酸片處方如表1所示。

表1 葉酸片處方

2.2 葉酸片有關(guān)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定

根據(jù)《中國藥典》（2015年版）二部對葉酸片有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)的規(guī)定，要求遮光進(jìn)行檢測，采用HPLC法，在供試品溶液的色譜圖中，蝶酸峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.6倍（0.6%），單個雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的3倍（1.0%），除蝶酸峰外，各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對照溶液主峰面積的3倍（1.0%）。在供試品溶液的色譜圖中，小于對照溶液主峰面積0.05倍的峰忽略不計。

2.3 試驗(yàn)過程

按2.1小試處方量領(lǐng)取物料，按照工藝要求進(jìn)行粉碎、制粒操作；將約7.5 kg的濕顆粒均分成約5等份，每個溫度點(diǎn)干燥約1.5 kg（干燥溫度依次設(shè)定5個溫度點(diǎn)：60℃、70℃、80℃、90℃、100℃），每個溫度點(diǎn)分成3等份，分別用電熱鼓風(fēng)干燥箱干燥至水分達(dá)6.0%～7.5%，分別整粒加工干燥好的顆粒，再加入硬脂酸鎂，總混，按理論片重進(jìn)行壓片，按正常生產(chǎn)包裝進(jìn)行封口，并做好標(biāo)識（批號設(shè)定：溫度-干燥次數(shù)）。

2.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)匯總

本次試驗(yàn)數(shù)據(jù)如表2所示。

2.5 考察條件

制定穩(wěn)定性考察計劃，對每個溫度點(diǎn)的葉酸片按照質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行“性狀”和“有關(guān)物質(zhì)”項(xiàng)檢測，先考察“有關(guān)物質(zhì)”0個月時的數(shù)據(jù)，后對每個溫度點(diǎn)的葉酸片進(jìn)行加速和長期穩(wěn)定性試驗(yàn)考察，考察期為6個月。

表2 試驗(yàn)數(shù)據(jù)

根據(jù)《中國藥典》（2015年版）四部9001原料藥物與制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則規(guī)定[4]，加速穩(wěn)定性試驗(yàn)應(yīng)在溫度（40±2）℃、相對濕度75%±5%條件下，長期穩(wěn)定性試驗(yàn)應(yīng)在溫度（25±2）℃、相對濕度60%±5%條件下，置于按上述條件設(shè)定好的穩(wěn)定性試驗(yàn)箱內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)考察。

3 穩(wěn)定性試驗(yàn)考察結(jié)果

3.1 葉酸片性狀

在加速穩(wěn)定性試驗(yàn)考察和長期穩(wěn)定性試驗(yàn)考察過程中，發(fā)現(xiàn)葉酸片性狀基本無變化，以下統(tǒng)計中不再體現(xiàn)。

3.2 加速穩(wěn)定性試驗(yàn)考察數(shù)據(jù)

加速穩(wěn)定性試驗(yàn)考察數(shù)據(jù)匯總?cè)绫?所示。

在加速穩(wěn)定性試驗(yàn)考察中，最大單雜和總雜的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)分別如圖1、圖2所示。

3.3 長期穩(wěn)定性試驗(yàn)考察數(shù)據(jù)

長期穩(wěn)定性試驗(yàn)考察數(shù)據(jù)匯總?cè)绫?所示。

在長期穩(wěn)定性試驗(yàn)考察中，最大單雜和總雜的長期穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)分別如圖3、圖4所示。

需要注意的是，以上的數(shù)據(jù)并不是為了制定葉酸片的有效期，而是為葉酸片實(shí)際生產(chǎn)的工藝優(yōu)化提供參考，所以沒有按照95%可信限進(jìn)行統(tǒng)計和分析。

表3 加速穩(wěn)定性試驗(yàn)考察數(shù)據(jù)匯總

圖1 加速穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)（最大單雜）

圖2 加速穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)（總雜）

4 穩(wěn)定性考察結(jié)果的數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

（1）有關(guān)物質(zhì)中的蝶酸隨干燥溫度的增加，變化不大，說明蝶酸化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定。

（2）有關(guān)物質(zhì)中的最大單雜和總雜隨干燥溫度的增加而增加，溫度增加越高，數(shù)據(jù)變化越劇烈。

（3）從各圖中可以看出：除0個月外，70℃干燥溫度的6個月加速和長期穩(wěn)定性試驗(yàn)的數(shù)據(jù)均低于60℃干燥溫度的數(shù)據(jù)，說明選用烘箱干燥時，干燥溫度相對較低并不是一個最佳的選擇，這是因?yàn)橐胱尭深w粒的水分滿足規(guī)定要求，需要更長的時間，在一定干燥溫度下，干燥時間的延長對該品種的有關(guān)物質(zhì)會產(chǎn)生不良影響。

5 結(jié)語

采用濕法制粒工藝生產(chǎn)葉酸片（規(guī)格：0.4 mg）時，應(yīng)特別注意干燥溫度對有關(guān)物質(zhì)的影響：隨干燥溫度增加，對蝶酸的影響不大，但是對最大單雜和總雜的不良影響明顯增大。同時，也要注意干燥時間對有關(guān)物質(zhì)的不良影響。

表4 長期穩(wěn)定性試驗(yàn)考察數(shù)據(jù)匯總

續(xù)表

圖3 長期穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)（最大單雜）

圖4 長期穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)（總雜）

綜合以上數(shù)據(jù)，如果選用熱風(fēng)循環(huán)烘箱進(jìn)行干燥，應(yīng)選擇70℃的干燥溫度為宜，對葉酸片有關(guān)物質(zhì)的影響最小。

［參考文獻(xiàn)］

[1]杜寧，王玉，狄斌.藥物中有關(guān)物質(zhì)的研究探討[J].中國藥品標(biāo)準(zhǔn)，2011，12（4）：248-251.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：195.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（第一增補(bǔ)本）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：331.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（四部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：354-356.