鳳 琦
(東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150040)
過量的重金屬會抑制種子的萌發(fā)和幼苗的生長,使抗氧化酶系統(tǒng)和膜系統(tǒng)受損,誘發(fā)染色體畸變,嚴(yán)重時還會導(dǎo)致植物死亡。因此,研究不同種類,不同濃度的重金屬離子對作物生長,結(jié)實等方面的影響有著極為重要的意義。銅(Cu)既是植物生長發(fā)育所必需的微量元素,又是污染環(huán)境的重金屬元素,當(dāng)土壤中Cu2+濃度超過一定值時,會對細胞形成較大的毒害,影響植物的生長和發(fā)育。
大豆幼苗從土壤中吸收營養(yǎng)物質(zhì),水分等維持生命活動主要是依靠根系的吸收作用,不難理解,受銅離子最先損傷大豆的根系,吸收的物質(zhì)通過根系進一步向地上部分轉(zhuǎn)移,造成了大豆地上部分植株的損傷。首先體現(xiàn)在外觀上,主要表現(xiàn)為葉片變小,皺縮,萎蔫,并且呈現(xiàn)暗綠色。莖桿變脆變干,變細,易折斷。其次,這種損傷還更為內(nèi)在的體現(xiàn)在大豆幼苗的各項生理生化指標(biāo)上。
大豆(學(xué)名 Glycine max(Linn.) Merr.)通稱黃豆。豆科大豆屬一年生草本植物。
用CuSO4·5H2O和蒸餾水分別配置濃度梯度為0、30、100、200、300、400 mg/kg 的 Cu2+水溶液,分別澆灌長勢相近的大豆幼苗,每個濃度都澆灌三盆大豆幼苗,作為對照,其中直接用蒸餾水澆灌的為空白對照。一共澆灌18盆大豆幼苗。連續(xù)處理7天,觀察結(jié)果。
(1)用蒽酮法測定不同Cu2+處理后的植株葉片的可溶性糖含量,在620 nm波長下比色,測各管溶液的光密度值(OD)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中獲得實驗組中可溶性還原糖含量的梯度變化。
(2)用茚三酮顯色法測定處理后的葉片中脯氨酸含量,繪制脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過所做的標(biāo)準(zhǔn)曲線以及測量出的實驗組數(shù)據(jù),準(zhǔn)確測定出不同Cu2+處理后的植株葉片的脯氨酸含量。
(3)用毫米尺測量每個處理濃度下的株高,根長,觀察植株的外觀變化并記錄。
隨著實驗的進行,對照組正常生長,用Cu2+溶液澆灌的幼苗隨Cu2+濃度的升高以及天數(shù)的遞增,依次變得矮小,葉片萎蔫,葉片顏色也由正常的青綠色變成墨綠色,并且變脆。莖桿變細,干枯。其中用400 mg/kg Cu2+濃度溶液處理的實驗組幾乎沒有葉片生長,整株枯萎。
實驗測得的可溶性糖與Cu2+濃度的關(guān)系,在一定的濃度范圍內(nèi),隨著澆灌溶液Cu2+濃度的升高而增加,當(dāng)澆灌溶液Cu2+濃度達到200 mg/kg時幾乎到達最大值,當(dāng)Cu2+濃度為0.000301/100g鮮重,當(dāng)Cu2+濃度為300 mg/kg時大豆葉片可溶性糖含量幾乎與200 mg/kg的實驗組持平,為0.000302/100g鮮重。有文獻表示,在逆境脅迫,尤其是重金屬脅迫條件下,植物細胞會主動積累一些可溶性溶質(zhì),如可溶性糖,可溶性蛋白等,降低細胞內(nèi)滲透勢,以保證水分的正常供應(yīng),細胞正常生理生化功能的執(zhí)行??扇苄蕴亲鳛闈B透調(diào)節(jié)物質(zhì)來調(diào)節(jié)細胞內(nèi)外滲透壓,維持一定的滲透壓平衡。
大豆對Cu2+的耐受性體現(xiàn)了其對重金屬逆境脅迫的適應(yīng)性,為了阻止或者降低重金屬對植株生長的影響,大豆幼苗從外觀上發(fā)生了極大的改變。與此同時,隨之而來產(chǎn)生的一系列生理生化指標(biāo)都做出了相應(yīng)的適應(yīng)性改變。比如,組織細胞中可溶性糖的增多,脯氨酸含量的增加等,這些都是植物應(yīng)對逆境做出的防御性變化,但是其機制是很復(fù)雜的,目前,植物的重金屬耐受性機理都尚未明確,需要進一步的研究證實。我相信,植物對于逆境的適應(yīng)性變化以及生理生化改變相關(guān)的機理及機制的研究必將對未來植物種植,生產(chǎn),研究大有裨益。