譚銳泉　孫淑芬　彭力平　王立新

深圳市中醫(yī)院骨科（廣東深圳 518033）

膝骨關(guān)節(jié)炎（knee osteoarthritis，KOA）是好發(fā)于中老年女性的關(guān)節(jié)軟骨退變性疾病，常導(dǎo)致膝關(guān)節(jié)腫脹、畸形及功能受限，給家庭、社會(huì)帶來(lái)沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［1］。Wnt通路對(duì)軟骨代謝起調(diào)控作用［2］。硬化蛋白（sclerostin，SOST）通過(guò)抑制Wnt通路激活而抑制骨形成［3］。SOST在KOA患者軟骨下骨中的表達(dá)隨病變加重而降低［4］。泰國(guó)KOA患者血漿SOST濃度與其軟骨退變程度負(fù)相關(guān)［5］。文獻(xiàn)報(bào)道血液中的CTX?II、AGG1和AGG2水平可以反映軟骨損傷程度［6］。本研究擬綜合分析血漿SOST、CTX?II、AGG1和AGG2與KOA的關(guān)系，以探討其臨床意義。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象選擇2016年1月至2017年3月期間于深圳市中醫(yī)院就診的女性KOA患者95例為試驗(yàn)組，同期選擇參加健康體檢的95例女性作對(duì)照。納入研究的KOA患者符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。符合以下任意1條排除試驗(yàn)：（1）患有硬化性骨化病、Van Buchem病、強(qiáng)直性脊柱炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、化膿性性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎、骨折、骨壞死等；（2）合并心血管、肝、腎、消化系統(tǒng)、造血系統(tǒng)等內(nèi)科疾病及精神病患者。

1.2臨床數(shù)據(jù)收集記錄年齡、身高、體質(zhì)量、體質(zhì)指數(shù)（body mass index，BMI）；KOA根據(jù)KL法進(jìn)行分級(jí)［10］。受試者于清晨空腹抽取肘靜脈血，ELISA法檢測(cè)血漿 SOST、CTX?II和 AGG1、AGG2濃度。SOST和CTX?II試劑盒購(gòu)于武漢華美生物，檢測(cè)低限分別為31.25 pg/mL和0.312 ng/mL；AGG1和AGG2試劑盒購(gòu)于北京北歐生物，檢測(cè)低限分別為34.6和0.24 ng/mL。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，正態(tài)分布數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)（四分位數(shù)）表示。兩組間比較采用Wilcoxon非參數(shù)檢驗(yàn)，Pearson法進(jìn)行相關(guān)分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組受試者的臨床資料95例KOA患者平均病程9（3～14）年，試驗(yàn)組與對(duì)照組年齡、BMI之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。試驗(yàn)組血漿SOST濃度低于對(duì)照組（P＜ 0.001）。試驗(yàn)組血漿CTX?II、AGG1及AGG2濃度高于對(duì)照組（P＜0.01）。見(jiàn)表1。

表1　兩組一般臨床資料況比較Tab.1　Characteristics of knee osteoarthritis patients and controls ±s

表1　兩組一般臨床資料況比較Tab.1　Characteristics of knee osteoarthritis patients and controls ±s

變量例數(shù)年齡（歲）BMI（kg/m2）SOST（pg/mL）CTX?II（ng/mL）AGG1（ng/mL）AGG2（ng/mL）試驗(yàn)組95 66.5±4.5 28.8±6.0 828.1±314.9 12.6±7.4 23.9±18.5 7.1（1.9 ～ 13.9）對(duì)照組95 65.9±4.0 27.5±6.3 1210.5±291.6 8.7±3.1 12.1±9.4 3.5（0.8 ～ 6.7）P值–0.640 0.852＜0.001 0.009＜0.001 0.002

2.2KOA患者的血漿SOST濃度比較KL 2、3、4級(jí)分別有25、28、42例，血漿SOST濃度分別為（1179.9± 231.7）、（922.0 ± 164.0）、（556.0 ± 144.6）pg/mL，說(shuō)明KL分級(jí)越高，SOST濃度越低（P＜0.001）。

2.3血漿SOST濃度及軟骨基質(zhì)降解標(biāo)記物的相關(guān)分析Pearson分析顯示試驗(yàn)組血漿SOST濃度與CTX?II負(fù)相關(guān)（圖1），與AGG1（圖2）、AGG2（圖3）呈負(fù)相關(guān)。

2.4血漿SOST濃度與KL分級(jí)的相關(guān)分析試驗(yàn)組血漿SOST濃度與KL分級(jí)呈負(fù)相關(guān)（圖4）。

3　討論

隨著社會(huì)老年化的發(fā)生以及肥胖人群的增多，KOA的發(fā)病率逐年上升［1］，這必將會(huì)給患者家庭以及社會(huì)醫(yī)療支出帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)。在體液中尋找能反映KOA患者病變嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物一直是研究的熱點(diǎn)［7-8］。本研究發(fā)現(xiàn)KOA患者的血漿SOST濃度要明顯低于對(duì)照組，且隨著KL等級(jí)的增加，SOST濃度會(huì)明顯減少。Wnt信號(hào)通路在調(diào)節(jié)軟骨代謝和KOA發(fā)病方面起到重要作用［2］。VELASCO等［9］發(fā)現(xiàn)KOA患者的Wnt通路關(guān)鍵蛋白AXIN2表達(dá)高于骨折患者，說(shuō)明Wnt通路與KOA有關(guān)。而SOST通過(guò)結(jié)合LRP5/6受體來(lái)抑制Wnt/β?catenin 通路激活和骨形成［10］。BOUAZIZ等［11］發(fā)現(xiàn)敲除SOST基因的大鼠出現(xiàn)嚴(yán)重的KOA，蛋白聚糖酶和X型膠原的表達(dá)也會(huì)增加，證明缺乏SOST會(huì)加速KOA進(jìn)展?？梢酝茰y(cè)SOST對(duì)關(guān)節(jié)軟骨可能具有保護(hù)作用。與本研究結(jié)果一致，在臨床上有助于判斷KOA病情以及評(píng)價(jià)有效藥物的治療靶點(diǎn)。

圖1　KOA患者血漿SOST濃度與CTX?II相關(guān)Fig.1　Plasma SOST levels correlated with CTX?II in knee osteoarthritis patients

圖2　KOA患者血漿SOST濃度與AGG1相關(guān)Fig.2　Plasma SOST levels correlated with AGG1 in knee osteoarthritis patients

圖3　KOA患者血漿SOST濃度與AGG2相關(guān)Fig.3　Plasma SOST levels correlated with AGG2 in knee osteoarthritis patients

圖4　KOA患者KL分級(jí)與血漿SOST濃度的相關(guān)分析Fig.4　Plasma SOST levels correlated with disease severity in knee osteoarthritis patients

維持正常軟骨結(jié)構(gòu)與功能主要依賴(lài)于II型膠原蛋白與聚集蛋白聚糖的合成與降解處于動(dòng)態(tài)平衡。研究發(fā)現(xiàn)血液中Ⅱ型膠原蛋白的裂解產(chǎn)物CTX?II和聚集蛋白聚糖的降解標(biāo)志物AGG1和AGG2濃度隨著軟骨破壞加重而升高［6］。本研究發(fā)現(xiàn)KOA患者的血漿CTX?II、AGG1及AGG2濃度明顯高于對(duì)照組，KOA患者低水平的血漿SOST濃度與高水平的CTX?II濃度負(fù)相關(guān)，與高水平的AGG1和AGG2均呈負(fù)相關(guān)。

本研究證實(shí)了血漿SOST濃度隨著KOA患者病情加重而降低，且與軟骨破壞的標(biāo)志物CTX?II、AGG1和AGG2均呈負(fù)相關(guān)，而提高KOA患者血漿SOST濃度是否可以逆轉(zhuǎn)或延緩KOA的進(jìn)展呢？需要我們進(jìn)一步完善相關(guān)機(jī)制研究。本項(xiàng)研究不足在于只進(jìn)行了橫斷面研究，僅僅觀察到隨著KOA的病情進(jìn)展，血漿SOST濃度呈下降趨勢(shì)，無(wú)法確定兩者之間是否存在因果關(guān)系。進(jìn)一步探究SOST與KOA中軟骨退變的關(guān)系，可能有助于監(jiān)測(cè)疾病的進(jìn)展，評(píng)價(jià)病情的嚴(yán)重性及為治療提供新的思路。

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