瞿澤豐　馬洪　段曉峰　劉?！「攮?/p>

550004 貴陽， 貴州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科

口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)漸進(jìn)過程,表型的演變是以生物學(xué)事件和機(jī)制為基礎(chǔ)的逐漸演進(jìn)過程[1]。現(xiàn)已有研究報(bào)道S100A8在眾多惡性腫瘤中表達(dá)升高，近年來對S100蛋白家族有關(guān)于腫瘤的研究逐漸增多，但該蛋白與口腔鱗癌關(guān)系的研究卻鮮有報(bào)道。本文意在檢測口腔鱗癌中的S100A8的表達(dá)情況，結(jié)合臨床病例病理特點(diǎn)，探討S100A8蛋白在口腔鱗癌的意義。

1　資料與方法

1.1　組織標(biāo)本

收集2014～2016 年貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院口腔頜面外科病房、貴州省腫瘤醫(yī)院病人標(biāo)本共計(jì)65 例。均未行任何放化療處理的35 例鱗癌標(biāo)本及30 例正常組織標(biāo)本。

1.2　試劑及方法

1.2.1免疫組織化學(xué)染色行SP法將蠟塊以5 μm連續(xù)切片，實(shí)驗(yàn)均嚴(yán)格遵循SP免疫組化二抗試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)說明書進(jìn)行常規(guī)染色。S100A8一抗(Abcam公司)，PBS代替一抗作為空白對照組。

1.2.2免疫印跡法在組織中加入裂解液，離心后提取上清蛋白。蛋白濃度測定后取20 μg蛋白進(jìn)行檢測S100A8蛋白的表達(dá)。一抗兔抗人S100A8單抗(Abcam公司)、 內(nèi)參鼠抗人GADPH單抗及HRP標(biāo)記的羊抗兔、 抗鼠二抗(北京中杉金橋公司)，最后加入化學(xué)發(fā)光劑(Millipore)并于暗室用X膠片顯影定影。

1.3　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 22.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P<0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　果

2.1　免疫組化結(jié)果

S100A8陽性著色位于細(xì)胞核和細(xì)胞漿，偶見于細(xì)胞間質(zhì)，出現(xiàn)棕褐色或棕黃色顆粒為陽性見圖 1。免疫組化中OSCC組及正常組中的S100A8蛋白表達(dá)情況見下表 1。S100A8陽性表達(dá)與OSCC臨床病理的相關(guān)性見表 2。

2.2　Western blot 結(jié)果

口腔鱗癌組織中可見S100A8較正常組織中呈高表達(dá)狀態(tài)(圖 2)。N即為正常組織(Normal)，Ca為鱗癌組織(OSCC)。

圖 1S100A8蛋白質(zhì)表達(dá)情況 (AP,×200)

3　討　論

S100A8蛋白被認(rèn)為是與腫瘤發(fā)生發(fā)展緊密相關(guān)的因子[2]。本課題組于2011 年通過蛋白質(zhì)組學(xué)的方法建立OSCC與正?？谇唤M織中的差異蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)口腔鱗癌的組織中S1OOA8較正?？谇唤M織表達(dá)上調(diào)[3]。此次研究是繼上次研究的延續(xù)，發(fā)現(xiàn)S100A8的高表達(dá)與口腔鱗癌的分化狀態(tài)有較顯著的相關(guān)性，提示該蛋白有可能為判斷惡性程度提供重參考。

綜上所述， S100A8在口腔鱗狀細(xì)胞癌呈高表達(dá)，該現(xiàn)象為早期預(yù)防及基因水平的治療口腔鱗癌提供了重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

表 1　OSCC及正常組織中的S100A8的表達(dá)

表 2　S100A8在口腔鱗癌中的陽性表達(dá)與其臨床病理參數(shù)的相關(guān)性

圖 2Western blot 中S100A8蛋白的表達(dá)

[1]Dmitrenko AP. Lateral differences in Ki-67 in breast cancer[J]. Mol Clin Oncol, 2016, 4(6): 1041-1044.

[2]Shin JM, Chang IK, Lee YH, et al. Potential role of S100A8 in cutaneous squamous cell carcinoma differentiation[J]. Ann Dermatol, 2016, 28(2): 179-185.

[3]邱樂宏, 馬洪. 口腔鱗癌組織蛋白差異表達(dá)的蛋白組學(xué)測定[J]. 口腔醫(yī)學(xué), 2011, 31(8): 453-455.