陳道虎　劉輝

【摘要】目的 擴(kuò)張型心肌病（Dilated cardiomyopathy DCM）是心血管死亡的主要原因，大約50%的DCM患者沒(méi)有明顯的危險(xiǎn)因素，因此這種DCM被歸類為“特發(fā)性”（Idiopathic Dilated cardiomyopathy IDCM）。已發(fā)現(xiàn)超過(guò)50個(gè)基因的致病突變可引起特發(fā)性DCM。目的 檢測(cè)TRPM4突變與心肌病的關(guān)系。方法 61位特發(fā)性擴(kuò)張型心肌病患者的血液被收集并提取DNA，使用High Resolution Melting （HRM）分析進(jìn)行突變掃描，對(duì)發(fā)現(xiàn)的異常樣本進(jìn)行雙向測(cè)序。結(jié)果 發(fā)現(xiàn)1例變異，這個(gè)TRPM4基因突變通過(guò)線上工具SIFT，Polyphen2和Mutation taster的進(jìn)行鑒定，被認(rèn)為可能導(dǎo)致?lián)p害或病變。結(jié)論 TRPM4可能在特發(fā)性擴(kuò)張型心肌病中扮演重要角色。

【關(guān)鍵詞】TRPM4；突變；特發(fā)性擴(kuò)張型心肌病

【中圖分類號(hào)】R542.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】ISSN.2095-6681.2017.35..02

擴(kuò)張型心肌?。―ilated cardiomyopathy DCM）是心血管死亡的主要原因，這是由于心臟逐漸擴(kuò)大最終導(dǎo)致心力衰竭所致。DCM是非缺血性心力衰竭最常見(jiàn)的病因，占所有心力衰竭患者的30%-40%，是成人和兒童心臟移植的最常見(jiàn)原因，也是導(dǎo)致心臟猝死的主要原因[1]。在一部分患者中，DCM可能由于環(huán)境危險(xiǎn)因素而發(fā)生，如病毒性心肌炎，心肌毒素和自身免疫性疾病。然而，大約50%的DCM患者沒(méi)有明顯的危險(xiǎn)因素，因此這種DCM被歸類為“特發(fā)性”（Idiopathic Dilated cardiomyopathy IDCM）。在特發(fā)性DCM患者中，有25%～50%的病例有陽(yáng)性家族史，被稱為家族性DCM，沒(méi)有陽(yáng)性家族史被稱為則被散發(fā)性DCM?，F(xiàn)在，已發(fā)現(xiàn)超過(guò)50個(gè)基因的致病突變可引起特發(fā)性DCM。

瞬時(shí)受體電位melastatin蛋白4（transient receptor potential melastatin 4 TRPM4）屬于瞬時(shí)受體電位基因的大家族的成員，是一個(gè)鈣激活的非選擇性陽(yáng)離子通道。最近發(fā)現(xiàn)TRPM4突變可引起家族性進(jìn)行性心臟傳導(dǎo)阻滯，Brugada Syndrome和長(zhǎng)QT間期綜合征。由于編碼Na離子通道SCN5A的突變可以引起心臟傳導(dǎo)阻滯，Brugada Syndrome，長(zhǎng)QT間期綜合征和特發(fā)性DCM，我們?cè)?1個(gè)DCM患者中檢測(cè)了TRPM4基因，發(fā)現(xiàn)了1個(gè)突變。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

本課題患者為法國(guó)里昂市心血管醫(yī)院遺傳病門診收集的61例特發(fā)性DCM患者，其中男34例，占56%，女27例，占44%。年齡18～61歲，平均年齡（42.25±8.23）歲，診斷按照WHO 1980年特發(fā)性DCM診斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)照組根據(jù)EVS資料庫(kù)線上資料（http：//evs.gs.washington.edu/EVS/）。特發(fā)性DCM組經(jīng)超聲心動(dòng)圖測(cè)量左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF），并且經(jīng)過(guò)問(wèn)詢后確認(rèn)均為單發(fā)病例無(wú)家族史。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)并獲得所有患者或者患者家屬的知情同意。所有患者均抽取20～50 mL外周靜脈血。

1.2 遺傳學(xué)分析

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)程序提取DNA。使用High Resolution Melting （HRM）分析進(jìn)行突變掃描（Rotor-Gene Q Qiagen France），對(duì)發(fā)現(xiàn)的異常樣本進(jìn)行雙向測(cè)序。使用已發(fā)表的引物。

2 結(jié) 果

在61位特發(fā)性DCM患者中，我們發(fā)現(xiàn)一位51歲患者攜帶有TRPM4基因突變（c.2531G>R；p.Gly844Asp），見(jiàn)圖1，這個(gè)氨基酸在進(jìn)化過(guò)程中是保守的。見(jiàn)圖2，這個(gè)突變經(jīng)過(guò)線上工具Sift，MutationTaster，Polyphen2計(jì)算，認(rèn)定致病性突變。

3 討 論

雖然DCM的病理生理學(xué)眾所周知，其潛在的遺傳機(jī)制為這種疾病仍然不清楚，這是心肌病患者TRPM4基因功能分析的首例報(bào)道，我們介紹了心肌病的致病突變及其發(fā)病機(jī)制。我們的數(shù)據(jù)支持以前的發(fā)現(xiàn)，TRPM4基因可能與心肌病有關(guān)，在這項(xiàng)研究中，我們使用Sanger測(cè)序來(lái)鑒定DCM患者中TRPM4基因的致病性突變。TRPM4基因被認(rèn)為在心肌病中起重要作用。我們驗(yàn)證并確認(rèn)了在DCM患者組中存在TRPM4基因突變。我們測(cè)序了61名患者和DNA，在系統(tǒng)突變篩選之后我們鑒定了1個(gè)突變攜帶者。這個(gè)突變已經(jīng)被報(bào)道，功能研究被認(rèn)為是獲得性功能突變。這個(gè)TRPM4基因突變通過(guò)線上工具SIFT，PP2和Mutation taster的科學(xué)方法對(duì)突變進(jìn)行鑒定，被認(rèn)為可能導(dǎo)致?lián)p害或病變（c.2531G>R；p.Gly844Asp）。見(jiàn)圖1

3 結(jié) 論

這是首次在心肌病患者中描述TRPM4基因變異的研究。雖然本研究納入的心肌病患者數(shù)量相對(duì)較少，但我們?cè)赥RPM4基因的外顯子17中確定了1個(gè)突變。預(yù)測(cè)軟件表明這個(gè)變異可能具有潛在的損傷和疾病。我們的發(fā)現(xiàn)需要更大患者群體的驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)

[1] 高敏心肌肌鈣蛋白T在擴(kuò)張型心肌病患者中的臨床意義[J].國(guó)際心臟雜志2015；56（3）：309-13.

本文編輯：李 豆