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        基于巴克夏和杜洛克豬選育豬肉風(fēng)味物質(zhì)的HS/SPME—GC/MS對(duì)比分析

        2018-04-03 05:16:34劉詩瑤徐宏鄧杰王國澤龔建軍李翔
        肉類研究 2018年1期
        關(guān)鍵詞:固相微萃取氣相色譜質(zhì)譜法

        劉詩瑤 徐宏 鄧杰 王國澤 龔建軍 李翔

        摘 要:通過對(duì)以巴克夏和杜洛克豬為父本選育的豬肉中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)進(jìn)行研究,了解不同品種豬肉之間揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的差異,通過對(duì)豬肉中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的評(píng)價(jià)為選育優(yōu)質(zhì)豬種提供參考。采用頂空固相萃取提取豬肉的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),并用氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)風(fēng)味物質(zhì),應(yīng)用Origin 8.0軟件和Xcalibur軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,對(duì)比豬肉中風(fēng)味物質(zhì)的含量差異及穩(wěn)定性。結(jié)果表明:DLY系豬肉樣品中共檢測(cè)出38 種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),其中醛類13 種、呋喃類1 種、醇類6 種、酮類3 種、含硫化合物1 種、酸類14 種,DLY933豬肉樣品中的正己醛相對(duì)含量最高,達(dá)45.895%;SH451系豬肉樣品中共檢測(cè)出50 種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),其中醛類25 種、呋喃類1 種、醇類9 種、酮類2 種、含硫化合物1 種、酸類11 種,SH451-2豬肉樣品中的正己醛相對(duì)含量最高,達(dá)75.986%;DLY和SH451系豬肉樣品共有的風(fēng)味物質(zhì)占15 種,SH451系豬肉樣品的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)種類多于DLY系豬肉;SH451系豬肉樣品的醛類物質(zhì)平均相對(duì)含量為74.68%,顯著高于DLY系豬肉的57.47%,但DLY系豬肉樣品的含硫化合物含量高于SH451系豬肉,2 個(gè)豬種的風(fēng)味各有特點(diǎn)。

        關(guān)鍵詞:杜洛克豬;巴克夏豬;風(fēng)味物質(zhì);固相微萃取;氣相色譜-質(zhì)譜法

        Comparative Analysis of Volatile Pork Flavor Compounds of Crossbred Pigs Sired by Berkshire and Duroc Using Headspace Solid-Phase Microextraction Combined with Gas Chromatography-Mass Spectrometry

        LIU Shiyao1, XU Hong1, DENG Jie1, WANG Guoze1, GONG Jianjun2, LI Xiang1,*

        (1.Meat-Processing Key Laboratory of Sichuan, Chengdu 610106, China;

        2.Sichuan Animal Science Academy, Chengdu 610066, China)

        Abstract: In this study, we conducted a comparative analysis of the volatile flavor compounds of meat from two crossbreeds (DLY and SH451) from Berkshire and Duroc boars, respectively in order to provide a basis for breeding improved pig breeds. The volatile compounds were extracted by headspace solid-phase microextraction (HS-SPME) and detected by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The experimental data obtained were comparatively analyzed using Origin 8.0

        and Xcalibur software. We identified a total of 38 volatile compounds in DLY pig meat including 13 aldehydes, 1 furan, 6 alcohols, 3 ketones, 1 sulfide-containing compound and 14 acids, with n-hexanal being the most abundant compound (45.895%). A total of 50 volatile compounds were detected in SH451 pig meat including 25 aldehydes, 1 furan, 9 alcohols,

        2 ketones, 1 sulfide-containing compound and 11 acids. The major volatile compound in SH451 pork was similarly n-hexanal (up to 75.986%). Fifteen compounds were common to both meat samples, a larger proportion of which was detected in SH451 pork than in DLY pig meat. The average aldehyde content in SH451 pork was 74.68%, which was significantly higher than that in DLY pork (57.47%), while the former contained a lower amount of sulfide-containing compound.

        Keywords: Duroc; Berkshire; flavor compounds; headspace solid-phase microextraction; gas chromatography-mass spectrometry

        DOI:10.7506/rlyj1001-8123-201801009

        中圖分類號(hào):TS251.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1001-8123(2018)01-0052-06

        引文格式:

        劉詩瑤, 徐宏, 鄧杰, 等. 基于巴克夏和杜洛克豬選育豬肉風(fēng)味物質(zhì)的HS/SPME-GC/MS對(duì)比分析[J]. 肉類研究, 2018, 32(1): 52-57. DOI:10.7506/rlyj1001-8123-201801009. http://www.rlyj.pub

        LIU Shiyao, XU Hong, DENG Jie, et al. Comparative analysis of volatile pork flavor compounds of crossbred pigs sired by berkshire and duroc using headspace solid-phase microextraction combined with gas chromatography-mass spectrometry[J]. Meat Research, 2018, 32(1): 52-57. DOI:10.7506/rlyj1001-8123-201801009. http://www.rlyj.pub

        四川是畜牧業(yè)大省,其畜牧業(yè)產(chǎn)值已占到農(nóng)業(yè)總產(chǎn)值的50%以上,全省年出欄生豬近9 000 萬頭,產(chǎn)業(yè)帶來的直接經(jīng)濟(jì)效益已達(dá)1 500 億元以上,間接效益達(dá)2 000 億元以上,生豬產(chǎn)業(yè)已成為四川省的特色支柱產(chǎn)業(yè)[1]。

        注重肉品的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)、安全衛(wèi)生及其風(fēng)味特性是現(xiàn)代畜牧業(yè)及肉制品的發(fā)展方向。巴克夏(Berkshire)豬是1770年前后英國引進(jìn)中國豬和暹羅豬,與當(dāng)?shù)刎i雜交所得豬種,巴克夏豬對(duì)生存環(huán)境的適應(yīng)能力很強(qiáng),且生長(zhǎng)快、易催肥,缺點(diǎn)是產(chǎn)仔數(shù)低、酮體含脂肪較多,是不可多得的黑毛終端父本[2]。杜洛克(Duroc)豬產(chǎn)于美國,瘦肉率高、料肉比低、生長(zhǎng)快、屠宰率高、瘦肉顏色好、肢體健壯,公豬配種比較積極,是目前世界上享譽(yù)盛名的優(yōu)良豬種之一,缺點(diǎn)是豬的母性較弱,常被用作終端父本[3-5]。上述2 個(gè)豬種都有各自的缺陷,不能很好地滿足本地市場(chǎng)需求,因此將其與四川本地豬種雜交后選育出新品種,以期能夠?qū)⒏鱾€(gè)豬種的優(yōu)點(diǎn)相結(jié)合,培育出飼養(yǎng)時(shí)間短、肥瘦適中、品質(zhì)和風(fēng)味良好的豬種。

        對(duì)肉質(zhì)進(jìn)行評(píng)定通過測(cè)定反映肉質(zhì)特性的相關(guān)指標(biāo)(如糖原酵解潛力、肉色評(píng)分、系水力、大理石紋評(píng)分、嫩度評(píng)分和嫩度值等)來實(shí)現(xiàn),再與感官評(píng)定小組最后的綜合評(píng)分相比較[6]。研究豬肉的風(fēng)味物質(zhì)對(duì)豬種選育及肉制品加工和貯藏具有重要指導(dǎo)意義[7],國內(nèi)外通過研究得出的豬肉風(fēng)味物質(zhì)大約有1 000多種[8],采用風(fēng)味物質(zhì)對(duì)比分析基于巴克夏和杜洛克豬選育豬肉風(fēng)味品質(zhì)的研究還不多見。本研究以巴克夏(DLY)和杜洛克(SH451)豬與川藏黑豬配種選育的2 種豬肉為對(duì)照組,通過頂空-固相微萃?。╤eadspace/solid-phase microextraction,HS/SPME)提取,并采用氣相色譜-質(zhì)譜(gas chromatography-mass spectrometry,GC/MS)法檢測(cè)選育的DLY系和SH451系2 種豬肉的風(fēng)味物質(zhì),對(duì)比其風(fēng)味物質(zhì)構(gòu)成及穩(wěn)定性,從豬肉風(fēng)味物質(zhì)組成角度為豬種選育提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        DLY系是川藏黑豬配套系的一個(gè)專門化父系,由巴克夏豬直接選育而成;SH451系也是川藏黑豬配套系的一個(gè)專門化父系,由杜洛克豬直接選育而成。DLY和SH451 2 種豬均由四川省畜牧科學(xué)研究院的遂寧市繁育場(chǎng)提供,飼養(yǎng)環(huán)境和飼料均相同,6 月齡,體質(zhì)量90 kg。DLY系和SH451系各6 頭,編號(hào)分別為DLY916、DLY933、DLY975、DLY953、DLY977、DLY985和SH451-1、SH451-2、SH451-6、SH451-7、SH451-9、SH451-11。

        當(dāng)天屠宰后取豬的背最長(zhǎng)?。∪馍珴甚r紅、有光澤,脂肪呈乳白色,外表微干或微浸潤(rùn),不黏手,無異味和臭味),及時(shí)送回實(shí)驗(yàn)室,4 ℃冷藏備用[9-10]。

        1.2 儀器與設(shè)備

        SPME進(jìn)樣器、75 μm碳分子篩/聚二甲基硅氧烷(carboxen/polydimethylsiloxane,CAR/PDMS)纖維 美國Supelco公司;GC-MS儀 美國Aligent公司。

        1.3 方法

        1.3.1 豬肉預(yù)處理

        將豬肉樣品常溫解凍,去掉表面結(jié)締組織、筋膜及可見脂肪,用消毒后的刀剖開,切取中部未暴露的肉5 g,裝入潔凈小型試劑瓶,密封,0~4 ℃低溫保藏,待測(cè)。

        1.3.2 豬肉揮發(fā)性成分提取

        取5 g豬肉樣品于樣品瓶中密封,80 ℃水浴平衡40 min,萃取前將SPME纖維在GC-MS儀進(jìn)樣口老化,將老化好的SPME纖維插入樣品瓶頂空萃取氣體15 min,在GC-MS儀進(jìn)樣[11-13]。

        1.3.3 GC-MS分析

        GC條件:INNOWax色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);初始溫度50 ℃,保持5 min,以20 ℃/min升至210 ℃,保持5 min,再以5 ℃/min升至270 ℃,保持

        5 min[14-16];進(jìn)樣口溫度260 ℃[17];載氣N2,流速l mL/min[18-19]。

        MS條件:電子轟擊(electron ionization,EI)離子源,電子能量70 eV,離子源溫度230 ℃[20-21],接口溫度250 ℃,燈絲電流150 A,質(zhì)量掃描范圍20~450 u[22-23]。

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        應(yīng)用Origin 8.0軟件和Xcalibur軟件對(duì)樣品總離子流色譜圖及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比分析,在NIST譜庫結(jié)合人工譜圖檢索并匹配、確定分離所得化合物,篩選出相似度較大的風(fēng)味物質(zhì),采用峰面積歸一化法計(jì)算各風(fēng)味化合物的相對(duì)含量。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 DLY系豬肉

        2.1.1 DLY系豬肉主要風(fēng)味物質(zhì)的總離子流色譜圖

        DLY系列6 個(gè)豬肉樣品的HS/SPME-GC/MS總離子流色譜圖如圖1所示,應(yīng)用Origin 8.0軟件對(duì)6 個(gè)豬肉樣品的總離子流色譜圖進(jìn)行擬合對(duì)比,圖譜如圖2所示。

        2.1.2 DLY系豬肉的風(fēng)味物質(zhì)分析

        6 個(gè)DLY系豬肉樣品中共檢測(cè)出38 種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)由Xcalibur軟件系統(tǒng)處理,未知化合物經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索,同時(shí)與NIST譜庫相匹配,確定出17 種物質(zhì)。由表1可知,6 個(gè)豬肉樣品中的風(fēng)味物質(zhì)包括醛類、呋喃類、醇類、酸類物質(zhì)及含硫化合物等。DLY916、DLY933、DLY975、DLY953、DLY977和DLY985豬肉分別含17、17、16、15、16、16 種風(fēng)味物質(zhì),其中正己醛的相對(duì)含量均最高,分別達(dá)33.224%、45.895%、40.809%、39.241%、32.670%和35.650%。

        由圖3及表2可知,6 個(gè)DLY系豬肉樣品中風(fēng)味物質(zhì)變化圖的波形十分相似,表明DLY系選育豬種的風(fēng)味物質(zhì)較為穩(wěn)定。6 個(gè)豬肉樣品中醛類物質(zhì)的含量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他物質(zhì),是風(fēng)味物質(zhì)的最主要成分,其次為酸類物質(zhì),其含量略高于醇類物質(zhì),呋喃類物質(zhì)和含硫化合物的含量接近。DLY933樣品中醛類物質(zhì)的總含量高達(dá)70.25%,6 個(gè)豬肉樣品中醛類物質(zhì)的平均相對(duì)含量為57.47%。DLY977和DLY985樣品中酸類物質(zhì)含量較高,其中DLY977樣品中的相對(duì)含量為19.72%。每個(gè)樣品所得數(shù)據(jù)與均值之間的偏離程度較小,說明選育的品種較為穩(wěn)定。

        2.2 SH451系豬肉

        2.2.1 SH451系豬肉主要風(fēng)味物質(zhì)的總離子流色譜圖

        SH451系列6 個(gè)豬肉樣品的HS/SPME-GC-MS總離子流色譜圖如圖4所示,應(yīng)用Origin 8.0軟件對(duì)6 個(gè)豬肉樣品的總離子流色譜圖進(jìn)行擬合對(duì)比,圖譜如圖5所示。

        2.2.2 SH451系豬肉的風(fēng)味物質(zhì)分析

        SH-451系6 個(gè)豬肉樣品中共檢測(cè)出50 種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),經(jīng)NIST譜庫結(jié)合人工譜圖檢索并匹配,確定出21 種物質(zhì)。由表3可知,6 個(gè)豬肉樣品中均含有醛類、呋喃類、醇類、酸類和酮類物質(zhì)。SH451-1、SH451-2、SH451-6、SH451-7、SH451-9和SH451-11豬肉中分別檢出16、16、20、19、20、18 種風(fēng)味物質(zhì),其中正己醛的相對(duì)含量均最高,分別達(dá)27.508%、75.986%、44.424%、70.266%、54.318%和54.081%。

        由圖6及表4可知,6 個(gè)SH451系豬肉樣品中風(fēng)味物質(zhì)變化圖的波形十分相似,表明SH451系選育豬種的風(fēng)味物質(zhì)也較為穩(wěn)定。6 個(gè)豬肉樣品中醛類物質(zhì)的相對(duì)含量均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他物質(zhì),是風(fēng)味物質(zhì)的最主要成分,SH451-2樣品中醛類物質(zhì)的相對(duì)含量高達(dá)86.00%;SH451-2樣品中呋喃類物質(zhì)的相對(duì)含量達(dá)5.47%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他幾個(gè)樣品;SH451-1樣品中醇類物質(zhì)的相對(duì)含量達(dá)14.30%,略高于其他幾個(gè)樣品,其所含酸類物質(zhì)的相對(duì)含量達(dá)12.60%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他樣品。

        2.3 DLY系與SH451系選育豬種的風(fēng)味物質(zhì)對(duì)比

        DLY系豬肉樣品中共檢測(cè)出38 種風(fēng)味物質(zhì),其中醛類13 種、呋喃類1 種、醇類6 種、酮類3 種、含硫化合物1 種、酸類14 種,經(jīng)NIST譜庫結(jié)合人工譜圖檢索并匹配,確定出17 種物質(zhì)。SH451系豬肉樣品中共檢測(cè)出50 種風(fēng)味物質(zhì),其中醛類25 種、呋喃類1 種、醇類9 種、酮類2 種、含硫化物1 種、酸類11 種,經(jīng)NIST譜庫結(jié)合人工譜圖檢索并匹配,確定出21 種物質(zhì)。DLY和SH451系豬肉樣品共有的風(fēng)味物質(zhì)占15 種,分別為正己醛、正庚醛、2-正戊基呋喃、正戊醇、正辛醇、反式-2-庚烯醛、正壬醛、反式-2-辛烯醛、1-辛烯-3-醇、苯甲醛、正辛醇、正戊酸、正己酸、正辛酸和棕櫚酸。

        由圖7和表2、4可知,SH451系豬肉樣品的醛類物質(zhì)平均相對(duì)含量為74.68%,顯著高于DLY系豬肉的57.47%,但DLY系豬肉樣品的含硫化合物含量高于SH451系豬肉,而醛類物質(zhì)和含硫化合物都是對(duì)豬肉風(fēng)味貢獻(xiàn)較大的物質(zhì),說明2 個(gè)豬種的風(fēng)味各有特點(diǎn)。

        3 結(jié) 論

        本研究通過HS/SPME技術(shù)提取基于巴克夏(DLY)和杜洛克(SH451)豬選育豬肉的風(fēng)味物質(zhì),并通過GC-MS進(jìn)行分離和分析。DLY系豬肉樣品中共檢測(cè)出38 種風(fēng)味物質(zhì),SH451系共檢測(cè)出50 種風(fēng)味物質(zhì),杜洛克豬選育的SH451系豬肉的風(fēng)味物質(zhì)種類明顯多于巴克夏豬選育的DLY系豬肉。2 個(gè)豬種共有的風(fēng)味物質(zhì)占15 種,其中醛類物質(zhì)含量最高,而且以正己醛含量最高;SH451系豬肉中的醛類物質(zhì)平均相對(duì)含量為74.68%,顯著高于DLY系豬肉的57.47%,其中SH451-2樣品的正己醛相對(duì)含量最高,達(dá)75.986%;但DLY系豬肉的含硫化合物含量高于SH451系豬肉,正己醛和含硫化合物都是對(duì)豬肉風(fēng)味貢獻(xiàn)較大的物質(zhì),說明2 個(gè)豬種的風(fēng)味各有特點(diǎn)。通過計(jì)算所測(cè)數(shù)據(jù)的方差,發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)偏離度較小,結(jié)合GC-MS譜圖相似度,說明選育的品種穩(wěn)定性較好。

        本研究對(duì)不同品種選育豬肉中的風(fēng)味物質(zhì)及風(fēng)味穩(wěn)定性進(jìn)行研究,對(duì)比不同選育種類豬肉之間的風(fēng)味差異,更好地完善了豬肉風(fēng)味的評(píng)價(jià)指標(biāo),為滿足消費(fèi)者對(duì)豬肉風(fēng)味和口感的需求、選育更優(yōu)質(zhì)豬種和選擇養(yǎng)殖方法提供參考。

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