孫 杰

（天津市薊州區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，天津 薊縣 301900）

雞大腸桿菌病是由大腸桿菌引起的表現(xiàn)多種臨床癥狀及病理變化的一類疾病，該病在養(yǎng)雞業(yè)中很常見(jiàn)，給養(yǎng)雞業(yè)造成一定的經(jīng)濟(jì)損失?，F(xiàn)在養(yǎng)雞形式多以集約化飼養(yǎng)為主，養(yǎng)殖密度的增大加劇了該病的發(fā)生及流行，另外抗菌藥物使用不當(dāng)時(shí)有發(fā)生，使耐藥性的產(chǎn)生更趨嚴(yán)重，給大腸桿菌病的防治帶來(lái)諸多困難。

筆者分別從不同養(yǎng)雞廠的病死雞中分離出9株大腸桿菌，對(duì)分離出的9株大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)、染色、形態(tài)與生化特性及藥敏試驗(yàn)，以期為臨床防治雞大腸桿菌病提供一定的參考依據(jù)。

1 材料及方法

1.1 病 料采取自天津薊縣周邊不同肉養(yǎng)雞廠具有典型病變病死雞的心血及臟器。

1.2 培養(yǎng)基及試劑普通瓊脂平板，營(yíng)養(yǎng)肉湯，麥康凱平板，微量發(fā)酵管，M-R試劑，V-P試劑。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物1日齡健康雛雞。

1.4 試驗(yàn)藥品（1）氧氟沙星；（2）鹽酸環(huán)丙沙星；（3）乳酸環(huán)丙沙星；（4） 沙拉沙星；（5） 恩諾沙星；（6） 洛美沙星；（7）培氟沙星；（8）雙氟沙星。均為原粉，市購(gòu)，含量均達(dá)到90%以上，按試驗(yàn)要求配制成所需濃度，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 分離培養(yǎng)采取癥狀典型病死雞的心血、肝臟和脾臟，接種于麥康凱瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24h。挑取麥康凱瓊脂平板上的粉紅色菌落，按常規(guī)方法進(jìn)行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。

1.6 病原鑒定

1.6.1 生化試驗(yàn) 挑取麥康凱瓊脂平板上的粉紅色菌落，接種于肉湯37℃培養(yǎng)18h。然后將肉湯培養(yǎng)物接種于微量發(fā)酵管進(jìn)行發(fā)酵試驗(yàn)，并進(jìn)行生化反應(yīng)試驗(yàn)。

1.6.2 致病性試驗(yàn) 選取10只10日齡健康雛雞并分成2組，每組5只，第1組按照0.5mL/只的劑量腹腔接種肉湯培養(yǎng)物，第2組按照0.5mL/只的劑量腹腔注射生理鹽水，觀察各組發(fā)病情況。

1.7 藥敏試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)：抑菌圈直徑平均值小于10mm為抗菌；10mm輕度敏感；11～15mm中度敏感；16～20mm高度敏感。

2 結(jié) 果

2.1 致病菌株的培養(yǎng)特性分離培養(yǎng)及純培養(yǎng)結(jié)果表明其培養(yǎng)特性具有共同的特點(diǎn)，在普通瓊脂平板上為灰白色、半透明、圓形光滑的中等大小菌落；在普通肉湯中可使肉湯均勻渾濁有腥臭味，試管底有沉淀物呈灰白色，輕搖后呈云霧狀散開；在麥康凱平板上為磚紅色、圓形微凸、邊緣整齊、光滑濕潤(rùn)的小菌落。

2.2 菌株的形態(tài)學(xué)特征培養(yǎng)的菌株經(jīng)涂片染色、鏡檢，可見(jiàn)多數(shù)散在的兩端鈍圓的革蘭氏陰性短桿菌，偶有2～3個(gè)相連，無(wú)莢膜，無(wú)芽孢。

2.3 致病性試驗(yàn)結(jié)果24h后第一組的5只雛雞死亡，剖檢可見(jiàn)纖維素性心包炎、肝周炎、肝臟腫大，表面被覆一層薄膜狀的纖維滲出，取病死雛雞雞心血、脾臟、肝臟進(jìn)行涂片，染色鏡檢，可見(jiàn)兩端鈍圓，革蘭氏陰性的短桿菌，與接種菌一致，對(duì)照組的5只雛雞全部健康，7d后剖檢未見(jiàn)異常，心、臟器處未分離出大腸桿菌。

2.4 菌株的生化特性結(jié)果見(jiàn)表1。

2.5 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

9株不同地區(qū)雞致病性大腸桿菌(編號(hào)DC-1～DC-9)對(duì)8種氟喹諾酮類藥物的敏感性試驗(yàn)見(jiàn)表2。

藥敏試驗(yàn)表明：氧氟沙星，鹽酸環(huán)丙沙星，乳酸環(huán)丙沙星高度敏感；沙拉沙星，恩諾沙星，洛美沙星呈現(xiàn)中度敏感；而培氟沙星和雙氟沙星不敏感。

3 討論

3.1 本試驗(yàn)共分離出9株大腸桿菌,其培養(yǎng)、染色、形態(tài)、生化等特性相同，與雞致病性大腸桿菌特征一致，為藥敏試驗(yàn)和疾病防制提供了依據(jù)，受條件和時(shí)間限制未能進(jìn)行病原的血清型鑒定。

3.2 大腸桿菌易產(chǎn)生耐藥性，建議用藥前先進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，選擇敏感藥物，同時(shí)要定期更換或交叉抗菌藥物。

3.3 加強(qiáng)衛(wèi)生消毒工作，及時(shí)清掃雞舍內(nèi)的糞便，保持良好的通風(fēng)。定期對(duì)雞舍及其周圍環(huán)境進(jìn)行消毒。提高飼養(yǎng)管理水平減少應(yīng)激因素。保持雞舍內(nèi)適宜的溫度、濕度。飲水可中加入抗應(yīng)激藥物，可增強(qiáng)機(jī)體對(duì)大腸桿菌的抵抗力。凈化雞群內(nèi)環(huán)境，引種要選擇管理嚴(yán)格，無(wú)大腸桿菌病史、正規(guī)的種雞場(chǎng)，及時(shí)淘汰弱殘雛，清除經(jīng)蛋傳播到雛雞體內(nèi)的大腸桿菌。

表1 雞致病性大腸桿菌的生化試驗(yàn)

表2雞致病性大腸桿菌的藥敏試驗(yàn)