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        兒童急性髓細胞性白血病中B淋巴細胞瘤-2基因和P-糖蛋白表達的臨床價值

        2018-03-08 06:55:22
        腫瘤基礎與臨床 2018年6期
        關鍵詞:骨髓細胞白血病免疫組化

        (鄭州市第一人民醫(yī)院,河南 鄭州 450004)

        兒童急性白血病是兒童常見惡性腫瘤之一,對患兒的生命健康安全造成了嚴重威脅[1]。目前,急性白血病的發(fā)病機制不明確。B淋巴細胞瘤-2基因簡稱(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)屬于凋亡抑制基因,與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展關系密切[2]。P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是經典的耐藥蛋白[3]。研究[4-5]證實,Bcl-2和P-gp均可導致包括急性白血病在內的惡性腫瘤的耐藥。本研究為進一步探討兒童急性髓細胞性白血病的發(fā)病和耐藥機制,采用免疫組化S-P法檢測兒童急性髓細胞性白血病骨髓細胞中Bcl-2和P-gp蛋白的表達,并以非惡性血液病患兒作為對照,現將結果報道如下。

        1 資料與方法

        1.1一般資料入組鄭州大學第一附屬醫(yī)院、鄭州市第一人民醫(yī)院2016年1月至2018年1月收治的經病理證實的兒童急性髓細胞性白血病100例,其中男74例,女26例;年齡1.5~13.3歲,中位年齡6.9歲;所有患兒均為初診未治患兒。并選擇同期住院的非惡性血液病患兒50例作為對照,其中男31例,女19例;年齡1.8~13.0歲,中位年齡7.2歲;免疫性血小板減少性紫癜21例,缺鐵性貧血18例,原發(fā)性血小板減少11例。2組患兒的性別、年齡等基線資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究已經獲得醫(yī)院倫理委員會的審核通過,入組患兒家屬也均已簽署知情同意書。

        1.2主要試劑Bcl-2單克隆抗體購自美國SAB公司;P-gp單克隆抗體購自美國Biolegend公司;S-P免疫組化試劑盒購自福州邁新生物技術開發(fā)有限公司。

        1.3免疫組化S-P法檢測兒童急性髓細胞性白血病骨髓細胞中Bcl-2和P-gp蛋白的表達[6-7]采用免疫組化S-P法檢測100例兒童急性髓細胞性白血病和50例非惡性血液病患兒骨髓細胞中Bcl-2和P-gp的表達。具體方法:1)首先提取骨髓單個核細胞,并用質量分數4%多聚甲醛固定;2)常規(guī)S-P免疫組化步驟檢測骨髓單個核細胞中Bcl-2和P-gp蛋白的表達,以PBS代替一抗作為陰性對照。

        1.4免疫組化結果判讀[6-7]Bcl-2和P-gp蛋白免疫組化結果均采用半定量法進行判讀。每張切片均隨機選取5個高倍鏡(×400)視野,分別按照染色強度和陽性細胞比例進行評分,然后兩者乘積作為結果,0~1分為(-),2~3分為弱陽性(+),4~5分為中等陽性(++),6~7分為強陽性(+++),其中陰性(-)、弱陽性(+)為陰性結果,中等陽性(++)、強陽性(+++)為陽性結果。

        1.5統(tǒng)計學處理采用SPSS 19.0進行統(tǒng)計分析,Bcl-2和P-gp蛋白的陽性表達率等計數資料用百分數表示,比較用χ2檢驗,Bcl-2和P-gp蛋白的相關性采用Spearman相關分析法分析,檢驗水準α=0.05。

        2 結果

        2.1不同患兒骨髓細胞中Bcl-2和P-gp蛋白表達的比較100例兒童急性髓細胞性白血病骨髓細胞中Bcl-2和P-gp的陽性表達率分別為72.00%(72/100)和44.00%(44/100),高于非惡性血液病患兒的4.00%(2/50)和6.00%(3/50),差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=61.664、22.371,P均<0.001)。

        2.2兒童急性髓細胞性白血病骨髓細胞中Bcl-2和P-gp蛋白表達的相關性100例兒童急性髓細胞性白血病骨髓細胞中Bcl-2和P-gp的表達呈正相關關系(rs=0.373,P<0.001)。見表1。

        表1 兒童急性髓細胞性白血病骨髓細胞中Bcl-2和P-gp蛋白表達的相關性 n

        注:rs=0.373,P<0.001

        3 討論

        兒童急性白血病是兒童常見的血液系統(tǒng)惡性腫瘤,一旦發(fā)病則會對患兒的生命健康安全造成嚴重威脅[1]。兒童急性白血病的治療目前多以化療和骨髓移植等為主[8]。然而隨著化療的進行,大多數患兒會出現耐藥現象,因此,兒童急性白血病的發(fā)病和耐藥機制的研究成為了近年來研究的熱點。而Bcl-2和P-gp均可導致包括急性白血病在內的惡性腫瘤的耐藥,是耐藥機制形成過程中的關鍵蛋白[9-10]。鄭轉珍等[11]的研究證實,兒童急性白血病骨髓細胞中Bcl-2存在高表達,且與髓外浸潤和患兒預后有關。饒若等[12]的研究證實,兒童急性白血病骨髓細胞中P-gp存在高表達。本研究結果顯示,100例兒童急性髓細胞性白血病骨髓細胞中Bcl-2和P-gp的陽性表達率分別為72.00%和44.00%,高于非惡性血液病患兒的4.00%和6.00%,差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=61.664、22.371,P均<0.001)。100例兒童急性髓細胞性白血病骨髓細胞中Bcl-2和P-gp的表達呈正相關關系(rs=0.373,P<0.001)。總之,兒童急性髓細胞性白血病的骨髓細胞中存在Bcl-2和P-gp蛋白的高表達,這可能有助于兒童急性髓細胞性白血病的診斷和預后判斷。

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