毛一博 毛瑀中

（蘭州市第五十八中學(xué)，甘肅 蘭州）

一、前言

隨著人們生活水平的不斷提高，市售桶裝飲用水在質(zhì)量上存在較大的差別，尤其是亞硝酸鹽、硫酸鹽、氯等有害物質(zhì)的含量控制，國(guó)家尚未制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，僅對(duì)細(xì)菌含量桶裝飲用水規(guī)定不能超過(guò)20個(gè)/毫升。有資料顯示，目前狀態(tài)下的飲用水對(duì)人體健康的影響會(huì)導(dǎo)致某些疾病與不適。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)市售桶裝水開(kāi)封后存儲(chǔ)時(shí)間與NO2-、、Cl-及細(xì)菌含量進(jìn)行了分析檢測(cè)，建立了較好的分析方法，得到了比較準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，供大家參考，選擇更健康的飲用水。

二、實(shí)驗(yàn)與方法

（一）三種陰離子的測(cè)試

1.儀器

美國(guó)DIONEX ICS-1500IC型離子色譜儀，電導(dǎo)檢測(cè)器（DS6，24 mA），超聲波清洗器（SB-4200DTP），超純水器（HEAL FORCE），四元梯度泵，色譜工作站（CHAROMELEON變色龍軟件），10 μl定量管，自再生膜陰離子抑制器，分析柱（IonPac AS14 4*250mm）。

2.材料

市售桶裝純凈水，新鮮白開(kāi)水自制。

3.實(shí)驗(yàn)方法——色譜方法

將3.5 mol/L的Na2CO3和1.0 mol/L的NaHCO3混合溶液經(jīng)超聲脫氣后氮?dú)獗Ｗo(hù)做淋洗液流速1.0ml/min，使用AS14為分析柱，使用電導(dǎo)檢測(cè)器與紫外檢測(cè)器相串聯(lián)的方法，進(jìn)樣定量管為10 μl。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采集處理為Dionex色譜工作站CHAROMELEON變色龍軟件，實(shí)驗(yàn)操作均在室溫下進(jìn)行，并由專業(yè)老師指導(dǎo)完成。

（二）細(xì)菌測(cè)試

1.儀器。燒杯（500 mL、50 mL）、三角燒瓶（250 mL）、量筒、玻璃棒、漏斗、酒精燈、培養(yǎng)皿、牛皮紙、沙繩、托盤天平、滅菌鍋、酸度計(jì)、超凈工作臺(tái)。

2.試劑。牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、氫氧化鈉、鹽酸。

3.實(shí)驗(yàn)方法。利用微生物培養(yǎng)技術(shù)檢測(cè)水中細(xì)菌數(shù)量。

三、實(shí)驗(yàn)步驟

（一）陰離子測(cè)試

將市售桶裝純凈水開(kāi)封后每天早晨09:00取樣測(cè)試50 mL，加入1 mL淋洗液搖勻，測(cè)試樣品通過(guò)45 μm濾膜過(guò)濾，每個(gè)樣品平行測(cè)試三次，取平均結(jié)果進(jìn)行計(jì)算。經(jīng)過(guò)7天測(cè)試得出NO2-、、Cl-變化趨勢(shì)并繪制圖表。

（二）細(xì)菌測(cè)試

1.滅菌。將實(shí)驗(yàn)器具置于滅菌鍋中，在1.05 kg/cm2、121℃下滅菌15~30min。

2.制作牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。（1）根據(jù)培養(yǎng)基配方稱取各種原料成分，加入500 mL燒杯中，用少量自來(lái)水溶解定容至200 mL，用酒精燈加熱至沸騰后加入瓊脂2 g至完全熔化并調(diào)節(jié)pH值至7.2~7.4。（2）將完全融化的上述培養(yǎng)基趁熱倒入250 mL的三角燒瓶中，用兩層牛皮紙?jiān)o瓶口后置于滅苗鍋中，在1.05 kg/cm2、121℃下滅菌15~30min。與此同時(shí)，還需將洗凈干燥的培養(yǎng)皿若干套用牛皮紙包扎后一起滅菌。（3）待滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50℃時(shí)，在啟動(dòng)的超凈工作臺(tái)上打開(kāi)三角燒瓶的包紙，并用酒精燈火焰灼燒瓶口，將培養(yǎng)基分別倒入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中備用。

3.接種水樣。（1）將菌種和接種用具置于啟動(dòng)的超凈工作臺(tái)上5~10min。（2）點(diǎn)燃酒精燈，灼燒移液管，用移液管分別取各種水樣1 mL，接至液體培養(yǎng)基中。

4.培養(yǎng)。倒置培養(yǎng)皿，于37℃下培養(yǎng)24h后觀察和比較各種細(xì)菌菌落的形態(tài)。

四、結(jié)果討論

（一）數(shù)據(jù)分析

圖1為含有NO2-、、Cl-等離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的離子色譜圖，其中 1、2、3 分別為 Cl-、NO2-、保留峰及出分時(shí)間。圖 2 為實(shí)際樣品離子色譜圖。圖3為NO2-、、Cl-離子隨時(shí)間變化趨勢(shì)。由圖3表明：市售桶裝純凈水中這三種陰離子均符合目前行業(yè)對(duì)飲用水的控制標(biāo)準(zhǔn)，但在開(kāi)封以后的時(shí)間內(nèi)其中、NO2-有增加趨勢(shì)，尤其是NO2-在測(cè)試的最后兩天增加趨勢(shì)明顯。而每天測(cè)試的新鮮開(kāi)水中這三種陰離子含量均為1.36 mg/L（NO2-）、15.3 mg/L、14.6（Cl-）。

圖1

圖2

白開(kāi)水和桶裝飲用水中細(xì)菌含量比較，白開(kāi)水沸騰后24h未檢測(cè)到細(xì)菌，而桶裝水剛開(kāi)封24h為34個(gè)/毫升，開(kāi)封1月則為476個(gè)/毫升，其細(xì)菌指標(biāo)遠(yuǎn)高于國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)20個(gè)/毫升。

（二）線性范圍及回收率

NO2-、Cl-三種離子標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)均在0.991以上；對(duì)七組實(shí)際樣品的回收率分別進(jìn)行測(cè)試計(jì)算，分別為100.2%、100.4%，97.6%、98.3%、99.7%、97.05%、100.1%。

圖3

五、結(jié)論

本文初步探討了市售桶裝飲用水存放時(shí)間與 NO2-、SO42-、Cl-三種離子及細(xì)菌含量的變化情況，并與新鮮開(kāi)水做了比較，方法簡(jiǎn)便實(shí)用，非常適合對(duì)飲用水質(zhì)量的快速檢測(cè)。同時(shí)實(shí)驗(yàn)表明飲用長(zhǎng)期存放或過(guò)期桶裝水并非是一種健康的飲水選擇。