李林海，劉 輝，江明萬，鄧天偉，于 雙（重慶三峽中心醫(yī)院消化內(nèi)科，重慶404000）

結(jié)直腸癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，近年來，其發(fā)病率有明顯的上升趨勢。酪氨酸受體激酶B（TrkB）是腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）的特異性受體。研究發(fā)現(xiàn)，TrkB及BDNF在多種腫瘤中存在高表達，且與其侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān)。本研究旨在通過檢測術(shù)前結(jié)直腸癌鏡下活檢標本的TrkB和BDNF表達，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年3月至2015年5月在本院普外科行結(jié)直腸癌根治術(shù)患者共60例，所有患者術(shù)前均在本院內(nèi)鏡中心結(jié)腸鏡檢查取得標本，并經(jīng)病理證實。所得標本均進行常規(guī)固定、包埋、切片。60例患者中男32例，女28例；年齡28～72歲，平均58.6歲；其中有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移34例。TrkB兔抗人多克隆抗體、BDNF兔抗人多克隆抗體均購自武漢博士德生物工程有限公司，免疫組織化學(xué)SP試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

1.2 方法 免疫組織化學(xué)染色采用SP法，操作步驟嚴格按說明書進行。對每張切片陽性細胞的陽性強度按無著色、淡黃色、棕黃色和棕褐色分別記0、1、2、3分，著色面積按無著色及著色小于1/3、1/3～2/3、＞2/3分別記 0、1、2、3分，然后根據(jù)兩項記分之和判斷其結(jié)果：＜3 分為陰性，≥3分為陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，比較采用χ2檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman分析，P＜0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 TrkB和BDNF在結(jié)直腸癌中的表達 60例結(jié)直腸癌患者術(shù)前標本中，TrkB主要表達于結(jié)直腸癌的細胞質(zhì)，其中陽性表達33例，陽性表達率為55.0%。BDNF主要表達于結(jié)直腸癌的細胞質(zhì)和細胞膜，其中陽性表達37例，陽性表達率為61.7%。

2.2 TrkB和BDNF的表達與結(jié)直腸癌臨床病理因素的關(guān)系 TrkB的陽性表達率在臨床Ⅲ期（67.6%，23/34）明顯高于在臨床Ⅰ、Ⅱ期（38.5%，10/26），有淋巴轉(zhuǎn)移的陽性表達率（67.6%，23/34）明顯高于無淋巴轉(zhuǎn)移（38.5%，10/26），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；BDNF的陽性表達率在臨床Ⅲ期（73.5%，25/34）明顯高于在臨床Ⅰ、Ⅱ期（46.2%，12/26），有淋巴轉(zhuǎn)移的陽性表達率（73.5%，25/34）明顯高于無淋巴轉(zhuǎn)移（46.2%，12/26），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；但TrkB和BDNF的表達與患者的性別、年齡、分化程度、浸潤程度無關(guān)（P＞0.05）。見表1。

表1 TrkB和BDNF的表達與結(jié)直腸癌臨床病理因素的關(guān)系（n）

2.3 TrkB和BDNF表達的相關(guān)性 經(jīng)Spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，TrkB與BDNF在術(shù)前結(jié)直腸癌患者的結(jié)腸鏡活檢標本中的表達呈正相關(guān)（r=0.389，P=0.002）。見表2。

表2 結(jié)直腸癌中TrkB與BDNF表達的相關(guān)性分析（n）

3 討 論

結(jié)直腸癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，結(jié)腸鏡檢查是發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌的最直接方法，TrkB主要與BDNF結(jié)合，通過激活MAPK/ERK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生發(fā)展。

有研究發(fā)現(xiàn)，TrkB和BDNF在多種腫瘤中表達上調(diào)，郭大偉等[1]發(fā)現(xiàn)，TrkB和BDNF可能對肝細胞癌（HCC）細胞的存活和侵襲具有重要的支持作用，并促進HCC的發(fā)展演變。本研究發(fā)現(xiàn)，在結(jié)直腸癌術(shù)前標本中，侵潤深度T4期的TrkB陽性表達率高于T2、T3期，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），可能與本研究中T2、T3期病例數(shù)較少有關(guān)，而BDNF的表達在T2、T3期和T4期相差不大。

在決定結(jié)腸癌預(yù)后的眾多因素中，淋巴轉(zhuǎn)移是其中重要的一個因素。早期結(jié)腸癌患者往往無癥狀或癥狀不明顯，易被忽視。手術(shù)干預(yù)作為現(xiàn)今治療結(jié)腸癌的主要手段，其術(shù)前評估的準確率、手術(shù)方案的符合率一直是臨床工作者關(guān)注的重心。由于多層螺旋CT等技術(shù)的發(fā)展，對結(jié)腸癌術(shù)前評估已有了極大的提高，特別是在腫瘤浸潤、遠處轉(zhuǎn)移上的準確率已得到廣泛認可，但其對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的判斷上卻有一定的局限性[2-3]。SASAHIRA等[4]研究發(fā)現(xiàn)，TrkB的陽性表達與口腔鱗狀細胞癌的淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)。趙梅莘等[5]通過對術(shù)前胃鏡下胃癌活檢組織標本的檢測發(fā)現(xiàn)，TrkB的免疫組織化學(xué)表達與胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。PATANI等[6]發(fā)現(xiàn)，BDNF陽性表達與乳腺癌的淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)。本研究選取結(jié)直腸癌術(shù)前標本，通過免疫組織化學(xué)的方法檢測TrkB和BDNF的表達，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，有淋巴轉(zhuǎn)移的TrkB和BDNF陽性表達率明顯高于無淋巴轉(zhuǎn)移，且臨床分期越晚，TrkB和BDNF陽性表達率越高，提示TrkB和BDNF的表達與結(jié)直腸癌的淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)。

SASAHIRA等[7]發(fā)現(xiàn)，VEGF-A和VEGF-C能顯著誘導(dǎo)微血管和淋巴管的生成，從而促進腫瘤的進展和淋巴轉(zhuǎn)移。YU等[8]的研究結(jié)果顯示，TrkB可能促進了新生淋巴管形成。有研究發(fā)現(xiàn)，BDNF與TrkB結(jié)合后，通過誘導(dǎo)VEGF-A和VEGF-C的表達升高，從而導(dǎo)致血管和淋巴管生成增加，促進了腫瘤的侵襲及淋巴轉(zhuǎn)移[9-11]。郭大偉等[1]發(fā)現(xiàn)，在晚期原發(fā)性肝癌中BDNF與TrkB的表達較高，與臨床病理分期呈正相關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，術(shù)前結(jié)腸鏡下結(jié)直腸癌活檢組織中BDNF與TrkB 的表達呈正相關(guān)（r=0.389，P=0.002），提示 BDNF與TrkB可能通過自分泌途徑，誘導(dǎo)新生血管和淋巴管生成增加，促進腫瘤的侵襲和淋巴轉(zhuǎn)移。

綜上所述，聯(lián)合檢測術(shù)前結(jié)直腸癌患者的結(jié)腸鏡病檢標本TrkB和BDNF表達，有利于判斷結(jié)直腸癌的臨床分期及淋巴轉(zhuǎn)移，為病情的評估、治療方案的擬定提供客觀依據(jù)。

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