蔡焱冬， 汪 嘉， 程欽全， 張 婕， 劉 妍， 張 蕾

（同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200072）

血液分析儀作為血液分析必不可少的儀器，可提供種類繁多的數(shù)據(jù)，并可快速、有效地運(yùn)用這些數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，在血液疾病的診斷、治療過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。

本研究使用的BC-5800五分類血液細(xì)胞分析儀（簡(jiǎn)稱BC-5800）運(yùn)用半導(dǎo)體激光和細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)白細(xì)胞的五分類。對(duì)可能出現(xiàn)的細(xì)胞形態(tài)及數(shù)量上的異常情況，BC-5800除了給出“白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常”、“未成熟細(xì)胞”、“核左移”、“異常/異型淋巴細(xì)胞”等警示標(biāo)志外，還對(duì)異常淋巴細(xì)胞（atypical lymphocyte，ALY）、巨大未成熟細(xì)胞（large immature cell，LIC）的百分比（ALY%、LIC%）與絕對(duì)值（ALY#、LIC#）進(jìn)行了預(yù)估。本研究針對(duì)這些警示標(biāo)志及參數(shù)，分析BC-5800對(duì)異常細(xì)胞的檢出情況，以了解該儀器的性能，使其在實(shí)際工作中得到合理使用，提高檢測(cè)效率。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

收集2016年1—5月同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院683例患者（男398例、女285例）的血常規(guī)檢測(cè)標(biāo)本。所有標(biāo)本均使用真空管采集，用乙二胺四乙酸二鉀進(jìn)行抗凝處理。標(biāo)本來(lái)源：血液科240例、消化科99例、外科93例、急診科40例、腫瘤科30例、介入放射科27例、呼吸科26例、泌尿科25例、腎臟風(fēng)濕科16例、心內(nèi)科11例、兒科8例、其他科室68例。

1.2 儀器與試劑

BC-5800（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）及M58配套系列試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，BASO染液（A液、B液），Nikon YS100雙目光學(xué)顯微鏡。

1.3 方法

1.3.1 檢測(cè)方法 本研究所有標(biāo)本按標(biāo)準(zhǔn)操作程序，運(yùn)用BC-5800進(jìn)行檢測(cè)；由工作超過(guò)10年的中級(jí)職稱檢驗(yàn)技術(shù)人員，以雙盲法的方式，根據(jù)白細(xì)胞分類技術(shù)的參考方法[1]進(jìn)行手工鏡檢，每份標(biāo)本計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，結(jié)果取均值。

1.3.2 BC-5800警示標(biāo)志與手工鏡檢對(duì)異常細(xì)胞的檢出情況比較 BC-5800出現(xiàn)“白細(xì)胞散點(diǎn)圖異?！?、“未成熟細(xì)胞”、“核左移”、“異常 /異型淋巴細(xì)胞”中的任意一個(gè)警示標(biāo)志，即結(jié)果判定為陽(yáng)性。手工鏡檢出現(xiàn)原始白血病細(xì)胞與幼稚白血病細(xì)胞≥1%、桿狀核粒細(xì)胞＞5%、晚幼粒細(xì)胞以上階段≥1%、異型淋巴細(xì)胞＞5%、漿細(xì)胞≥1%、有核紅細(xì)胞≥1%中的任意一個(gè)結(jié)果，即結(jié)果判定為陽(yáng)性[2]。比較BC-5800警示標(biāo)志及手工鏡檢對(duì)異常細(xì)胞的檢出情況。

1.3.3 BC-5800參數(shù)ALY%、ALY#、LIC%與LIC#的性能分析 繪制ALY%、ALY#、LIC%及LIC#的受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線，計(jì)算曲線下面積（area under curve，AUC），尋求敏感性較高、特異性適中的臨界點(diǎn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 BC-5800警示標(biāo)志與手工鏡檢對(duì)異常細(xì)胞檢出情況的比較

BC-5800警示標(biāo)志的出現(xiàn)比例為57.0%（389/683），BC-5800警示標(biāo)志與手工鏡檢異常細(xì)胞檢測(cè)的陽(yáng)性符合率為43.70%（170/389）。見(jiàn)表1。

手工鏡檢檢出白血病細(xì)胞標(biāo)本共88例，均出現(xiàn)警示標(biāo)志“未成熟細(xì)胞”，其中16例為單個(gè)警示標(biāo)志出現(xiàn)，72例為多個(gè)警示標(biāo)志聯(lián)合出現(xiàn)。出現(xiàn)假陰性4例，其未出現(xiàn)警示標(biāo)志，手工鏡檢結(jié)果顯示為桿狀核粒細(xì)胞增加，假陰性率為0.59%（4/683）。

2.2 BC-5800參數(shù)ALY%、ALY#、LIC%與LIC#的性能分析

BC-5800參數(shù)ALY%、ALY#、LIC%和LIC#ROC曲線的AUC分別為0.860、0.870、0.820和0.805。見(jiàn)表2、圖1。

表1 BC-5800警示標(biāo)志與手工鏡檢對(duì)異常細(xì)胞的檢出情況

表2 BC-5800參數(shù)ALY%、ALY#、LIC%及LIC#的性能情況

圖1 BC-5800參數(shù)ALY%、ALY#、LIC%及LIC#的ROC曲線

3 討論

白血病是由于造血干細(xì)胞、祖細(xì)胞惡性克隆而導(dǎo)致的一種疾病。細(xì)胞因自我更新增強(qiáng)、增殖失控、分化障礙、凋亡受阻而停滯在不同的發(fā)育階段。在骨髓和其他造血組織中，異常細(xì)胞大量增生、累積，使正常造血功能受到抑制，并浸潤(rùn)其他組織和器官。因此，異常細(xì)胞的檢測(cè)對(duì)白血病的診斷、治療有著重要的意義。

本研究共收集標(biāo)本683例，其中出現(xiàn)警示標(biāo)志的有389例，占57.0%。因此，了解這些警示標(biāo)志的作用，有利于日常檢驗(yàn)工作的開(kāi)展。

本研究結(jié)果顯示，單個(gè)警示標(biāo)志出現(xiàn)的比例較高（59.1%，230/389），其中警示標(biāo)志“未成熟細(xì)胞”出現(xiàn)最多（226例），但其手工鏡檢陽(yáng)性率不高。對(duì)多個(gè)警示標(biāo)志聯(lián)合出現(xiàn)的情況，手工鏡檢的陽(yáng)性率有顯著提高。手工鏡檢檢出白血病細(xì)胞標(biāo)本共88例，均出現(xiàn)警示標(biāo)志“未成熟細(xì)胞”，其中16例為單個(gè)警示標(biāo)志出現(xiàn)，72例為多個(gè)警示標(biāo)志聯(lián)合出現(xiàn)。出現(xiàn)假陰性4例，其未出現(xiàn)警示標(biāo)志，手工鏡檢結(jié)果顯示為桿狀核粒細(xì)胞增加，假陰性率僅為0.59%（4/683）。

當(dāng)AUC為0.7～0.9時(shí)，表示診斷準(zhǔn)確性中等。本研究BC-5800參數(shù)ALY%、ALY#、LIC%、LIC# ROC曲線的AUC分別為0.860、0.870、0.820與0.805，表示診斷準(zhǔn)確性較好，BC-5800參數(shù)對(duì)異常細(xì)胞的檢出能起到較好的提示作用。各臨床實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)自身需要選擇合適的臨界點(diǎn)。ALY與LIC的檢測(cè)對(duì)異常細(xì)胞的檢出具有一定的提示作用。

本研究認(rèn)為，僅根據(jù)警示標(biāo)志的有無(wú)來(lái)作為手工鏡檢復(fù)片規(guī)則是不可取的。有報(bào)道指出，應(yīng)充分重視白血病患者的血細(xì)胞分類結(jié)果，無(wú)論結(jié)果是否正常，儀器是否有提示，均應(yīng)進(jìn)行手工鏡檢，以防止儀器漏檢異常細(xì)胞[3]。針對(duì)每一項(xiàng)警示標(biāo)志，需根據(jù)警示標(biāo)志的出現(xiàn)、疾病的種類、細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞分類等多方面情況，制定一套縝密的手工鏡檢復(fù)片規(guī)則。

血液分析儀已成為血液分析必不可少的儀器，在血液疾病的診斷、治療中發(fā)揮著重要的作用。研究各類血液分析儀不僅僅是為了了解其各項(xiàng)性能，更重要的是能從中找出規(guī)律，從而提高檢測(cè)效率，減少誤診、漏診。

[1] 尚紅，王毓三，申子瑜. 全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M]. 4版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：18.

[2] Clinical and Laboratory Standards Institute.Reference leukocyte （WBC） differential count（proportional） and evaluation of instrumental methods [S]. H20-A2，CLSI，2007.

[3] 張蕾，汪嘉，李智，等. XE-2100血液分析儀異常細(xì)胞警示標(biāo)志的實(shí)際應(yīng)用[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010，25（11）：837-840.