劉 鵬， 練 鋒， 倪 晨， 孫建明

（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院男性病科，上海 200137；2. 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院超聲診斷科，上海 200137）

臨床上不育患者最基本的檢查就是精液分析及精子形態(tài)學(xué)分析，以評(píng)估患者自發(fā)性受孕情況[1]及精子受精能力[2]。一般情況下，精液質(zhì)量異?；颊呓?jīng)全面檢查可找到問題根本，但臨床上尚有一部分原因不明的精液質(zhì)量異常情況，這種不明原因的精液質(zhì)量異常稱為特發(fā)性精液質(zhì)量異常[3]。特發(fā)性少、弱、畸形精子癥約占不育男性的 30%[4]，也是目前男科領(lǐng)域人們十分關(guān)注的熱點(diǎn)之一[3]。本研究對(duì)特發(fā)性少弱畸形精子癥患者精子形態(tài)學(xué)相關(guān)參數(shù)進(jìn)行了分析。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

113例特發(fā)性少弱畸形精子癥患者（觀察組）及39例特發(fā)性少弱精子癥患者（對(duì)照組）為2015年10月—2016年9月在上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院生殖門診就診的患者，年齡21～45歲。夫妻未采取避孕措施、正常性生活1年以上，已排除女方不孕因素?；颊邿o泌尿生殖道感染，無外傷及手術(shù)史，超聲檢查未發(fā)現(xiàn)精索靜脈、睪丸、附睪、精囊明顯異常，無家族遺傳病史，無肝、腎等臟器嚴(yán)重疾病及精神疾病，精液細(xì)菌、支原體、衣原體、淋病奈瑟菌培養(yǎng)陰性，血清及精漿抗精子抗體陰性，血清性激素水平正常。少弱畸形精子癥及少弱精子癥的判斷根據(jù)《WHO人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)（第5版）》（簡(jiǎn)稱WHO手冊(cè)5版）[5]中的標(biāo)準(zhǔn)：少弱畸形精子癥患者的精子濃度＜15×106/mL，前向（progressive，PR）運(yùn)動(dòng)精子百分率＜32%，正常形態(tài)精子＜4.0%；少弱精子癥患者的精子濃度＜15×106/mL，PR＜32%。

1.2 方法

1.2.1 精液及形態(tài)學(xué)分析 禁欲4～7 d，自慰法收集精液于清潔無菌試管內(nèi)，于37 ℃液化待檢。按WHO手冊(cè)5版要求，利用清華同方計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)及形態(tài)學(xué)分析軟件分析精液質(zhì)量和精子形態(tài)（Diff-Quik染色法）。檢測(cè)精子頭部、頸部和中段、尾部異常百分率，過量殘留胞漿（excess residual cytoplasm，ERC）百分率，多重異常指數(shù)（multiple anomalies index，MAI），畸形精子指數(shù)（teratozoospermia index，TZI）和精子畸形指數(shù)（sperm deformity index，SDI）。

1.2.2 精漿指標(biāo)分析 用卓越310型全自動(dòng)生化分析儀（科華公司）檢測(cè)精漿α-葡糖苷酶活性（速率法）和鋅含量[1-（2-吡啶偶氮）-2-萘酚法]，試劑盒均由南京欣迪公司提供。嚴(yán)格依照實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序文件操作，且每批檢測(cè)均設(shè)有室內(nèi)質(zhì)控品監(jiān)測(cè)，以確保結(jié)果可靠。參考區(qū)間：精漿α-葡糖苷酶活性為109.63～570.76 U/L，精漿鋅含量為1.09～4.86 mmol/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，以中位數(shù)（四分位數(shù)）[M（P25，P75）]表示，組間比較采用秩和檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組與對(duì)照組精液相關(guān)參數(shù)的比較

觀察組與對(duì)照組比較，精漿α-葡糖苷酶活性、精子頭部異常百分率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z值分別為-3.691、-3.772，P＜0.01），其余各指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z值分別為-1.358、-0.011、-0.082、-1.892、-0.375、-1.855、-0.253，P＞0.05）。見表1。

2.2 觀察組精子形態(tài)學(xué)參數(shù)的相關(guān)性分析

MAI、TZI、SDI與精子頸部和中段、尾部異常百分率及ERC百分率呈正相關(guān)（P＜0.01），而與精子頭部異常百分率和正常形態(tài)精子百分率無明顯相關(guān)性（P＞0.05）。見表2。

表1 觀察組和對(duì)照組精液相關(guān)參數(shù)比較 [M（P25，P75）]

表2 特發(fā)性少弱畸形精子癥患者精子形態(tài)學(xué)參數(shù)的相關(guān)性分析 （r值）

3 討論

精子形態(tài)學(xué)分析在精液檢查中必不可少，臨床上高畸形精子率可導(dǎo)致體內(nèi)受精率降低和體外受精失敗[5]。因此，對(duì)精子形態(tài)學(xué)的研究越來越引起人們的重視。本研究結(jié)果顯示，觀察組精漿α-葡糖苷酶活性明顯低于對(duì)照組，且精子頭部異常百分率明顯高于對(duì)照組。有研究表明，精漿α-葡糖苷酶活性與精子形態(tài)有關(guān)[6-9]，本研究結(jié)果與其一致，其機(jī)制目前尚不明確，但也有研究表明二者之間并無相關(guān)性[10]。本研究結(jié)果顯示觀察組與對(duì)照組患者精漿鋅含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但觀察組相對(duì)偏低，精漿鋅含量是否影響精子形態(tài)報(bào)道不一[12-14]，本研究與一些研究結(jié)果[14]一致，可能與研究樣本量少有關(guān)。另有研究顯示，特發(fā)性少弱畸形精子癥患者的精子頭部畸形率明顯高于特發(fā)性少弱精子癥患者，精子頸部和中段、尾部異常及ERC差異不明顯，說明大多數(shù)特發(fā)性少弱畸形精子癥患者的精子形態(tài)異常主要由頭部異常引起[11]，與精子發(fā)生過程密切相關(guān)，精子發(fā)生過程中頂體會(huì)發(fā)生一系列變化，而頂體占精子細(xì)胞核前2/3，頂體異常即導(dǎo)致頭部畸形。雖特發(fā)性少弱畸形精子癥患者M(jìn)AI、TZI、SDI與特發(fā)性少弱精子癥患者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但前者TZI和SDI均比后者大，說明前者體內(nèi)生育力和體外受精能力稍低于后者。另外，特發(fā)性少弱畸形精子癥患者及特發(fā)性少弱精子癥患者SDI均＞1.60，提示體外受精失敗有閾值[15]，對(duì)體外受精-胚胎移植受精失敗有預(yù)測(cè)價(jià)值[16]。

本研究結(jié)果還顯示，觀察組患者M(jìn)AI、TZI、SDI均與精子頸部和中段、尾部異常百分率及ERC百分率呈正相關(guān)，與精子頭部異常百分率和正常形態(tài)精子百分率無明顯相關(guān)性，同時(shí)，MAI、TZI、SDI均＞1.60，提示自發(fā)性受孕及精子受精能力較低，說明觀察組患者的精子頸部和中段異常、尾部異常、ERC過多與體內(nèi)外受精能力低也密切相關(guān)，并不是只有精子頭部異常與受精能力有關(guān)。特發(fā)性少弱精子癥的治療原則是應(yīng)先藥物治療，改善精液質(zhì)量及精子形態(tài)，無效時(shí)才可考慮輔助生殖技術(shù)治療[3]。

綜上所述，精子發(fā)生過程復(fù)雜，特發(fā)性少弱畸形精子癥病因不明，精子形態(tài)畸形可能與附性腺分泌功能有關(guān)，而且精子頭部、頸部和中段、尾部異常及ERC都可能是導(dǎo)致體內(nèi)生育能力下降和體外受精失敗的原因。

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