劉朝紅 鄒顏矯 陳琳 袁成良（通訊作者）

（四川省德陽市人民醫(yī)院 四川 德陽 618000）

腦脊液常規(guī)檢驗(yàn)是基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)的常規(guī)檢測項(xiàng)目，對于診斷和鑒別神經(jīng)系統(tǒng)感染性、出血性疾病以及明確惡性腫瘤的診斷等具有重要臨床意義[1]。胸腹水白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類對于臨床醫(yī)師鑒別診斷漏出液及滲出液、化膿性炎癥積液、結(jié)核性積液、病毒感染、系統(tǒng)性紅斑狼瘡的多發(fā)性漿膜炎等具有重要意義[2]。目前胸腹水、腦脊液標(biāo)本因其特殊性，細(xì)胞學(xué)檢查的自動化程度還很低[3]。傳統(tǒng)有核細(xì)胞計(jì)數(shù)法是用改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板耗時費(fèi)力且不精密度較大、受人為主觀因素影響較多[4]。近年來，隨著醫(yī)療儀器的發(fā)展，血液細(xì)胞分析儀和尿沉渣分析儀也具備了進(jìn)行體液細(xì)胞檢測的功能，這為漿膜腔積液、腦脊液有核細(xì)胞計(jì)數(shù)創(chuàng)造了有利條件[5]。本文就通過對本院的XN-1000全自動血細(xì)胞分析儀、UF-1000i尿沉渣分析儀與人工計(jì)數(shù)的有核細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類做對比性分析研究，評價其在胸腹水、腦脊液有核細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類檢測中的優(yōu)缺點(diǎn)及可行性。

1.材料與方法

1.1 材料

1.1.1一般資料 連續(xù)收集本院2016年門診和住院患者送檢標(biāo)本478例，其中腹水212例，胸水160例，腦脊液106。采集標(biāo)本均以 EDTA.K2抗凝劑抗凝，所有標(biāo)本采集后均嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第四版）腦脊液、胸腹水留取操作指南[6]要求立即送檢，1 h內(nèi)完成儀器法和鏡檢法細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類。

1.1.2儀器與試劑 Sysmex XN-1000全自動血液分析儀及原裝配套試劑、質(zhì)控品(日本sysmex公司)；Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀及原裝配套試劑、質(zhì)控品(日本sysmex公司)；BX43顯微鏡(日本Olympus公司)；標(biāo)準(zhǔn)Neubauer細(xì)胞計(jì)數(shù)板。及1%的冰醋酸。

1.2 方法

據(jù)白細(xì)胞濃度將478份標(biāo)本分成高、中、低3個濃度組，低濃度細(xì)胞水平為(1～100)×106/L；中濃度細(xì)胞水平為(101～500)×106/L；高濃度細(xì)胞水平為大于501×106/L。改良牛鮑計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法(手工法)和Sysmex XN-1000全自動血液分析儀法和Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀法(儀器法)都要在采集標(biāo)本后1h內(nèi)完成檢測，每份標(biāo)本檢測2次，結(jié)果取平均值。

1.2.1人工顯微鏡法 標(biāo)本充分混勻后，同時加100μL標(biāo)本和1%的冰醋酸200μL于潔凈試管中，充分混勻，靜置15分鐘后沖池，由2名資深技師采用雙盲法，嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中的體液細(xì)胞計(jì)數(shù)指南用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)，每份標(biāo)本檢測結(jié)果取兩次的平均值，白細(xì)胞數(shù)過多者需以生理鹽水稀釋后檢測。對于腦脊液有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果大于15×106/L以及胸腹水有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果大于50×106/L的標(biāo)本，應(yīng)用離心沉淀法收集有核細(xì)胞做瑞氏染色并進(jìn)行細(xì)胞分類。

1.2.2 XN-1000分析儀檢測 標(biāo)本檢測前要做儀器校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)和室內(nèi)質(zhì)控，符合要求后才能進(jìn)行標(biāo)本有核細(xì)胞計(jì)數(shù)。標(biāo)本充分混勻后在XN-1000血液分析儀的體液模式下進(jìn)行檢測。

1.2.3 UF1000i分析儀檢測 分析前須檢查儀器性能并進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，符合要求后才能進(jìn)行標(biāo)本有核細(xì)胞計(jì)數(shù)。取標(biāo)本混勻后，按照UF 1000i尿沉渣分析儀操作說明，在手動模式下進(jìn)行檢測。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以±s表示，對上述三種方法所得數(shù)據(jù)進(jìn)行配對t檢驗(yàn)和線性相關(guān)回歸分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 如表1結(jié)果顯示，各相關(guān)系數(shù)均大于0.8。均具有較好的相關(guān)性。同時可以看出，XN-1000血細(xì)胞分析儀的相關(guān)系數(shù)r比UF-1000i尿沉渣分析儀的相關(guān)系數(shù)r更高，相關(guān)性更好。

表1 手工法和儀器法計(jì)數(shù)胸腹水白細(xì)胞的線性相關(guān)回歸分析研究結(jié)果

2.2 Sysmex XN-1000血細(xì)胞分析儀與手工法細(xì)胞分類結(jié)果相比，三組標(biāo)本有核細(xì)胞多個核百分比結(jié)果兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均大于0.05）。見表2。

表2 手工法和XN-1000儀器有核細(xì)胞百分比結(jié)果比較

綜上所述，使用UF-1000i尿沉渣分析儀和XN-1000全自動血液分析儀檢測腦脊液和胸腹水中有核細(xì)胞數(shù)均具有可行性；而XN-1000的相關(guān)性優(yōu)于UF-1000i，且XN-1000尚可用于用于有核細(xì)胞分類，所以XN-1000的臨床應(yīng)用價值更大！

3.討論

腦脊液正常狀態(tài)下各成分的含量相對穩(wěn)定，當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生器質(zhì)性病變時，由于脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞通透性發(fā)生改變，可使腦脊液成分發(fā)生變化。所以通過腦脊液常規(guī)成分分析在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別診斷中意義顯著。胸腹水則是在漿膜出現(xiàn)各種病理情況下，胸腔或腹腔內(nèi)液體異常增多積液。根據(jù)胸腹水成分及含量的不同可將積液分為滲出液和漏出液。明確積液的性質(zhì)有利于疾病的診斷和治療。傳統(tǒng)的人工顯微鏡計(jì)數(shù)方法，操作復(fù)雜、費(fèi)時、準(zhǔn)確性和重復(fù)性低、不精密度較大、影響因素較多。不利于疾病的診斷和療效觀察。

UF-1000i尿液分析儀是目前比較先進(jìn)的一款自動化尿液分析儀，它使用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法和核酸熒光染色技術(shù)，從而對各個粒子進(jìn)行識別，能夠測量出其白細(xì)胞、紅細(xì)胞和上皮細(xì)胞及細(xì)菌霉菌等[7]，研究顯示其有核細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果與鏡檢法具有較好的相關(guān)性。但是。UF-1000i尿液分析儀不能進(jìn)行細(xì)胞分類，如要分類時還需手工檢測。并且，應(yīng)隨時對儀器進(jìn)行必要的改進(jìn)優(yōu)化[8]，以得出可靠的結(jié)果。

隨著新一代全自動血液分析儀的問世之后，光學(xué)法細(xì)胞檢測技術(shù)為胸腹水等低細(xì)胞數(shù)標(biāo)本的準(zhǔn)確計(jì)數(shù)分群另辟了一條嶄新的途徑，并漸顯其在該領(lǐng)域的應(yīng)用價值和廣闊前景。目前，Sysmex XN-1000全自動血液分析儀采用半導(dǎo)體激光原理結(jié)合流式細(xì)胞和核酸熒光染色技術(shù)可實(shí)現(xiàn)對白細(xì)胞的計(jì)數(shù)和分類，而且另外設(shè)有專門體液標(biāo)本檢測通道，可實(shí)現(xiàn)對胸腹水的檢測與分類[9]。研究可見，其細(xì)胞計(jì)數(shù)與手工法相關(guān)性非常好，分類結(jié)果也與手工法無明顯差異。

綜上所述，使用UF-1000i和XN-1000檢測腦脊液和胸腹水中紅、白細(xì)胞數(shù)均具有可行性。且自動化程度高、干擾因素少、準(zhǔn)確性高，可以替代傳統(tǒng)的手工計(jì)數(shù)板法[10]。而XN-1000不僅準(zhǔn)確度更高，相關(guān)性更好，還可用于有核細(xì)胞分類。所以臨床應(yīng)用價值更大，更值得推廣！但是改良牛鮑計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法是傳統(tǒng)胸腹水白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法的金標(biāo)準(zhǔn)，而且儀器的計(jì)數(shù)與分類仍存在著一定的局限性，所以在儀器有異常報警時還需顯微鏡進(jìn)行復(fù)檢，兩者有效結(jié)合可以有效提高檢驗(yàn)效率及結(jié)果的準(zhǔn)確性，更好地為患者服務(wù)。

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