馮 妮，李曉琳

(云南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院腫瘤科，云南 昆明 650021)

結(jié)腸癌早期臨床癥狀缺少差異性，很多患者開始治療時已經(jīng)是中晚期。生物標志物檢測因其經(jīng)濟、可靠、便捷等優(yōu)點被應(yīng)用于惡性腫瘤的診斷。研究發(fā)現(xiàn)，多種腫瘤標志物聯(lián)合檢測在直腸癌篩查、診斷中具有較高的應(yīng)用價值[1]。癌胚抗原(carcino-embryonic antigen，CEA)、糖類抗原199(carbohydrate antigen 199，CA199)、腫瘤M2型丙酮酸激酶(tumor M2 pyruvate kinase，TuM2-PK)是常見的腫瘤標志物，但目前聯(lián)合檢測CEA、CA199、TuM2-PK診斷結(jié)腸癌的研究較少。本研究通過觀察比較結(jié)腸癌患者、良性結(jié)腸病患者、健康志愿者的血清CEA、CA199、TuM2-PK水平，旨在探討CEA、CA199、TuM2-PK聯(lián)合檢測在結(jié)腸癌早期診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇2014年2月至2016年11月在云南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院就診的結(jié)腸癌患者137例作為觀察組，所有患者均符合《結(jié)腸癌規(guī)范化診療指南(試行)》中結(jié)腸癌診斷標準[2]，并經(jīng)X線檢查和病理活組織檢查確診，其中男93例，女44例，年齡35～74(52.83±10.42)歲。選取同期就診的結(jié)腸炎、腸息肉等良性結(jié)腸病患者87例為對照組，其中男52例，女35例，年齡30～71(50.41±13.27)歲。另選取同期在云南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院體檢的健康志愿者75例為健康組，其中男41例，女34例，年齡31～69(50.87±12.51)歲。觀察組和對照組患者均排除合并有重要臟器功能障礙、感染及其他癌癥者；正常組志愿者的心、肝、腎功能及血生物化學指標均正常。所有受試者簽署知情同意書，研究方案經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核批準。3組受試者的性別、年齡比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.23組受試者血清CA199、CEA、TuM2-PK水平檢測所有受試者于清晨空腹抽取肘靜脈血5 mL，應(yīng)用Avanti J-26S型離心機(美國貝克曼庫爾特公司)3 000 r·min-1離心 5 min，分離血清后在-20 ℃ 下保存，采用電化學發(fā)光法檢測血清CA199、CEA水平，檢測試劑盒購自英國Adcam公司，電化學發(fā)光儀由日本日立公司生產(chǎn)；采用定量酶聯(lián)免疫吸附試驗法測定血清TuM2-PK水平，試劑盒購自南京金益柏生物科技有限公司。在日常臨床檢驗標準中，CEA正常上限為5 μg·L-1、CA199正常上限為37×103U·L-1、TuM2-PK正常上限為15×103U·L-1[3]，大于正常上限為陽性表達。

1.3受試者工作特征曲線(receiveroperatingcharacteristiccurve，ROC) 繪制CEA、CA199、TuM2-PK聯(lián)合檢測診斷結(jié)腸癌的ROC，以曲線下面積0.50為標準，曲線下面積>0.50時有診斷價值。根據(jù)ROC分析得出單一指標診斷結(jié)腸癌的敏感度、特異度并計算約登指數(shù)(1-敏感度-特異度)，采用并聯(lián)實驗法計算聯(lián)合檢測的靈敏度，采用串聯(lián)實驗法計算聯(lián)合檢測的特異度。

2 結(jié)果

2.13組受試者血清腫瘤標志物水平比較結(jié)果見表1。3組受試者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。觀察組患者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平均顯著高于對照組和健康組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；對照組與健康組受試者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

表13組受試者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平比較

注：與對照組和健康組比較aP<0.05。

2.23組受試者腫瘤標志物陽性表達率比較結(jié)果見表2。觀察組患者血清TuM2-PK、CEA、CA199陽性表達率顯著高于對照組和健康組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對照組與健康組受試者血清TuM2-PK、CEA、CA199陽性表達率比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

表23組受試者血清CEA、CA199、TuM2-PK陽性表達率比較

Tab.2ComparisonofthepositiveexpressionrateofserumCEA，CA199andTuM2-PKinthethreegroups

組別nCEA陽性/例(%)CA199陽性/例(%)TuM2-PK陽性/例(%)健康組7514(18.67)8(10.67)6(8.00)對照組8727(31.03)15(17.24)13(14.94)觀察組13773(53.28)a69(50.36)a91(66.42)a

注：與對照組和健康組比較aP<0.05。

2.3CEA、CA199、TuM2-PK單獨及聯(lián)合檢測對結(jié)腸癌的敏感度和特異度結(jié)果見表3。CEA、CA199和TuM2-PK聯(lián)合檢測的靈敏度、約登指數(shù)均高于單一指標和2項指標聯(lián)合檢測，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；CEA、CA199和TuM2-PK聯(lián)合檢測的特異性高于單一指標及CEA和CA199聯(lián)合檢測。差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表33種腫瘤標志物單獨及聯(lián)合檢測的敏感度、特異度及約登指數(shù)

Tab.3Sensitivity，specificityandYoudenindexofsingleandcombineddetectionofthethreekindsoftumormarkers

敏感度/%特異度/%約登指數(shù)CEA53.28a74.69a0.28aCA19950.36a85.80a0.36aTuM2-PK66.42a88.27a0.55aCEA+CA19962.77a87.04a0.50aCEA+TuM2-PK76.64a91.360.68aCA199+TuM2-PK72.99a90.740.64aCEA+CA199+TuM2-PK87.5995.060.83

注：與CEA+CA199+TmM2-PK比較aP<0.05。

2.4CEA、CA199、TuM2-PK聯(lián)合檢測的ROC曲線分析結(jié)果見表4。CEA、CA199、TuM2-PK中任2項聯(lián)合檢測與3項聯(lián)合檢測對結(jié)腸癌均有診斷價值，ROC曲線下面積均≥0.70，其中CEA、CA199和TuM2-PK聯(lián)合檢測的曲線下面積最大。

表4CEA、CA199、TuM2-PK聯(lián)合檢測的ROC曲線分析

Tab.4AnalysisofROCcurvesforthecombineddetectionofCEA，CA199andTuM2-PK

檢測指標曲線下面積標準誤P曲線下面積的95%可信區(qū)間下限上限CEA+CA1990.700.0320.0050.570.73CEA+TuM2-PK0.810.0640.0000.750.86CA199+TuM2-PK0.760.0560.0030.690.78CEA+CA199+TuM2-PK0.870.0520.0000.810.96

3 討論

結(jié)腸癌是一類嚴重危害人類健康的常見惡性腫瘤，盡早進行診斷和治療對提高治療效果和改善預(yù)后具有重要的意義。腫瘤標志物表達水平在腫瘤發(fā)展過程中會發(fā)生變化，檢測其水平有助于腫瘤的診斷、分類、治療及預(yù)后判斷，并且其檢測過程便捷、有效，已經(jīng)越來越多地應(yīng)用于腫瘤的臨床診斷[4]。

TuM2-PK在腫瘤中多呈高表達，并以二聚體形式存在于腫瘤中，具有很高的特異性。腫瘤細胞本身會產(chǎn)生TuM2-PK，而TuM2-PK在結(jié)腸癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移時釋放入血液，使其血清水平顯著升高[5-6]。CEA是一種胚胎性腫瘤抗原，在正常的胃腸道組織中均有表達，但其表達水平在胃腸道惡性腫瘤中會顯著升高，癌細胞所產(chǎn)生的CEA伴隨著腫瘤細胞的極性紊亂釋放到血液中，使其血清水平增加[7-8]。CA199是一種糖抗原類腫瘤標志物，主要由消化道腫瘤細胞所產(chǎn)生，是消化道惡性腫瘤的常用檢測標志物，且在結(jié)腸癌中的表達顯著升高[9]。研究顯示，CA199在診斷結(jié)腸癌過程中具有較好的特異性[10]。因此，本研究通過比較結(jié)腸癌患者、良性結(jié)腸病患者以及健康者的血清CEA、CA199、TuM2-PK水平，探討這3項腫瘤標志物單獨與聯(lián)合檢測在結(jié)腸癌早期診斷中的價值。

本研究結(jié)果顯示，結(jié)腸癌患者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平及表達陽性率均顯著高于良性結(jié)腸病患者及健康者，與宋培棟等[10]的研究結(jié)果基本一致，進一步提示CEA、CA199、TuM2-PK可作為結(jié)腸癌重要的診斷指標。本研究分析發(fā)現(xiàn)，CEA、CA199和TuM2-PK聯(lián)合檢測的靈敏度和約登指數(shù)均優(yōu)于單一指標和2項指標聯(lián)合檢測，與曾龍飛等[11]的研究結(jié)果基本一致，而且ROC曲線分析結(jié)果顯示，CEA、CA199和TuM2-PK聯(lián)合檢測的曲線下面積最大，提示這3項指標聯(lián)合檢測診斷結(jié)腸癌的效果好，診斷價值高。因此，使用CEA、CA199、TuM2-PK聯(lián)合診斷，對于盡早發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌，及時進行干預(yù)治療，從而提高治療效果和患者生存質(zhì)量具有很好的臨床價值。

[1] ZHANG S Y，LIN M，ZHANG H B.Diagnostic value of carcinoembryonic antigen and carcinoma antigen 19-9 for colorectal carcinoma[J].IntJClinExpPathol，2015，8(8)：9404-9409.

[2] 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.結(jié)腸癌規(guī)范化診療指南(試行)[J].慢性病學雜志，2013，14(7)：481-485.

[3] 周娥.血清CEA、CA125、CA199及血漿M2-PK聯(lián)合檢測在胃癌診斷中的價值分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2016，13(16)：2360-2362.

[4] CHEN Y，GAO S G，CHEN J M，etal.Serum CA242，CA199，CA125，CEA，and TSGF are biomarkers for the efficacy and prognosis of cryoablation in pancreatic cancer patients[J].CellBiochemBiophys，2015，71(3)：1287-1291.

[5] PALSSON-MCDEMOTT E M，CURTIS A M，GOEL G，etal.Pyruvate kinase M2 regulates Hif-1α activity and IL-1β induction and is a critical determinant of the warburg effect in LPS-activated macrophages[J].CellMetab，2015，21(1)：65-80.

[6] FATEL-CANTILLO D，F(xiàn)ERNANDEZ-SUARES A，MORENO M A M，etal.Prognostic value of plasmatic tumor M2 pyruvate kinase and carcinoembryonic antigen in the survival of colorectal cancer patients[J].TumourBiology，2012，33(3)：825-832.

[7] GHANEM S S，HEINRICH G，LESTER S G，etal.Increased glucose-induced secretion of glucagon-like peptide-1 in mice lacking the carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 2(CEACAM2)[J].JBiolChem，2016，291(2)：980-988.

[8] 任波.胃癌患者化學治療前后血清血紅蛋白、血管內(nèi)皮生長因子、癌胚抗原、糖鏈抗原19-9和糖鏈抗原125水平變化及臨床意義[J].新鄉(xiāng)醫(yī)學院學報，2017，34(11)：998-1001.

[9] YAN W，XU L，WU Q，etal.A case report of spontaneous rupture of intracranial epidermoid cyst with dramatic increase of serum carbohydrate antigen 199：a three-year follow-up study[J].BmcNeurol，2015，15(1)：198.

[10] 宋培棟，翟根成.聯(lián)合檢測血清腫瘤標志物CEA、CA199、CA242及CA724在結(jié)直腸癌診斷中的應(yīng)用[J].中國實驗診斷學，2012，16(7)：1279-1281.

[11] 曾龍飛，田剛，姚健，等.Logistic回歸和PLS-DA模型評價腫瘤標志物對結(jié)腸癌的診斷價值[J].重慶醫(yī)學，2017，46(8)：1038-1041.