張 河，張 竹，張嘉勝

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果蠅細(xì)胞在代謝途徑、生理功能、發(fā)育、衰老等方面與哺乳動物基本相似。摩爾根[1]等從研究黑腹果蠅中發(fā)現(xiàn)了“伴性遺傳”、“連鎖與互換”等現(xiàn)象和規(guī)律，從而發(fā)展了染色體遺傳學(xué)說的。果蠅又具有高度純種性，繁殖快，管理方便，生存期短，所以果蠅生存試驗是國內(nèi)外常用的檢驗藥物延壽效應(yīng)的可靠方法。

枸杞子含有胡蘿卜素，硫胺素、核黃素、鹽酸、抗壞血酸等多種有益人體的維生素。研究證明，枸杞具有抑制脂肪在纖維內(nèi)蓄積、促進(jìn)肝細(xì)胞的新生、降低血糖、降低膽固醇等作用。趙琦等[2]研究表明枸杞子具有一定的延緩衰老作用。陶大勇等[3]用半乳糖對小鼠制造衰老模型，發(fā)現(xiàn)灌胃黑果枸杞色素小鼠的血清和各器官組織中SOD活性皆高于衰老模型組，MDA含量顯著低于衰老模型組。陶少武等[4]發(fā)現(xiàn)：含有枸杞子的培養(yǎng)基對果蠅性活力無有效作用，但能有效延長果蠅壽命。

鉛是一種積累性毒物。人類通過食物鏈攝取鉛，也能從被污染的空氣中攝取鉛。過量接觸、吸入鉛化合物或含鉛中藥，如樟丹、黑錫丹、羊癲瘋丸等，以及使用含鉛化妝品等也可引起中毒。孟金萍等[5]指出：鉛對生物體具有多方面的毒性，可導(dǎo)致智力低下、造血機(jī)能障礙、高血壓、腎病等并介紹了鉛對各個系統(tǒng)如神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)以及個體發(fā)育的毒性效應(yīng)。

本文基于果蠅試驗系統(tǒng)，為科學(xué)地了解枸杞的藥物作用提供參考。

1 材料和方法

1.1 一般材料

野生型紅眼黑腹長翅果蠅由南京曉莊學(xué)院生命科學(xué)系遺傳實驗室提供。收集8 d內(nèi)羽化未交配的成蟲，雌雄分開，用普通培養(yǎng)基在溫度為（25±1）℃，相對濕度在50%～70%的環(huán)境中培養(yǎng)備用。

果蠅培養(yǎng)基：蔗糖、瓊脂、蒸餾水、玉米粉、酵母粉、丙酸。中草藥：枸杞購自當(dāng)?shù)刂兴幏俊Ｔ噭阂宜徙U（pb（CH3COO）2·3H2O）分析純、丙酸。實驗儀器：恒溫生化培養(yǎng)箱（25±1）℃；相對濕度50%～70%；平底培養(yǎng)瓶。

1.2 實驗設(shè)計與方法

1.2.1 實驗分組

果蠅隨機(jī)分成四組，分別為：枸杞、枸杞+鉛、鉛、對照組。

1.2.2 制中藥煎劑

煎藥用具：沙罐。（1）先用冷水浸泡一小時左右，水高過藥面；（2）煮沸后火減小煎15 min；（3）頭煎藥汁倒下；（4）藥渣再加冷水煎15 min（文火）[6]。

1.2.3 果蠅培養(yǎng)基的配制。普通玉米粉培養(yǎng)基的配方[6]如下。A：糖6.2，瓊脂0.62 g，水38 ml煮沸溶解；B：玉米粉8.25 g，水38 ml，酵母粉0.7 g。A和B混合加熱后成糊粉狀，加0.5 ml丙酸，按比例配制，分裝到不同的培養(yǎng)基中。本實驗中用中草藥煎劑代替以上配方中的水。

1.2.4 果蠅壽命的測定

收集8 h內(nèi)羽化的果蠅成蟲，乙醚麻醉后雌雄分管培養(yǎng)，對照組用基礎(chǔ)培養(yǎng)基，實驗組為用不同中草藥煎劑及鉛配制的培養(yǎng)基，每組雌雄各75只，每管可放25只，于溫度25℃，濕度65%培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。每組全部果蠅死亡天數(shù)的算術(shù)平均數(shù)為該組的平均壽命，每組最后死亡的5只果蠅存活天數(shù)的平均數(shù)為該組的最高壽命。

1.2.5 果蠅生殖力的測定

收集8 h內(nèi)羽化的果蠅成蟲，乙醚麻醉后雌雄分管培養(yǎng)，對照組用基礎(chǔ)培養(yǎng)基，實驗組為用中草藥煎劑及鉛配制的培養(yǎng)基，每組雌雄各20只，共分四管，每管放入5對果蠅，觀察產(chǎn)生的F1代個數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

采用單因素方差分析[7]。

2 結(jié) 果

2.1 枸杞和鉛對果蠅壽命的影響（見表1，表2）

表1 不同處理對雌性果蠅壽命的影響

表2 不同處理對雄性果蠅壽命的影響

2.2 枸杞和鉛對果蠅生殖力的影響（見表3）

表3 不同處理對果蠅生殖力的影響

3 討 論

對照組雌果蠅的平均壽命為57.7±1.2天；鉛組雌果蠅的平均壽命最低，為50.4±3.9天；說明鉛的存在會顯著降低雌果蠅的平均壽命。枸杞+鉛組雌果蠅的平均壽命為52.2±3.9天；表明枸杞可小幅度緩解鉛對雌果蠅的平均壽命的影響。枸杞組雌果蠅的平均壽命為61.0±3.0天，為各組最高，表明枸杞可延長雌果蠅的平均壽命、最高壽命。

對照組雄果蠅的平均壽命為63.4±6.2天；鉛組雄果蠅的平均壽命最低，為52.1±5.5天；說明鉛的存在會顯著降低雄果蠅的平均壽命。枸杞+鉛組雄果蠅的平均壽命為53.7±1.9天；表明枸杞可小幅度緩解鉛對雄果蠅的平均壽命的影響。枸杞組雄果蠅的平均壽命為63.9±2.1天，為各組最高，表明枸杞可延長雄果蠅的平均壽命、最高壽命。

對照組F1代果蠅數(shù)目為326.3±51.9；鉛組F1代果蠅數(shù)目最低，為55.7±11.7只；說明鉛的存在會顯著降低F1代果蠅數(shù)。枸杞+鉛組果蠅的F1代果蠅數(shù)目為77.9±3.4只；表明枸杞可小幅度緩解鉛對果蠅的生殖力的影響。枸杞組果蠅的F1代果蠅數(shù)目為382.0±26.7只，為各組最高，表明枸杞可顯著促進(jìn)果蠅生殖力。鉛組的生殖高峰明顯推遲，出現(xiàn)于第3次統(tǒng)計；其它的組生殖高峰都出現(xiàn)于第2次統(tǒng)計。

綜上所述，鉛會顯著降低果蠅的平均壽命、生殖力；枸杞會顯著延長果蠅的平均壽命、生殖力；枸杞可緩解鉛對生物體的毒性影響。

[1] 劉祖洞,江紹慧.遺傳學(xué)實驗[M].北京:高等教育出版社,1987.

[2] 趙 琦.枸杞子對果蠅生存期的影響[J].陜西中醫(yī),2005, 26(11):123.

[3] 陶大勇,陳佳娟,陳 瑛,白紅進(jìn).黑果枸杞色素對小鼠抗衰老作用的研究[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2008,(1):11-13.

[4] 陶少武.枸杞子對果蠅性活力及壽命影響的實驗研究[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2005,17(4):46-47.

[5] 孟金萍,孫淑華,王艷蓉,等.鉛的生物學(xué)毒性效應(yīng)[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志,2007,17(1):58-61.

[6] 王俊林,宋高臣.黃芪對果蠅壽命影響的實驗研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2005,33(4):34～35.

[7] 杜榮騫.生物統(tǒng)計學(xué)[M].北京:高等教育出版社,1985.