崔 帥，王 光 ，鄭菲菲 ，王利華

（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東青島 266109）

我國水貂養(yǎng)殖業(yè)在產(chǎn)生巨大經(jīng)濟(jì)效益的同時，也造成了嚴(yán)重的惡臭污染。水貂養(yǎng)殖場的惡臭污染主要來自于水貂的排泄物，惡臭物質(zhì)大部分由糞尿經(jīng)過微生物分解產(chǎn)生。由于水貂糞便中氮、磷含量高于其他畜禽糞便，因此產(chǎn)生的惡臭物質(zhì)更多。糞便中的氮被腐敗菌分解成NH3等揮發(fā)到大氣中，或被氧化成硝酸鹽滯留在土壤中造成土壤污染，也會隨地表水流入江河造成水污染；糞便中的磷被吸附于土壤表面，積累過多時會隨地表徑流排入江河湖海，造成水體的富營養(yǎng)化。茶多酚（TP）是茶葉提取物中的主要活性成分，飼糧中添加TP可以提高動物生產(chǎn)性能[1]，同時還能減少糞便惡臭的產(chǎn)生[2]。研究表明，TP含有較強(qiáng)的活性羥基，能夠與NH3發(fā)生中和、縮合反應(yīng)，減少NH3含量，TP具有正電區(qū)和負(fù)電區(qū)的環(huán)扼化合物，可與臭氣發(fā)生絡(luò)合、包莢等作用，對臭氣有較強(qiáng)吸附作用[3]，TP還可以對腸內(nèi)產(chǎn)生惡臭的細(xì)菌具有抑制作用，調(diào)整腸道微生態(tài)環(huán)境[4]，間接減少糞便惡臭物質(zhì)的產(chǎn)生。

有效微生物群（Effective Microorganisms，EM）是由厭氧性與好氧性微生物共同組成的微生物菌群，具有提高畜禽生長性能的作用[5]，還能有效清除糞便惡臭，改善畜禽養(yǎng)殖環(huán)境[6]。EM能提高動物腸道對蛋白質(zhì)的吸收，抑制腸道有害菌群，減少蛋白質(zhì)向氨及胺的轉(zhuǎn)化，減少隨糞便排出的含氮物質(zhì)；攝入的EM在生長繁殖的過程中能以NH3、H2S等物質(zhì)為營養(yǎng)，將其轉(zhuǎn)化吸收；EM有一定的固氮作用，減少堿性條件下銨態(tài)氮的揮發(fā)，繼而改善養(yǎng)殖環(huán)境。

本試驗旨在研究飼糧中添加不同水平TP和EM對育成期水貂糞便污染物排放量的影響，為TP和EM在水貂養(yǎng)殖除臭方面的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 TP購自濟(jì)南七彩化工有限公司，純度98%以上。EM購自山東億安奇樂有限公司，組成成分為酵母菌、乳酸菌、芽孢菌、光合菌和放線菌等菌種，活菌總數(shù)≥10億個/g。

1.2 試驗動物及試驗設(shè)計 選取400只60日齡同品種咖啡色、體重相近、健康的育成前期水貂，其中母貂240只，公貂160只。試驗分8組，每組20個重復(fù)，公、母各10個重復(fù)（每籠為1重復(fù)，其中公貂2只/籠，母貂3只/籠）。EM的添加水平為0、200 mg/kg， TP的添加量分別在0、0.05%、0.1%和0.2%。8組的日糧處理分別為0 EM+0 TP、0 EM+0.05% TP、0 EM+0.1%TP、0 EM+0.2% TP、200 mg/kg EM+0 TP、200 mg/kg EM+0.05% TP、200 mg/kg EM+0.1% TP、200 mg/kg EM+0.2% TP。試驗期8周，其中前4周為試驗Ⅰ期，后4周為試驗Ⅱ期。

1.3 試驗飼糧及飼養(yǎng)管理 試驗基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。試驗于青島市即墨某水貂養(yǎng)殖場進(jìn)行，試驗水貂采用棚舍飼養(yǎng)，免疫程序已完成，飼糧以鮮料形式飼喂，每日2次，自由飲水，其他飼養(yǎng)管理均按水貂場正常飼養(yǎng)方法進(jìn)行。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)成分

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 水貂糞便惡臭氣體生成量的測定 試驗期每周清1 次糞，清糞后第 6 、12 、24 、48、72 、96 、144 h 時分別測定每組的H2S、NH3、CO2，直至下次清糞為止，試驗數(shù)據(jù)包括8周的測定結(jié)果。測量時距離糞便2～3 cm處測定，每組各選取6個測定點，記錄每次測定數(shù)據(jù)。

NH3采用便攜式氨氣檢測儀（TN4-NH3）測定；H2S采用H2S氣體檢測儀（TN4-H2S）測定；CO2采用二氧化碳檢測儀測定。

1.4.2 水貂糞便污染物含量的測定 分別在試驗進(jìn)行到第3、6周時，每組水貂選6個重復(fù)（公、母各半），每天采集水貂新鮮糞便，連續(xù)取樣，并用10%的硫酸固氮，密封后冷凍保存；同時取部分糞便于65 ℃烘箱烘干制成風(fēng)干樣，測定糞便中總氮、總磷、氨氮、硝酸鹽氮、亞硝酸鹽氮。

總氮采用凱氏定氮法測定，具體步驟參照GB/T 6432-1994；總磷采用鉬藍(lán)比色法，具體步驟參照GB/T 5009.87-2003；氨氮采用納氏試劑分光光度法，具體步驟參照HJ 535-2009（取0.5 g新鮮糞便溶于500 mL蒸餾水中，充分混勻，取上清液為待測液）；硝酸鹽氮測定具體步驟參考GB 5009.33-2010；亞硝酸鹽氮測定具體步驟參考GB/T 13085-2005；COD采用重鉻酸鉀法，具體步驟參考GB 11914-89（取0.5 g新鮮糞便溶于500 mL蒸餾水中，充分混勻，取混合液為待測液）；TOC利用德國elementar TOC檢測分析儀進(jìn)行測定。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)利用Excel 2007進(jìn)行整理，有害氣體指標(biāo)用SAS 9.3軟件的MIXED過程先對性別預(yù)分析，性別效應(yīng)不顯著則按糞便污染物相同的方法，分別對EM、TP及二者的互作效應(yīng)進(jìn)行方差分析，計算最小二乘均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)誤，并利用Tukey法對最小二乘均數(shù)進(jìn)行多重比較，檢驗誤差為5%水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 TP和EM對水貂糞便惡臭氣體生成量的影響 由表2可知，飼糧中添加TP對水貂糞便48 h和120 h 的NH3生成量有顯著影響（P＜0.05），隨著TP添加量的增加，NH3生成量增加，0.2%TP組的NH3生成量顯著高于0 TP組（P＜0.05）。與0 EM組相比，飼糧中添加200 mg/kg EM對可顯著降低48 h水貂糞便NH3生成量（P＞0.05）。對24、72、96 h NH3生成量，TP與EM存在著互作效應(yīng)（P＜0.05）。

由表3可知，飼糧中添加TP對水貂糞便H2S生成量無顯著影響（P＞0.05），TP與EM也無互作效應(yīng)（P＞0.05）。飼糧中添加200 mg/kg EM可以顯著降低72、96 h水貂糞便H2S生成量（P＜0.05）。

表4可知，飼糧中添加TP可顯著影響24、72 、120 h 水貂糞便 CO2生成量（P＜0.05）。在 24 h和120 h ，0.1% TP添加組CO2生成量顯著低于0 TP組（P＜0.05）；在72 h時，0.2% TP添加組CO2生成量高于0 TP組（P＜0.05）。飼糧中添加200 mg/kg EM可顯著影響水貂糞便CO2生成量（P＜0.05），在24、96、120 h時，EM添加組的CO2生成量高于不添加EM組（P＜0.05），在72 h和144 h時，EM添加組可顯著降低CO2生成量（P＜0.05）。

2.2 TP和EM對水貂糞便污染物含量的影響 由表5可知，在試驗I期，TP對糞便中總磷的含量影響顯著（P＜0.05），對其他幾種糞便污染物含量均沒有顯著影響（P＞0.05），0.2%及0.05% TP添加組糞便中總磷含量均顯著高于0 TP組（P＜0.05）。飼糧中添加EM 后顯著降低了水貂糞便中總氮的總磷含量（P＜0.05），對其他幾種污染物含量沒有顯著影響（P＞0.05）。

在試驗Ⅱ期，TP對糞便中總氮的含量影響顯著（P＜0.05），對其他幾種糞便污染物含量均沒有顯著影響（P＞0.05）。0.1%及0.2% TP添加組糞便中氨氮含量均顯著低于0 TP組（P＜0.05）。飼糧中添加EM后水貂糞便中氨氮、總磷、亞硝酸鹽氮含量顯著降低（P＜0.05），對其他幾種污染物含量沒有顯著影響（P＞0.05）。TP 及EM互作效應(yīng)對各污染物的影響均不顯著（P＜0.05）。

表2 TP和EM對水貂糞便NH3生成量的影響

表3 TP和EM對水貂糞便H2S生成量的影響

表4 TP和EM對水貂糞便CO2生成量的影響

3 討 論

3.1 TP和EM對水貂糞便有害氣體生成量的影響 畜禽排泄的糞便會產(chǎn)生大量的惡臭，其中主要包括氮化物（NH3、甲胺）及硫化物（H2S、甲基硫醇），尤其是H2S和NH3等易溶于水，動物吸入體內(nèi)會引起呼吸道黏膜損傷。畜禽糞便分解過程還會產(chǎn)生CO2等溫室氣體，CO2本身無害，但可做為表示空氣的污染程度間接指標(biāo)。大量的NH3、硫化物、甲烷等會嚴(yán)重污染養(yǎng)殖場周圍的空氣[7]。研究表明，當(dāng)NH3含量達(dá)到50 mg/kg 時，會降低仔豬增重率，更高濃度的NH3還會造成氨中毒[8-9]。家畜在長期低濃度的H2S 作用下，會產(chǎn)生體重減輕、抗病力下降等問題。TP和EM都有去除糞便惡臭，改善養(yǎng)殖環(huán)境的作用，已在畜禽養(yǎng)殖領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。邱深本[10]研究認(rèn)為，TP可以抑制腸道內(nèi)產(chǎn)生惡臭的細(xì)菌，在雞飼料中添加后雞糞惡臭明顯減輕。有研究表明，在豬飼料中添加0.2 %TP喂養(yǎng)1月齡左右的豬，能顯著減少NH3濃度、酚和糞酚含量，臭味也明顯降低[11]。在奶牛飼糧中添加1%的烏龍茶粉末，可以顯著降低奶牛胃腸道中NH3、H2S等有害氣體的含量[12]。王軍等[13]研究表明，在AA肉雞飼糧中添加EM制劑，NH3濃度減少了21.26%。于桂陽等[14]用EM 菌料飼喂生長肥育豬1 周后，發(fā)現(xiàn)豬舍糞尿產(chǎn)生的臭氣明顯減少，20 d 后臭氣明顯減輕，豬舍NH3和H2S濃度明顯降低。本試驗中未證實 TP能減少水貂糞便NH3、H2S和CO2的生成量，但EM可以降低水貂糞便NH3、H2S的生成量，與他人研究結(jié)果一致，說明EM具有一定的除臭作用。有害氣體的準(zhǔn)確測定是比較困難的，溫度、氣流及糞便的外表面積等很多因素都會影響測定結(jié)果。

3.2 TP和EM對水貂糞便污染物含量的影響 水貂糞便中含有多種污染物，其中的含氮、含磷物質(zhì)會嚴(yán)重污染養(yǎng)殖環(huán)境，糞便中的氮、磷含量越高，惡臭物質(zhì)產(chǎn)生越多，糞便臭味也越大。水貂是肉食動物，糞便中氮、磷含量高于其他畜禽，這些氮和磷進(jìn)入土壤后，會被轉(zhuǎn)化成硝酸鹽和磷酸鹽，不僅會污染土壤，還可能通過土壤沖刷污染地表水和地下水，大量的氮磷污染會造成水體的富營養(yǎng)化[15]。糞便中的氨氮揮發(fā)到大氣中，會成為酸雨形成的一個影響因素。吳建敏等[16]研究表明，糞便中總磷、氨氮和總氮是監(jiān)控畜禽糞便污染的關(guān)鍵。另外，未經(jīng)處理的糞便中COD值很高，糞污若排入江河湖泊中會造成水質(zhì)嚴(yán)重惡化。飼糧中添加TP只減少糞便中氨氮含量，對其他污染物的排出量沒有影響。飼糧中添加200 mg/kg EM對減少糞便總氮和總磷含量有顯著作用，還能減少氨氮和亞硝酸鹽氮含量，原因可能是EM提高了水貂對粗蛋白和磷的消化率（消化試驗結(jié)果數(shù)據(jù)未發(fā)表），減少了隨糞便排出的氮含量和磷含量，以及EM對有害菌的抑制作用而減少氨氮的生成。

表5 TP和EM對水貂糞便污染物含量的影響

4 結(jié) 論

飼糧中添加TP沒有減少水貂糞便NH3和H2S生成量，但可降低糞便中氨氮含量。飼糧中添加200 mg/kg EM可以降低水貂糞便NH3和H2S氣體生成量，減少糞便中總氮、氨氮和總磷含量以及亞硝酸鹽氮含量。

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