吳文波，王 超，牛德旺，胡超勝

(安陽(yáng)地區(qū)醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，河南 安陽(yáng)455000)

帕金森病(PD)是老年人群中常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)退變性疾病，常合并認(rèn)知功能障礙[1,2]。有研究報(bào)道[3]，漢族PD患者約有29.10%伴輕度認(rèn)知損害，若錯(cuò)過(guò)干預(yù)治療的最佳時(shí)期，約有80%的患者將進(jìn)展成為帕金森病癡呆(PDD)。近年來(lái)，有學(xué)者對(duì)PD蛋白質(zhì)標(biāo)志物的研究發(fā)現(xiàn)，PD患者血清中β淀粉樣蛋白(Aβ)1-42水平下降對(duì)PD早期診斷具有重要意義。本研究通過(guò)檢測(cè)Aβ1-42、尿酸(UA)等生化指標(biāo)并結(jié)合認(rèn)知功能的檢查，探討Aβ1-42、UA水平和血清炎癥因子(IL-6、TNF-α)與帕金森病(PD)患者發(fā)病的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2014年6月至2017年9月在我院診斷為帕金森病的120例患者作為PD組，其中男性74例，女性46例，年齡55-88歲，平均年齡(65.47±15.11)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):符合帕金森病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病導(dǎo)致的癡呆患者，不伴有心、肝、腎等臟器功能?chē)?yán)重障礙,患者或家屬對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)，一般資料和病理資料完整。按照Hoehn-Yahr(H-Y)分期標(biāo)準(zhǔn)將PD組患者進(jìn)一步分為輕度PD組(n=52，H-Y 分期1-2.5)和中、重度PD組(n=68，H-Y 分期≥3 期)。另選取同期健康體檢者120例為對(duì)照組，其中男性71例，女性49例，年齡54-85歲，平均年齡(62.75±11.15)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):自愿參與本次研究,并簽署知情同意書(shū)；排除標(biāo)準(zhǔn)：排除PD之外其他如由心、肺、腎、肝、內(nèi)分泌、血液系統(tǒng)等導(dǎo)致的認(rèn)知功能障礙，嚴(yán)重焦慮、抑郁和精神分裂癥等心理疾病，失語(yǔ)、譫妄、意識(shí)障礙等影響認(rèn)知功能評(píng)估的疾病。兩組年齡、性別等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

清晨空腹采集5 ml外周靜脈血作為樣本，3 000 轉(zhuǎn)/min離心 10 min，提取上清，于-80 ℃保存，檢測(cè)前統(tǒng)一解凍，4 ℃過(guò)夜，次日按人血清 Aβ1-42 ELISA 檢測(cè)試劑盒(貨號(hào) CSB-E10684h，武漢華美公司)說(shuō)明檢測(cè)Aβ1-42水平。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)IL-6、TNF-α水平，所需的ELISA試劑盒購(gòu)自蘇州露水生物科技有限公司。操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1兩組血清Aβ1-42、UA及血清炎癥因子水平比較

與對(duì)照組相比，PD組患者血清中Aβ1-42、UA水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；血清炎癥因子IL-6 、TNF-α水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組血清Aβ1-42、UA及血清炎癥因子水平比較

2.2中、重度帕金森病患者與輕度帕金森病患者血清Aβ1-42、UA及血清炎癥因子水平比較

與輕度帕金森病患者相比，中、重度帕金森病患者血清中IL-6 及TNF-α水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但血清Aβ1-42及UA水平差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表1 中、重度組與輕度組患者血清Aβ1-42、UA及IL-1β 、IL-6 及TNF-α水平比較

2.3帕金森病患者血清Aβ1-42、UA、IL-1β、IL-6及TNF-α水平與帕金森病綜合評(píng)分量表(UPDRS)評(píng)分相關(guān)性分析

各項(xiàng)指標(biāo)與UPDRS評(píng)分相關(guān)性分析結(jié)果顯示：UA的水平與UPDRS評(píng)分之間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.674，P=0.021)，IL-6與UPDRS評(píng)分之間呈正相關(guān)(r=0.402，P=0.027)，其余指標(biāo)與UPDRS評(píng)分之間無(wú)顯著相關(guān)性。

表2PD患者血清Aβ1-42、UA、IL-1β、IL-6及TNF-α水平與UPDRS、評(píng)分相關(guān)性分析

指標(biāo)相關(guān)系數(shù)P值UPDRS評(píng)分與Aβ1?42相關(guān)性-0．2310．152UPDRS評(píng)分與UA相關(guān)性-0．6740．021UPDRS評(píng)分與IL?1β相關(guān)性0．2340．364UPDRS評(píng)分與IL?6相關(guān)性0．4020．027UPDRS評(píng)分與TNF?α相關(guān)性0．1190．761

3 討論

認(rèn)知功能障礙是PD臨床上表現(xiàn)出的非運(yùn)動(dòng)癥狀之一。PD的病理生理機(jī)制復(fù)雜，一般認(rèn)為是多巴胺能(DA)神經(jīng)元變性丟失，紋狀體DA耗竭，位于基底核和額葉間的皮質(zhì)-皮質(zhì)下DA環(huán)路明顯受損[4，5]。病理改變主要表現(xiàn)為小膠質(zhì)細(xì)胞激活所致的一系列神經(jīng)免疫炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)[6]。腦內(nèi)和外周血中的Aβ通過(guò)血腦屏障上Aβ內(nèi)向和外向轉(zhuǎn)運(yùn)，使Aβ的生成和降解維持動(dòng)態(tài)平衡。在此過(guò)程中低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白I和高級(jí)糖基化終產(chǎn)物受體(RAGE)起著關(guān)鍵作用。人類(lèi)淀粉樣前體蛋白(APP)在γ-分泌酶的作用下可被分解生成為Aβ1-40和Aβ1-42兩種形式。APP編碼基因突變或其他原因均可導(dǎo)致γ-分泌酶活性增加。細(xì)胞Aβ1-42含量少但更易聚集，且神經(jīng)毒性更強(qiáng)。齊佩瑾等[7]發(fā)現(xiàn)約有50%的PD患者血清中出現(xiàn)Aβ堆積現(xiàn)象，與老年斑的形成有密切關(guān)系，同時(shí)存在tau蛋白的神經(jīng)纏結(jié)等病理改變[8]。體外細(xì)胞培養(yǎng)顯示[9]一定濃度的Aβ1-42可誘導(dǎo)一氧化氮(NO)的釋放，是炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)和氧化應(yīng)激的誘導(dǎo)因素，最終損傷蛋白質(zhì)及膜性結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致神經(jīng)節(jié)壞死或凋亡。

本研究結(jié)果顯示，PD組血清Aβ1-42水平明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，充分說(shuō)明Aβ1-42參與PD認(rèn)知功能障礙的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，且其水平的降低提示PD神經(jīng)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)的可能性。本研究發(fā)現(xiàn)PD組患者血清中Aβ1-42水平下降，主要原因可能與血腦屏障滲透性增加，緊密連接蛋白損傷，上調(diào)RAGE，使得血腦屏障上的Aβ1-42向內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)大大多于向外轉(zhuǎn)運(yùn)，血清中Aβ1-42水平降低有關(guān)[10]。氧化應(yīng)激和線粒體功能障礙是PD認(rèn)知功能障礙的主要原因。UA作為天然抗氧化劑和自由基清除因子，對(duì)PD線粒體損傷和氧化應(yīng)激具有保護(hù)作用。病理狀態(tài)下，UA缺乏，剩余大量自由基和金屬離子損害生物膜，破壞線粒體，造成神經(jīng)元代謝障礙，最終損傷認(rèn)知功能。本研究結(jié)果顯示，PD患者血清中UA水平降低，且與UPDRS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，證實(shí)UA對(duì)PD有保護(hù)作用。

近年來(lái)大量研究報(bào)道[11，12]PD患者血清、腦脊液、腦內(nèi)紋狀體內(nèi)炎癥因子水平升高，主要以包括TNF-α、IL-6在內(nèi)的致炎性細(xì)胞因子水平升高為主，與以上兩種致炎性細(xì)胞因子廣泛分布于外周循環(huán)中且容易檢測(cè)到有關(guān)。TNF-α、IL-6可通過(guò)誘導(dǎo)和促進(jìn)炎癥和細(xì)胞毒性等反應(yīng)，激活多種細(xì)胞凋亡途徑，加快細(xì)胞損傷和凋亡。本研究結(jié)果顯示，PD患者血清中TNF-α、IL-6水平不僅升高，且中、晚期帕金森患者與早期帕金森患者相比，IL-6 及TNF-α水平明顯高于早期患者。

相關(guān)研究也報(bào)道[13]腦損傷程度與PD病情相關(guān)。但細(xì)胞因子水平與病情無(wú)關(guān)。劉夫軍等[14]發(fā)現(xiàn)腦內(nèi)細(xì)胞因子的含量與該部位活化的膠質(zhì)細(xì)胞的密度成正比，且活化的小膠質(zhì)細(xì)胞與變性的DA相毗鄰。說(shuō)明小膠質(zhì)細(xì)胞活化并與細(xì)胞因子協(xié)同作用是導(dǎo)致線粒體功能障礙和神經(jīng)元變性的主要原因。本研究結(jié)果顯示，IL-6 、TNF-α水平與UPDRS評(píng)分之間呈正相關(guān)(r=4．811，P<0．05)，說(shuō)明TNF-α、IL-6是PD的損傷因素。

[1]Jones A J,Kuijer R G,Livingston L,et al.Caregiver burden is increased in Parkinson’s disease with mild cognitive impairment (PD-MCI)[J].Translational Neurodegeneration,2017,6(1):17.

[2]Chaturvedi M,Bousleiman H,Cozac V,et al.Quantitative EEG in patients with Parkinson`s Disease (PD) with and without Mild Cognitive Impairment (MCI) -Power analysis[J].Clinical Neurophysiology,2016,127(3):e30.

[3]羅 琴,夏 歡,楊新玲,等.中國(guó)漢族帕金森病患者外周血淋巴細(xì)胞基因表達(dá)譜的研究[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志,2015,32(7):1720.

[4]劉渤娜，尤振宇，劉學(xué)飛.腹腔熱灌注聯(lián)合靜脈化療治療進(jìn)展期胃腸道惡性腫瘤并腹水臨床研究[J].現(xiàn)代儀器與醫(yī)療,2015,21(3):35.

[5]張 佳,康文巖,劉 軍.帕金森病患者唾液α-突觸核蛋白與紋狀體多巴胺攝取功能的相關(guān)性研究[J].臨床內(nèi)科雜志,2017,34(1):45.

[6]莊文欣,劉宗昱,王雪凈,等.血管活性腸肽對(duì)帕金森病大鼠黑質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞活化及相關(guān)炎性因子釋放的影響[J].解剖學(xué)報(bào),2016,47(2):178.

[7]齊佩瑾.與阿爾茨海默癥相關(guān)的γ-分泌酶復(fù)合物的表達(dá)與純化研究[D].上海交通大學(xué),2015,47(2):178.

[8]唐智偉,張淑坤,吳世政.Tau蛋白與α-突觸核蛋白在常見(jiàn)神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病中的致病機(jī)制[J].海南醫(yī)學(xué),2017,28(3):451.

[9]羅振釗,劉 璐,馬 健,等.Annexin-A1模擬肽Ac2-26抑制小膠質(zhì)細(xì)胞釋放炎性介質(zhì)的作用研究[J].中華老年醫(yī)學(xué)雜志,2016,35(12):1320.

[10]梁若冰,雷 晶,張小寧.帕金森病患者合并認(rèn)知功能障礙與血清Aβ1-42、胱抑素C、尿酸水平的關(guān)系[J].神經(jīng)損傷與功能重建,2016,11(2):131.

[11]魏 濤,張 麗.血清炎癥因子與帕金森病精神癥狀的相關(guān)性[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2015,10(11):773.

[12]Hartley G,Regan D,Guth A,et al.Regulation of PD-L1 expression on murine tumor-associated monocytes and macrophages by locally produced TNF-α[J].Cancer Immunology Immunotherapy,2017,66(4):523.

[13]沈 萍.顱腦損傷急性期C-反應(yīng)蛋白與腦損傷程度、病情發(fā)展和預(yù)后的關(guān)系[J].中國(guó)繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2015,11(27):48.

[14]劉夫軍,袁向山,劉 靜,等.小膠質(zhì)細(xì)胞在VPA孤獨(dú)癥模型大鼠腦增齡過(guò)程中的變化[J].神經(jīng)解剖學(xué)雜志,2015,31(3):275.