楊先富，徐文靜，簡(jiǎn)衛(wèi)光，石松，冉懋雄，屠國(guó)麗，羅琳棟，喻懋國(guó)

(1.貴州景誠(chéng)制藥有限公司，貴州　貴陽(yáng)　550200；2.貴州省中醫(yī)藥研究院 中藥研究所，貴州　貴陽(yáng) 550002)

丹參為常用中藥材，具有活血祛瘀、通經(jīng)止痛，清心除煩等功能[1]，臨床主要用于冠心病、心絞痛等心血管疾病，具有良好的療效[2]?，F(xiàn)代研究表明[3]，丹參根中含有的丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮I及丹酚酸 B 等成分是其主要藥效成分。目前許多治療心血管疾病的中藥配伍和中成藥，丹參都是主要成分之一，特別是貴州景誠(chéng)制藥有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的主打產(chǎn)品“心腦寧膠囊”[國(guó)藥準(zhǔn)字Z20025697]，其方源于貴州苗族驗(yàn)方，經(jīng)多年研究整理，并結(jié)合現(xiàn)代制劑工藝精制而成。具有活血行氣，通絡(luò)止痛的功效，用于氣滯血瘀的胸痹，頭痛，眩暈，癥見(jiàn)胸悶刺痛，心悸不寧，頭昏目眩；冠心病、腦動(dòng)脈硬化見(jiàn)上述證候者[4-5]。臨床應(yīng)用中有文獻(xiàn)報(bào)道，心腦寧膠囊對(duì)冠心病穩(wěn)定性心絞痛具有良好的治療作用[4]，可以提高腦血流量，增加腦部供血，顯著改善腦供血不足癥狀[5]。隨著心腦寧膠囊的市場(chǎng)需求量不斷擴(kuò)大，因此丹參的需求量隨之增大。為了提升丹參的質(zhì)量、保障丹參的供給；為了丹參藥材規(guī)范化種植和質(zhì)量控制技術(shù)的研究，本公司在貴州修文建立丹參生產(chǎn)基地，對(duì)丹參開展了系統(tǒng)的研究。

1　材料、儀器與試劑

1.1 材料

所用丹參材料源于 2014年 3月初，從山東莒縣引種苗進(jìn)行栽培，并對(duì)引種丹參藥材樣品經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院何順志教授鑒定為唇形科植物丹參SalviamiltiorrhizaBge.的根及根莖。貴州引種丹參基地位于貴州省修文縣六屯鎮(zhèn)都堡村，試驗(yàn)地土壤為黃壤土，肥力中等，為新開墾的山地。種植密度為行株距[6]：25 cm×20 cm，基肥于移栽前分小區(qū)一次性施入土壤，2014年3月下旬移栽，栽后覆蓋薄膜，開春破膜引苗，人工除草，施西洋復(fù)合肥及農(nóng)家肥(牛糞)。

1.2 儀器與試劑

高效液相色譜儀：島津LC-2040C；電子天平：AB104-N；優(yōu)普超純水器：UPT-I-20T；HS-10260超聲儀；色譜柱：島津WondaSil?C18 Superb 4.6×250 mm，5μm S/N 6D3703-02；色譜乙腈(美國(guó)天地，批號(hào)AS-1122-001-16050577)；甲醇(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)10014118)；95%乙醇(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)10009164)；丹參酮ⅡA對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所110766-200518)；丹酚酸B對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所111562-201514)。

2　方法

從2014年4月起，每月中旬隨機(jī)取樣1次，每次取10株，置通風(fēng)處曬干或陰干，按照2010年版《中華人民共和國(guó)藥典》(以下簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》)第二增補(bǔ)本丹參項(xiàng)下的測(cè)定方法分別檢測(cè)樣品中浸出物、丹參酮類、丹酚酸B的含量。

3　實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1 浸出物

照《中華人民共和國(guó)藥典》附錄X A浸出物測(cè)定法水溶性浸出物測(cè)定項(xiàng)下的冷浸法測(cè)定及醇溶性浸出物(用乙醇作溶劑)測(cè)定法項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定。經(jīng)檢測(cè)，不同采收時(shí)間所采集的丹參藥材樣品的浸出物檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1，圖1、2。

表1　修文基地種植丹參藥材指標(biāo)成分(浸出物)積累動(dòng)態(tài)考察結(jié)果

圖1　丹參不同生長(zhǎng)期醇溶性浸出物積累折線圖

圖2　丹參不同生長(zhǎng)期水溶性浸出物積累折線圖

丹參藥材浸出物結(jié)果分析：從表1及圖1～2丹參醇溶性浸出物在4～9月份起伏不定，有增有降，9～10月為第二增長(zhǎng)高峰，10月份其醇溶性浸出物達(dá)到最高，10～12月保持穩(wěn)定，基本無(wú)大的變化，12月后醇溶性浸出物有所下降，但降幅不大。水溶性浸出物在4～7月呈上漲趨勢(shì)，在8月有一次下降點(diǎn)，然后持續(xù)增長(zhǎng)，到10月其水溶性浸出物達(dá)到最高，后期略有降低。

3.2 含量測(cè)定

丹參酮類、丹酚酸B按照《中國(guó)藥典》2010年版第二增補(bǔ)本丹參含量檢測(cè)方法進(jìn)行[1]。丹參藥材丹參酮類及丹酚酸B含量檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2，圖3、4、5、6。

表2　修文基地種植丹參藥材指標(biāo)成分(丹參酮類、丹酚酸B含量)積累動(dòng)態(tài)考察結(jié)果

圖3　丹參不同生長(zhǎng)期隱丹參酮積累折線圖

圖4　丹參不同生長(zhǎng)期丹參酮I積累折線圖

圖5　丹參不同生長(zhǎng)期丹參酮IIA積累折線圖

圖6　丹參不同生長(zhǎng)期丹酚酸B積累折線圖

丹參藥材含量測(cè)定結(jié)果分析：從表2及圖3～6的結(jié)果表明：不同生長(zhǎng)期丹參藥材中含量有所變化：(1)丹參酮類含量在4月中旬至5月上中旬開始逐漸降低，達(dá)到整個(gè)生長(zhǎng)周期的最低點(diǎn)，6月開始丹參酮類含量開始升高，到11月達(dá)到整個(gè)生長(zhǎng)周期的最高點(diǎn)，隨后到次年3月丹參酮類含量呈緩慢下降趨勢(shì)。另外由于丹參酮類是由隱丹參酮、丹參酮I、丹參酮IIA三種有效成分的含量組成，這三種不同成分在丹參的整個(gè)生長(zhǎng)周期也有所不同，其表現(xiàn)為：丹參酮I和丹參酮IIA的含量在4月中旬至5月上中旬開始逐漸降低，達(dá)到整個(gè)生長(zhǎng)周期的最低點(diǎn)，6月開始丹參酮I和丹參酮IIA的含量開始升高，到11月達(dá)到整個(gè)生長(zhǎng)周期的最高點(diǎn)，隨后到次年3月丹參酮I和丹參酮IIA的含量呈下降趨勢(shì)。隱丹參酮的含量在整個(gè)生長(zhǎng)期有兩個(gè)增長(zhǎng)階段，在4月中旬至5月上中旬開始逐漸降低，達(dá)到整個(gè)生長(zhǎng)周期的最低點(diǎn)，之后隱丹參酮含量開始升高，在8月有一次含量下降過(guò)程，隨后隨后進(jìn)入第二個(gè)含量增長(zhǎng)階段，10月、11月含量達(dá)到最高點(diǎn)，與7月含量基本相同，之后到次年3月丹參酮類含量呈緩慢下降趨勢(shì)。(2)丹酚酸B含量在整個(gè)生長(zhǎng)期有兩個(gè)增長(zhǎng)階段，4月丹酚酸B含量最低，之后到7月其含量逐漸增長(zhǎng)，在8月有一次含量下降過(guò)程，隨后進(jìn)入第二個(gè)含量增長(zhǎng)階段，10月丹酚酸B含量達(dá)到整個(gè)生長(zhǎng)周期的最高點(diǎn)，之后到次年3月丹參酮類含量呈緩慢下降趨勢(shì)。

4　結(jié)論與討論

綜合上述研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)貴州修文縣從山東莒縣引種栽培的丹參在10～11月整體質(zhì)量最好；其含量指標(biāo)和浸出物指標(biāo)均高于《中國(guó)藥典》2010版第二增補(bǔ)本標(biāo)準(zhǔn)要求。不論是從丹參酮類、丹酚酸B含量角度考慮，還是從浸出物角度考慮丹參的檢測(cè)數(shù)據(jù)都在10～11月份為最佳。根據(jù)浸出物和含量?jī)纱笠蛩匮芯繑?shù)據(jù)結(jié)果，結(jié)合傳統(tǒng)習(xí)慣，確定貴州省修文縣引種種植丹參基地的丹參合理采收期為10～11月。

本實(shí)驗(yàn)研究初步確定了從山東莒縣引種過(guò)來(lái)丹參適合貴州修文地區(qū)栽培，但對(duì)于貴州引種丹參的質(zhì)量評(píng)價(jià)還需按照《中國(guó)藥典》進(jìn)行多次重復(fù)試驗(yàn)研究和全面評(píng)價(jià)，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行丹參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升，以更好保證丹參藥材的質(zhì)量，建好我公司拳頭產(chǎn)品“心腦寧膠囊”的第一車間。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：第二增補(bǔ)本[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：90-91.

[2]辛淑杰.丹參的藥理作用及臨床應(yīng)用探討[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2013,22(5):26-27.

[3]豐成相.丹參的化學(xué)成分及藥理作用概況[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2012,21(2):25-26.

[4]邢湘君.心腦寧治療冠心病穩(wěn)定型心絞痛療效觀察[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，12(8)：20-21.

[5]雷晉.心腦寧膠囊治療氣滯血瘀型慢性腦供血不足的療效觀察[J].中醫(yī)中藥，2012，10(9)：105-106.

[6]唐慧驥.育苗移栽、密度及摘花對(duì)丹參(SalviamiltiorrhizaBunge)產(chǎn)量及有效成分積累影響的研究[D].鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007:26-32.