張 晶, 張 玨,2, 王 輝, 田海清, 李 斐
(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)機(jī)電工程學(xué)院,內(nèi)蒙古呼和浩特 010018; 2.內(nèi)蒙古師范大學(xué)物理與電子信息學(xué)院,內(nèi)蒙古呼和浩特 010022; 3.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)生態(tài)環(huán)境學(xué)院,內(nèi)蒙古呼和浩特 010019)
通信作者:田海清,博士,教授,博士生導(dǎo)師,從事農(nóng)牧業(yè)機(jī)械智能化研究。E-mail:hqtian@126.com。
甜菜是世界第二大制糖原料,由其制得的糖量占世界食糖總量的20%。甜菜也是我國(guó)僅次于甘蔗的重要糖料作物,其產(chǎn)糖量占我國(guó)食糖總產(chǎn)量的10%,在我國(guó)東北、華北和西北的許多農(nóng)村經(jīng)濟(jì)中占有重要地位[1]。
目前我國(guó)甜菜產(chǎn)區(qū)普遍存在單產(chǎn)偏低或單產(chǎn)高但含糖率低的問(wèn)題,造成這些問(wèn)題的原因在于甜菜生長(zhǎng)期沒(méi)有合理地施肥,尤其是氮肥對(duì)甜菜單產(chǎn)及其含糖率的影響很大[2]。在作物生產(chǎn)中,準(zhǔn)確、快速、經(jīng)濟(jì)地測(cè)定作物的氮素營(yíng)養(yǎng)狀況,可以及時(shí)、精確地指導(dǎo)田間氮肥用量,以獲得最大的經(jīng)濟(jì)效益和最小的環(huán)境污染程度[3]。近年來(lái),隨著科學(xué)技術(shù)水平的不斷提高,氮素營(yíng)養(yǎng)診斷技術(shù)正從傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室間接檢測(cè)向現(xiàn)場(chǎng)直接無(wú)損檢測(cè)方向發(fā)展[4]。
近紅外光譜技術(shù)是一種無(wú)損、無(wú)污染的分析技術(shù),具有光譜范圍廣、波段多、光譜分辨率高、數(shù)據(jù)量大等優(yōu)點(diǎn),可以用來(lái)監(jiān)測(cè)作物葉片和冠層生化組分的狀況和變化,被廣泛應(yīng)用于食品、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域[5]。國(guó)內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)利用近紅外光譜技術(shù)在小麥[6]、水稻[7]、棉花[8]、油菜[9]等作物上進(jìn)行了深入研究。王人潮等認(rèn)為,診斷水稻氮素營(yíng)養(yǎng)水平的葉片光譜敏感波段范圍為760~900、630~660、530~560 nm[10];Thomas等發(fā)現(xiàn),甜椒葉片含氮量與550~675 nm波長(zhǎng)間葉片的反射系數(shù)高度相關(guān)[11];薛利紅等認(rèn)為,通過(guò)光譜分析可以識(shí)別不同栽培措施和生長(zhǎng)狀況水稻群體[12];景娟娟等研究了不同氮素水平下小麥光譜反射特征、導(dǎo)數(shù)光譜特征的變化規(guī)律[13]。
氮肥的施加量會(huì)直接影響甜菜葉片的顏色、形態(tài)結(jié)構(gòu)以及其他生長(zhǎng)信息,從而影響甜菜的光譜特性[14]。因此,研究甜菜冠層的高光譜特性與葉片的SPAD值、地上生物量和全氮等生長(zhǎng)信息的關(guān)系,就可以估測(cè)甜菜體內(nèi)的氮素含量,從而科學(xué)地指導(dǎo)農(nóng)事活動(dòng)[15]。
在獲取光譜數(shù)據(jù)的過(guò)程中,會(huì)受到環(huán)境及人員操作等外界因素的影響,檢測(cè)儀器在采集數(shù)據(jù)過(guò)程中也會(huì)受到雜散光、樣本背景、電子噪音和儀器性能等因素的干擾,使得獲取的原始光譜數(shù)據(jù)存在大量噪聲[16]。為了提高光譜分析的準(zhǔn)確度,需要對(duì)原始光譜進(jìn)行預(yù)處理。目前,近紅外光譜預(yù)處理中經(jīng)常使用的預(yù)處理方法有平滑、微分、標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量變化與多元散射校正等[17-18]。
本試驗(yàn)擬研究多種光譜預(yù)處理方法,并且通過(guò)分析各種預(yù)處理方法得到的光譜數(shù)據(jù)與甜菜生長(zhǎng)信息的相關(guān)性,最終確定最佳光譜預(yù)處理方法,以便為后續(xù)的氮素預(yù)測(cè)模型研究提供有利的理論依據(jù)。
本試驗(yàn)于2014年在內(nèi)蒙古赤峰市松山區(qū)太平地鎮(zhèn)甜菜規(guī)模種植區(qū)域開(kāi)展,試驗(yàn)甜菜品種為KWS1676,甜菜幼苗在大棚內(nèi)培育,于5月中下旬移栽至試驗(yàn)田內(nèi),收獲時(shí)間在9月下旬至10月上旬。試驗(yàn)小區(qū)面積40 m2,行距50 cm,株距 25 cm,設(shè)4個(gè)重復(fù)試驗(yàn),試驗(yàn)小區(qū)按完全隨機(jī)排列布置。本試驗(yàn)為單因素(N)試驗(yàn),共設(shè)7個(gè)氮肥水平(N1、N2、N3、N4、N5、N6、N7),施肥量依次為0、15、32.5、76、108.5、163、217.5 kg/hm2,田間管理按常規(guī)方式進(jìn)行。
采用美國(guó)ASD(全稱Analytical Spectral Devices)公司生產(chǎn)的ASD Qualityspec光譜儀測(cè)定甜菜冠層光譜信息,該光譜儀的測(cè)量波長(zhǎng)范圍是350~1 830 nm,其中350~1 000 nm采樣間隔為1.4 nm,光譜分辨率為3 nm;1 000~1 830 nm光譜采樣間隔為2 nm,光譜分辨率為10 nm。光譜數(shù)據(jù)的采集選擇晴朗、無(wú)云、無(wú)風(fēng)時(shí)進(jìn)行,時(shí)間定在北京時(shí)間10:00—14:00。數(shù)據(jù)采集時(shí),光纖探頭垂直向下,距離甜菜冠層的垂直高度依據(jù)樣品冠層的大小及探頭視場(chǎng)角確定,使樣品冠層恰能位于探頭視場(chǎng)范圍內(nèi)。依據(jù)采樣小區(qū)甜菜長(zhǎng)勢(shì),選擇能代表整個(gè)種植區(qū)內(nèi)植株生長(zhǎng)狀況的樣品,且每個(gè)試驗(yàn)小區(qū)在光譜采集前進(jìn)行參考白板校正。圖1為甜菜葉叢生長(zhǎng)期在不同氮素水平下的冠層反射光譜曲線。
從圖1可以看出,不同氮素水平下甜菜冠層光譜響應(yīng)曲線的變化趨勢(shì)相同,但光譜響應(yīng)曲線的差異也較明顯:在可見(jiàn)光(550~680 nm)波段,不同氮肥水平甜菜冠層的反射率都比較低,而且與施氮水平呈負(fù)相關(guān),在550 nm左右的反射率最高,表現(xiàn)出綠峰處的強(qiáng)反射特征;在680~750 nm紅邊處,各施氮處理對(duì)甜菜冠層光譜反射率略有影響;在近紅外(750~1 100 nm)波段,甜菜冠層的反射率隨氮素的增加而增大。由光譜曲線的總變化趨勢(shì)可知,近紅外波段的反射率隨施氮量的增大而提高,可見(jiàn)光波段的反射率隨施氮量增加而降低,這主要與不同施氮處理下甜菜冠層葉綠素含量、葉面積覆蓋度等生理生化指標(biāo)有關(guān)。
1.3.1 植株SPAD值測(cè)定 采集甜菜冠層光譜信息后,采用便攜式葉綠素儀SPAD-502測(cè)定甜菜葉片的SPAD值,為了提高測(cè)量的精度,對(duì)采樣點(diǎn)的甜菜植株葉片進(jìn)行10~20次測(cè)定,取其平均值作為該采樣小區(qū)的SPAD值。
1.3.2 植株生物量測(cè)定 測(cè)定冠層光譜及SPAD值后,將甜菜樣品地上莖葉部分、地下塊根分開(kāi),使用電子天平分別測(cè)定鮮質(zhì)量,之后放入牛皮紙袋,在烘箱內(nèi)于105 ℃殺青 30 min,再于70 ℃烘至恒質(zhì)量(即為干質(zhì)量)。
1.3.3 植株葉片含氮量測(cè)定 采用微量凱氏定氮法測(cè)定植株氮含量。將植株樣品粉碎,與濃硫酸、催化劑一同加熱消化,使蛋白質(zhì)充分分解。分解得到的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨,之后堿化蒸餾游離,用硼酸吸收,最后用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。計(jì)算氮素含量的公式如下:
X=[(V1-V2)×N×0.014]/[m×(10/100)]×F×100%。
(1)
式中:X為樣品中蛋白質(zhì)的全氮含量,g/kg;V1為樣品消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積,mL;V2為鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,mL;N為硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度,mol/L;m為樣品的質(zhì)量(g)或體積(mL);F為氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù),為6.25。
光譜平滑預(yù)處理的目標(biāo)是去除隨機(jī)高頻誤差。如果原始光譜數(shù)據(jù)存在高頻噪聲,可以通過(guò)對(duì)一定窗口范圍內(nèi)的波長(zhǎng)數(shù)進(jìn)行擬合或者平均運(yùn)算來(lái)獲取該波長(zhǎng)點(diǎn)的最佳估算值,以減少噪聲對(duì)該波長(zhǎng)點(diǎn)數(shù)值的干擾,提高信噪比[19]。
Savitzky-Golay卷積平滑算法由Savitzlcy和Golay提出,采用該算法對(duì)原始光譜進(jìn)行處理時(shí),先采用最小二乘擬合系數(shù)建立濾波函數(shù),再對(duì)移動(dòng)窗口內(nèi)的波長(zhǎng)點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多項(xiàng)式的最小二乘擬合[20]。擬合的表達(dá)式如下:
(2)
(3)
式中:Xj為第j列光譜值。
一階微分(first derivative)和二階微分(second derivative)是光譜分析中使用較多的預(yù)處理方法,該方法可以減少由于光照角度、光程和樣本表面不均勻等造成的光譜基線漂移,同時(shí)還可以有效地提高光譜分辨率和靈敏度。常用的光譜微分方法是直接差分法[21]。使用差分法時(shí),關(guān)鍵要選取適當(dāng)?shù)牟罘謱挾?,避免差分過(guò)程中引入較大的噪聲。
一階微分和二階微分的計(jì)算公式如下:
(4)
(5)
式中:λj為第j波段;FDRλj為波段j和波段j+1之間的光譜一階微分;SDRλj為波段j和波段j+2之間的光譜二階微分;Rλj、Rλj+1、Rλj+2分別為第j、j+1、j+2波段的原始光譜反射率;Δλ為波段j+1和波段j之間的波長(zhǎng)差距。
多元散射校正(multiplicative scatter correction,簡(jiǎn)稱MSC)是由Isaksson和Naes提出的一種化學(xué)計(jì)量學(xué)算法。該算法通過(guò)對(duì)每個(gè)波長(zhǎng)點(diǎn)的光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行散射校正,可以有效地消除散射影響,增強(qiáng)了與目標(biāo)成分含量相關(guān)的光譜信息[22]。首先要求建立一個(gè)待測(cè)樣品的“理想光譜”,即對(duì)獲得的樣品光譜進(jìn)行計(jì)算時(shí),光譜的變化與樣品中的成分含量滿足直接的線性關(guān)系。然后以該光譜為標(biāo)準(zhǔn)要求對(duì)所有其他樣品的近紅外光譜進(jìn)行修正。
在一般情況下,以所有光譜的平均光譜作為一個(gè)“理想光譜”。通過(guò)每條光譜與平均光譜進(jìn)行最小二乘法[23]擬合,可以很好地消除線性誤差[24]。具體計(jì)算過(guò)程如下:
(1) 計(jì)算樣品平均光譜(理想光譜):
(6)
(2) 線性回歸,并用最小二乘法求取回歸系數(shù)ai、回歸常數(shù)bi:
(7)
(3) 對(duì)每條光譜進(jìn)行校正:
(8)
標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換(standard normal variate transformation,簡(jiǎn)稱SNV)類似于多元散射校正,為了減少樣品由于固體顆粒的大小、表面散射以及光程變化造成的光譜誤差,標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換對(duì)每條光譜進(jìn)行單獨(dú)校正[25]。
利用標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換預(yù)處理后的光譜值的計(jì)算公式如下:
(9)
式中:Xi,SNV為第i個(gè)樣品標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換后的光譜值;xi為第i個(gè)樣品光譜的平均值;k=1,2,…,m,其中m為波長(zhǎng)數(shù)。
采用平滑、微分、多元散射校正和標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換4種預(yù)處理方法對(duì)甜菜冠層的原始光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理,并將原始光譜數(shù)據(jù)和處理后的光譜數(shù)據(jù)分別與甜菜植株SPAD值、生物量以及葉片含氮量進(jìn)行相關(guān)性分析,其相關(guān)關(guān)系曲線分別如圖2、圖3、圖4所示。
由圖2可以看出,各曲線上都有明顯的藍(lán)邊和黃邊特征光譜變化區(qū),但不同預(yù)處理下的冠層光譜反射率和SPAD值相關(guān)關(guān)系曲線差異較大。平滑后的光譜響應(yīng)曲線與原始光譜曲線幾乎相同,但改善了原始光譜在1 350~1 450 nm波段存在的噪聲影響。微分處理后的效果較好,綠峰處的相關(guān)性達(dá)到-0.668 78;在620~670 nm波段范圍內(nèi),冠層光譜反射率與SPAD值呈極顯著正相關(guān),特別在645 nm處,相關(guān)性達(dá)到0.682 03。標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換和多元散射校正預(yù)處理效果最佳,前者相關(guān)性在726 nm處達(dá)到-0.799 68,后者在727 nm處達(dá)到 -0.802 71。綜上所述,采用多元散射校正比較適合甜菜SPAD值的測(cè)定。
由圖3可以看出,原始光譜在1 370 nm附近存在較大的噪聲,經(jīng)過(guò)平滑處理后得到改善,但是曲線相關(guān)度不高。經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換和多元散射校正預(yù)處理后的光譜曲線在706 nm處的相關(guān)性最高,二者在紅邊位置(680~750 nm)和近紅外(850~950 nm)處,冠層光譜反射率與生物量呈顯著正相關(guān)。微分處理曲線上有很明顯的藍(lán)邊、黃邊和紅邊等特征光譜變化區(qū),綠峰處反射率與生物量的相關(guān)度可達(dá)到-0.599 98;紅邊位置(680~750 nm)的反射率與生物量呈顯著正相關(guān)。因此可知,微分光譜預(yù)處理方法比較適用于甜菜植株生物量的測(cè)定。
由圖4可以看出,經(jīng)過(guò)平滑處理后的光譜曲線少了很多毛刺,特別在1 365~1 372 nm附近表現(xiàn)得尤為明顯,相關(guān)度為0.061 63~0.087 08,且光譜曲線有明顯的黃邊、紅邊特征光譜區(qū)。標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換和多元散射校正預(yù)處理后的曲線圖相似,前者在718 nm處的相關(guān)度為0.647 43,而后者可達(dá)到 -0.654 784。微分處理后光譜曲線有明顯的藍(lán)邊和紅邊特征光譜區(qū),在480~550 nm波段,冠層光譜反射率與葉片含氮量呈顯著正相關(guān),綠峰處的相關(guān)度可達(dá)到0.667 88;而在 795 nm 處的相關(guān)度為-0.717 41。因此可見(jiàn),微分光譜比較適用于甜菜冠層葉片含氮量的測(cè)定。
不同預(yù)處理方法與甜菜冠層的SPAD值、生物量和葉片含氮量最大相關(guān)系數(shù)如表1所示??梢?jiàn)利用多元散射校正進(jìn)行光譜預(yù)處理得到的光譜數(shù)據(jù)與甜菜植株SPAD值相關(guān)度最高。另外,經(jīng)過(guò)多元散射校正去噪后的光譜曲線更加收斂緊湊,可以有效消除散射影響所導(dǎo)致的基線線性平移和傾斜偏移現(xiàn)象。對(duì)于生物量和葉片含氮量, 通過(guò)一階微分得到的光譜數(shù)據(jù)與二者的相關(guān)度最高,而且微分光譜曲線上有較多的波峰和波谷,說(shuō)明微分預(yù)處理可以更好地提取與生物量和葉片含氮量相關(guān)的光譜。
表1 不同預(yù)處理方法下甜菜光譜和SPAD值、生物量、冠層葉片含氮量最大相關(guān)系數(shù)
本研究采用4種預(yù)處理方法(卷積平滑、一階微分、多元散射校正、標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換)對(duì)甜菜冠層光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理,并對(duì)預(yù)處理后的光譜數(shù)據(jù)分別與甜菜的SPAD值、生物量以及葉片含氮量進(jìn)行相關(guān)性分析。
(1)在甜菜SPAD值與光譜反射率的相關(guān)性分析中,采用多元散射校正預(yù)處理后的光譜相關(guān)性最好,尤其在727 nm附近,相關(guān)性最明顯。
(2)在甜菜生物量與冠層光譜的相關(guān)性分析中,4種預(yù)處理后的光譜數(shù)據(jù)與甜菜生物量的相關(guān)性都達(dá)到了顯著水平,其中一階微分的預(yù)處理效果最好,多元散射校正和標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換次之。
(3)在甜菜葉片含氮量與光譜反射率的相關(guān)性分析中,一階微分光譜的相關(guān)性最高,且其相應(yīng)的相關(guān)性曲線存在較多的波峰和波谷,表明微分變換有利于提取更多與葉片含氮量相關(guān)的光譜信息,采用多元散射校正和標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變換處理后的光譜相關(guān)性次之。
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