孫 紅 何安華 楊 勁

新生兒溶血?。℉DN）是指母嬰血型不合而引起的胎兒或新生兒免疫性溶血。凡是以IgG性質(zhì)出現(xiàn)的不規(guī)則抗體，理論上都可以引起HDN，因此對有輸血史或妊娠史的孕婦應(yīng)作不規(guī)則抗體篩查，若檢測出不規(guī)則抗體，應(yīng)作出相應(yīng)的預(yù)防和治療。

Rh陰性婦女生育二胎時容易發(fā)生新生兒溶血性貧血甚至圍產(chǎn)兒死亡。隨著國家對二胎的放開，二胎孕婦產(chǎn)生不規(guī)則抗體[1]頻率增高，Rh血型系統(tǒng)的新生兒溶血病[2]的發(fā)生也不斷升高。婦產(chǎn)科學(xué)2005版書上將茵陳湯作為降低孕婦ABO血型免疫抗體效價(jià)的主要治療方法。我們應(yīng)用茵陳蒿湯在預(yù)防治療RhE陰性孕婦133例，也取得了明顯效果，現(xiàn)報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 ①實(shí)驗(yàn)組：2014年12月-2016年12月臨床RhE陰性生育二胎孕婦（首次懷孕時母嬰血型效價(jià)≥1:128）133例，口服茵陳蒿湯，預(yù)防治療年齡20～46歲，平均年齡（27.48±3.93）歲，孕齡20～40周，平均（21.63±3.99）周，妊娠次數(shù)2～5次，生育次數(shù)1～2次。②對照組：2016年1月-2016年12月臨床RhE陰性生育二胎孕婦307例（無輸血史），年齡20～48歲，平均年齡（28.39±5.21）歲，孕齡20～40周，平均（19.65±3.26）周，妊娠次數(shù)2～5次，生育次數(shù)1～2次。

1.2 試劑與儀器及其治療方案

1.2.1 試劑與儀器 ①2014年1月-2015年12月使用ABO血型鑒定卡、抗人球蛋白卡均來自于長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司；RhE-IgM試劑、ABO反定細(xì)胞、不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞及抗體鑒定譜細(xì)胞均來自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司。②2016年1月-2016年12月使用ABO血型鑒定卡、RhE抗原卡、抗人球蛋白卡均來自于長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司；ABO反定細(xì)胞、不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞及抗體鑒定譜細(xì)胞均來自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司。③Rh新生兒溶血病檢測卡（酸放散試劑盒）及譜細(xì)胞均來自于長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司。④瑞士哈美頓Hamilton全自動血型儀提供ABO血型、RhE抗原和不規(guī)則抗體的檢測，長春博迅提供專用孵育器、專用離心機(jī)適用于譜細(xì)胞鑒定檢測。

1.2.2 茵陳蒿湯治療方案[3]茵陳蒿湯（茵陳30 g、制大黃6 g、黃芩15 g、甘草3 g）結(jié)合辯證加減，自抗體效價(jià)升高時起，每日一劑煎服，直至分娩。方中茵陳善清利濕熱利小便，可清熱利濕解毒退黃，清除孕產(chǎn)婦體內(nèi)濕熱；黃芩有清熱利濕解毒作用與茵陳合用，加強(qiáng)清熱利濕退黃之功效；制大黃瀉下力較弱，活血作用好；甘草補(bǔ)脾益氣，調(diào)和諸藥。全方寒溫兼用、攻補(bǔ)兼施、補(bǔ)中有清、清中寓補(bǔ)、相輔相成。諸藥合用不僅能減少生成抗體且能抑制抗體生成，增強(qiáng)母體和胎兒免疫力，降低新生兒溶血病的發(fā)生。

1.3 方法

1.3.1 ABO血型定型、RhE抗原檢測和不規(guī)則抗體篩查 用EDTA-K2真空管采集孕婦靜脈血2 mL，充分混勻，3000 rpm離心10分鐘。采用全自動血型儀說明書進(jìn)行檢測。

1.3.2 抗-E鑒定 不規(guī)則抗體陽性的孕婦使用EDTA-K2真空管采集靜脈血2 mL，然后，充分混勻，3000 rpm離心10分鐘。將分離血漿按50 ul和對應(yīng)譜細(xì)胞（1-10號）各50 ul分別加入抗人球蛋白卡的10個孔中，37℃孵育15分鐘，離心5分鐘（900 rpm，2分鐘；1500 rpm3分鐘）。依據(jù)譜細(xì)胞格局判定抗體特異性。

1.3.3 Rh新生兒溶血病檢測 用EDTA-K2真空管采集孕婦靜脈血2 mL，充分混勻，3000 rpm離心10分鐘。按照長春博迅酸放散試劑盒使用說明書進(jìn)行檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 運(yùn)用SPSS 17.0中文版統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，因?yàn)橛蠺＜1，所以采用fisher確切概率法。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

實(shí)驗(yàn)組2014年12月-2016年12月臨床RhE陰性生育二胎孕婦133例無產(chǎn)生抗-E及發(fā)生Rh新生兒溶血病情況，對照組2016年1月-2016年12月臨床RhE陰性生育二胎孕婦307例（無輸血史）307例孕婦產(chǎn)生抗-E 10例、發(fā)生Rh新生兒溶血病2例，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（fisher確切概率法P=0.022，P＜0.05）。見表1。

表1 實(shí)驗(yàn)組與對照組比較

3 討 論

茵陳蒿湯在降低孕婦ABO血型免疫抗體效價(jià)和預(yù)防新生兒溶血病的作用已有證明，但在降低RhE[4]抗原陰性且生育過RhE抗原陽性胎兒并再次生育二胎產(chǎn)婦抗-E的作用還未見詳細(xì)研究。本研究表明有治療效果，可以考慮在治療其他血型系統(tǒng)產(chǎn)生的抗體上加以應(yīng)用，使用茵陳湯可減少Rh免疫球蛋白的使用，既降低了成本，也可降低生育二胎時發(fā)生新生兒溶血性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。

Rh血型系統(tǒng)溶血病是由于Rh抗原陰性的婦女，懷孕了Rh抗原陽性的胎兒，接受胎兒Rh抗原陽性紅細(xì)胞的刺激，發(fā)生同族免疫反應(yīng)，產(chǎn)生了IgG類抗體。當(dāng)再次懷孕時，此類抗體可通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，與胎兒紅細(xì)胞結(jié)合導(dǎo)致胎/嬰兒新生兒溶血病。由于產(chǎn)婦Rh系統(tǒng)免疫抗體的產(chǎn)生，必須由Rh抗原陽性紅細(xì)胞刺激，而不像ABO溶血病，可以由紅細(xì)胞以外的非特異性抗原刺激產(chǎn)生，又由于胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體的時期主要在妊娠后期，特別是在分娩過程中，而第一次妊娠產(chǎn)生的抗體速度慢，數(shù)量少，整個過程需要8～9周甚至6個月，因此第一孕胎兒往往不受侵害，Rh系統(tǒng)新生兒溶血病多發(fā)生于第二胎[5]。本次研究的133例RhE陰性生育二胎孕婦，在生育一胎和二胎時都分別進(jìn)行了茵陳蒿湯的預(yù)防治療。

本次研究還有兩個缺陷：一是，133例RhE陰性生育二胎孕婦是選用首次懷孕時母嬰血型效價(jià)≥1:128的孕婦，如果不按效價(jià)選擇實(shí)驗(yàn)組或許更有臨床意義。二是，未對一胎和二胎的新生兒進(jìn)行RhE抗原檢測，若詳細(xì)分組對比更能說明RhE抗原檢測對安全生育二胎的重要性。本研究主要著眼于生育二胎婦女使用茵陳湯能否降低抗-E抗體的產(chǎn)生，從而降低因抗-E抗體所致的新生兒溶血病。在預(yù)防二胎新生兒溶血病[6]及生產(chǎn)過程中和以后用血安全方面有很高的實(shí)用價(jià)值。

[1] 楊曉明,李明強(qiáng),蔣曉玲.8207例孕產(chǎn)婦不規(guī)則抗體篩查結(jié)果分析及臨床意義[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2015,22(33):121～124.

[2] 劉勤.母嬰Rh血型不合新生兒溶血病的治療進(jìn)展[J].中外醫(yī)學(xué)研究,2016,10(20):145～146.

[3] 豐有吉,沈鏗.婦產(chǎn)科學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2008,4(1):92.

[4] 孫長杰,王曉寧,劉冰,等.抗-cE合并抗-c、抗-E抗體致新生兒溶血病的臨床研究[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2016,20(11):1911～1913.

[5] 范麗艷,徐酉華.新生兒膽紅素腦病的研究進(jìn)展[J].兒科藥學(xué)雜志,2016,22(9):50～54.

[6] 李小華.茵陳蒿湯加減治療ABO母兒血型不合療效觀察[J].中國民間療法,2016,24(3):46～47.