趙 劍，孫得發(fā)*，邊四輩，譚 權(quán)

（諾偉司國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司，上海 200080）

油脂是肉雞飼料中重要的能量飼料之一，在肉雞飼料中添加油脂能提高肉雞的增重、飼料利用率和飼料能量沉積[1]。而在高溫高濕環(huán)境下或金屬離子催化作用下，油脂中的不飽和鍵易被氧化生成醛、酮及羥酸等氧化產(chǎn)物，這些氧化產(chǎn)物的細(xì)胞毒作用會(huì)誘發(fā)動(dòng)物腸道結(jié)構(gòu)和功能的變化，如腸道中起屏障作用的潘氏細(xì)胞數(shù)量下降[2]和腸絨毛上皮細(xì)胞的周轉(zhuǎn)加速[3]，從而影響飼料能量的利用，降低肉雞的生長(zhǎng)速度和料肉比[4]。在試驗(yàn)條件下，氧化程度較高的油脂（過(guò)氧化值達(dá)180～210 meq/kg）對(duì)動(dòng)物機(jī)體的傷害極大，而天然或人工合成的抗氧化劑可以通過(guò)提供氫原子或電子中止油脂氧化過(guò)程中的自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。Lu等[4-5]研究表明，在使用氧化油脂的日糧中添加乙氧基喹啉能降低動(dòng)物機(jī)體的氧化應(yīng)激水平并保持良好的生產(chǎn)性能。在實(shí)際生產(chǎn)中，飼料廠通常只存在油脂輕度氧化的問(wèn)題。因此，研究輕度氧化油脂對(duì)肉雞腸道健康和生產(chǎn)性能的影響更具實(shí)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和日糧 試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將360只1日齡平均體重相似（約40.5 g）的羅斯肉雞隨機(jī)分成3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。新鮮油脂組日糧中使用的油脂為新鮮雞油，氧化油脂組使用輕度氧化雞油，抗氧化劑組在氧化油脂組日糧基礎(chǔ)上添加0.02%的愛克多TM（主要成分為乙氧基喹啉和沒(méi)食子酸丙酯，由諾偉司國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司提供）。試驗(yàn)所用的雞油為新鮮肉雞腹脂通過(guò)加熱熔出。新鮮雞油除一部分冷凍儲(chǔ)存外，其余部分則放入烘箱高溫通氣促進(jìn)其氧化。氧化過(guò)程中每天按GB 5009.227-2016的方法測(cè)定其過(guò)氧化值，當(dāng)其過(guò)氧化值超過(guò)0.20 g/100 g時(shí)即認(rèn)為油脂氧化，可取出冷藏備用（本試驗(yàn)測(cè)定的過(guò)氧化值為0.75 g/100 g）。而新鮮雞油的過(guò)氧化值經(jīng)測(cè)定為0.15 g/100 g。

肉雞采用單層籠養(yǎng)。試驗(yàn)期20 d。試驗(yàn)過(guò)程中自由采食和飲水。按飼養(yǎng)手冊(cè)要求進(jìn)行飼養(yǎng)管理和免疫。試驗(yàn)采用玉米-豆粕型粉狀日糧，各處理組油脂的添加量為2.1%?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

1.2 生長(zhǎng)性能測(cè)定 以重復(fù)為單位，分別記錄肉仔雞1、10、20日齡的體重及飼料消耗量，并計(jì)算耗料增重比。1.3 腳脛色澤和腳墊評(píng)分 在試驗(yàn)第20 天將所有雞的腳脛部分對(duì)比羅氏比色扇評(píng)分[6]，并根據(jù)腳墊破損程度進(jìn)行評(píng)分，分值范圍為0～5分。

表1 基礎(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)成分

1.4 內(nèi)臟指數(shù)和小腸長(zhǎng)度 分別在試驗(yàn)第10天和第20天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抓取4只雞，空腹稱量活體重后處死。解剖取其肝臟、脾臟、心臟和去內(nèi)容物的小腸，用吸水紙擦干表面后稱量重量并計(jì)算其相對(duì)于活體重的臟器指數(shù)。測(cè)量小腸長(zhǎng)度時(shí)先去除附著在腸道上的胰腺和脂肪，然后固定腸道的一端并輕拉另一端成直線，待腸道恢復(fù)形狀不再回縮時(shí)，用直尺量取總長(zhǎng)度。

1.5 小腸切片制作和形態(tài)學(xué)觀察 剪取10日齡肉仔雞的十二指腸、空腸和回腸腸段各0.5 cm，用10%的甲醛溶液固定后送樣制成石蠟切片，進(jìn)行HE染色。染色標(biāo)本在50倍的顯微鏡下選取4個(gè)有完整絨毛的區(qū)域拍照并用Image-Pro Plus 5.0 圖像分析軟件測(cè)量絨毛高度、隱窩深度、絨毛寬度和腸壁厚度。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并采用單因素方差分析（One-Way ANOVA），結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P＜0.05認(rèn)定為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 輕度氧化油脂對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、腳脛色澤和腳墊評(píng)分的影響 由表2可知，3個(gè)試驗(yàn)組肉仔雞在0～10日齡和11～20日齡的平均日增重、平均日采食量和耗料增重比均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。在11～20日齡，使用抗氧化劑比不使用抗氧化劑表現(xiàn)出改善肉雞增重和耗料增重比的趨勢(shì)（P=0.08）。3個(gè)試驗(yàn)組在腳脛色澤和腳墊評(píng)分上也無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.2 輕度氧化油脂對(duì)臟器指數(shù)和小腸長(zhǎng)度的影響 由表3可知，在0～10日齡和11～20日齡，各處理的肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)和小腸長(zhǎng)度均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。在0～10日齡，各處理的小腸指數(shù)和心臟指數(shù)均無(wú)顯著差異（P＞0.05），但在11～20日齡，氧化油脂組肉仔雞的小腸指數(shù)顯著高于其他2組（P＜0.05），其心臟指數(shù)顯著低于新鮮油脂組（P＜0.05）。

2.3 輕度氧化油脂對(duì)小腸絨毛形態(tài)的影響 由圖1可知，飼喂輕度氧化雞油導(dǎo)致10日齡肉仔雞空腸絨毛中出現(xiàn)不同程度的出血，且絨毛中的杯狀細(xì)胞數(shù)量明顯增多。其余兩組肉雞的空腸絨毛切片中未觀察到此現(xiàn)象。由表4可知，氧化油脂組和抗氧化劑組的十二指腸絨毛高度和回腸絨毛寬度都大于新鮮油脂組，但只有抗氧化劑組肉雞的十二指腸絨毛高度和回腸絨毛寬度與新鮮油脂組差異顯著（P＜0.05）。飼喂氧化油脂對(duì)小腸形態(tài)學(xué)的影響在空腸段表現(xiàn)得更為明顯，新鮮油脂組肉雞空腸的絨毛高度、隱窩深度和絨毛寬度均顯著低于其他2組（P＜0.05）。

表2 輕度氧化油脂對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能、腳脛色澤和腳墊評(píng)分的影響

圖1 各組10日齡肉雞空腸絨毛切片

3 討 論

3.1 輕度氧化油脂對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響 油脂氧化后不僅自身能值降低，而且生成一系列復(fù)雜的初級(jí)氧化產(chǎn)物和次級(jí)氧化產(chǎn)物，這些物質(zhì)被動(dòng)物攝食后會(huì)影響機(jī)體正常的生理功能。多數(shù)研究表明，使用氧化油脂會(huì)影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能，如大鼠攝食含氧化油脂的飼料后增重降低，嚴(yán)重者甚至死亡，在肉雞、水貂和魚類試驗(yàn)上都得到類似結(jié)果[7]。Dibner等[3]研究發(fā)現(xiàn)，給肉雞飼喂含3%的過(guò)氧化值高達(dá)212 meq/kg油脂的日糧，嚴(yán)重降低了21日齡肉仔雞的體重。本試驗(yàn)中，肉仔雞飼料中添加2.1%的輕度氧化油脂并未顯著影響平均日增重。另外，Lu等[4]在肉雞日糧中添加3%的過(guò)氧化值高達(dá)180 meq/kg的氧化豆油，添加抗氧化劑較不添加顯著提高了肉雞21日齡體重。本試驗(yàn)中，氧化油脂組和抗氧化劑組的生長(zhǎng)性能指標(biāo)未見顯著差異。田曉燕等[8]結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)綜述認(rèn)為，肉雞在采食低能量飼料時(shí)其采食量會(huì)增加。本試驗(yàn)中，含氧化油脂的飼料表現(xiàn)出提高采食量和降低飼料利用率的趨勢(shì)，這很可能是由于氧化油脂組和抗氧化劑組飼料的實(shí)際能值因油脂氧化而降低。

表4 輕度氧化雞油及抗氧化劑對(duì)10日齡肉仔雞小腸形態(tài)的影響

表3 輕度氧化雞油及抗氧化劑對(duì)肉仔雞臟器指數(shù)和小腸長(zhǎng)度的影響

3.2 輕度氧化油脂對(duì)肉仔雞腳脛著色和腳墊評(píng)分的影響飼料中的色素物質(zhì)如類胡蘿卜素等吸收進(jìn)入血液并在肉雞腳脛沉積著色。色素沉積和腸道吸收功能密切相關(guān)。Zhao等[6]研究表明，球蟲嚴(yán)重感染的腸道會(huì)降低色素吸收入血的能力，從而在外觀上表現(xiàn)出腳脛色澤評(píng)分下降。但本研究中未觀察到各處理間腳脛色澤的顯著變化，因此認(rèn)為輕度氧化油脂并未大量破壞飼料中的色素物質(zhì)或嚴(yán)重?fù)p傷腸道。

腳墊是肉雞承重的主要部位，正常腳墊為黃色且柔軟，輕度傷害則腳墊發(fā)干并略增厚，隨著傷害程度的增加腳墊出現(xiàn)明顯增厚和鱗片干燥發(fā)黑，嚴(yán)重時(shí)則腳墊腫脹、開裂出血。本試驗(yàn)中各處理肉仔雞腳墊評(píng)分間沒(méi)有顯著差異但屬于中度損傷，應(yīng)該與使用氧化油脂無(wú)關(guān)，可能與籠養(yǎng)設(shè)備有關(guān)，因?yàn)橄鄬?duì)籠養(yǎng)，地面平養(yǎng)對(duì)腳墊的損傷較小。

3.3 輕度氧化油脂對(duì)肉仔雞內(nèi)臟發(fā)育和腸道健康的影響油脂氧化的副產(chǎn)物會(huì)致使幼雛小腸等器官肥大[9]，這可能是器官受氧化應(yīng)激后的一種代償性反應(yīng)。本研究也發(fā)現(xiàn)氧化油脂組肉雞在20日齡時(shí)小腸器官指數(shù)明顯更大。Dibner等[3]研究發(fā)現(xiàn)，飼喂氧化油脂提高了小腸隱窩干細(xì)胞的周轉(zhuǎn)率，其生命半衰期縮短至不足24 h。這說(shuō)明食用了氧化油脂的動(dòng)物其小腸組織的維持需要明顯增加而飼料能量的利用效率會(huì)降低，其機(jī)理被認(rèn)為與氧化油脂和細(xì)胞膜的互相作用有關(guān)。與飼喂氧化油脂的水貂出現(xiàn)腸絨毛萎縮不同[10]，本研究結(jié)果顯示輕度氧化油脂刺激肉仔雞小腸絨毛變長(zhǎng)變寬和隱窩變深。分析認(rèn)為，少量的油脂氧化副產(chǎn)物可能會(huì)刺激隱窩干細(xì)胞加速分化進(jìn)而促進(jìn)絨毛發(fā)育，但即便是輕度氧化的油脂也仍然對(duì)小腸絨毛產(chǎn)生組織結(jié)構(gòu)學(xué)上的損害，表現(xiàn)在氧化油脂組肉雞空腸絨毛的出血和杯狀細(xì)胞增多，說(shuō)明氧化產(chǎn)物對(duì)肉雛雞消化道的組織結(jié)構(gòu)有損害作用[11]。

抗氧化劑如乙氧基喹啉可用于防止飼料和飼料原料中不飽和脂肪酸的氧化，其對(duì)熬制的動(dòng)物脂肪更為有效[3]。飼料中添加乙氧基喹啉和沒(méi)食子酸丙酯能提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能和穩(wěn)定組織中的脂質(zhì)成分，促氧化的金屬離子會(huì)被沒(méi)食子酸丙酯螯合，從而使油脂的穩(wěn)定性提高，尤其在機(jī)體內(nèi)部遭受氧化應(yīng)激的情況下，這些成分會(huì)成為機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的一部分[4]。機(jī)體抵抗氧化應(yīng)激的第一步是啟動(dòng)抗氧化系統(tǒng)，抗氧化劑與自由基結(jié)合降低自由基對(duì)細(xì)胞的傷害，并在還原系統(tǒng)的輔助下恢復(fù)抗氧化劑的抗氧化能力[12]。本研究結(jié)果顯示，在含輕度氧化油脂的日糧中添加抗氧化劑，一定程度上能在組織結(jié)構(gòu)層面降低氧化油脂對(duì)小腸的損害，原因可能是抗氧化劑可以結(jié)合自由基阻止油脂被繼續(xù)氧化，但并不能阻止已生成的氧化產(chǎn)物對(duì)組織的危害。

4 結(jié) 論

肉仔雞飼料中使用2.1%輕度氧化雞油不會(huì)對(duì)生長(zhǎng)性能造成顯著影響，但會(huì)造成空腸組織結(jié)構(gòu)的改變，具體表現(xiàn)在空腸絨毛變長(zhǎng)變寬和隱窩變深，以及小腸指數(shù)增加。

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