郭玉光，杜紅方，王 敏，馮新雨，陳書琴，郝甜甜

（廣東溢多利生物科技股份有限公司，廣東珠海 519060）

乳仔豬消化系統(tǒng)發(fā)育不完善，消化酶活性低，對植物性養(yǎng)分的有效利用率存在功能性障礙，斷奶前主要依靠母乳的營養(yǎng)，斷奶后，仔豬內(nèi)源酶活性大幅下降，在隨后的2周內(nèi)逐漸恢復(fù)[1]，但對固體飼料的消化利用率仍然較低，無法利用的營養(yǎng)物質(zhì)被后腸有害微生物發(fā)酵利用，極易導(dǎo)致腹瀉[2]。因此，尋找改善仔豬消化功能、降低腹瀉率、促進生長的方案尤為重要。

研究表明，飼糧中添加酶制劑能夠補充內(nèi)源酶的不足，消除飼糧中非淀粉多糖等抗?fàn)I養(yǎng)因子，提高干物質(zhì)、粗蛋白和總能的表觀消化率，改善機體健康狀況[3-4]。葉楠等[5]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)飼糧中的木聚糖含量達到7.54%時，添加木聚糖酶能夠顯著提高仔豬回腸內(nèi)容物乙酸等揮發(fā)性脂肪酸含量，顯著降低盲腸內(nèi)容物氨濃度，顯著增加盲腸內(nèi)容物雙歧桿菌數(shù)量，提高仔豬日增重。邊連全等[6]報道，在仔豬飼糧中復(fù)合添加0.008%的木聚糖酶和0.008%的α-半乳糖苷酶，能夠顯著提高仔豬粗蛋白、粗脂肪和粗纖維的消化率，降低腹瀉率。本試驗通過分析不同添加水平的復(fù)合酶對仔豬的生長性能、血液生化指標(biāo)和養(yǎng)分消化率的影響，探究復(fù)合酶制劑的最適添加量，為常規(guī)仔豬日糧中復(fù)合酶的添加提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 試驗用復(fù)合酶（溢多酶A-F888S）由廣東溢多利生物科技股份有限公司提供，主要成分為木聚糖酶3 000 U/g、蛋白酶5 000 U/g、甘露聚糖酶200 U/g、纖維素酶2 000 U/g、α-淀粉酶250 U/g、葡聚糖酶10 000 U/g。

1.2 試驗設(shè)計及試驗日糧 選取360頭35日齡的健康、長勢均勻的杜×長×大三元仔豬，隨機分為4個處理，每個處理3個重復(fù)，每重復(fù)30頭（公母各半）。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗1組、2組、3組分別在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上添加300、500、1 000 g/t復(fù)合酶。預(yù)試期7 d，正式試驗期為30 d?；A(chǔ)飼糧參照NRC（2012）標(biāo)準(zhǔn)配制，原料組成及營養(yǎng)成分見表1。

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 生長性能 分別于試驗開始和結(jié)束時，逐頭空腹稱量仔豬初始體重和終末體重，計算仔豬平均日增重（ADG）；試驗期間以欄為單位記錄喂料量和剩余料量，計算仔豬平均日采食量（ADFI）、ADG和耗料增重比（F/G）。計算公式如下：

1.3.2 血液生化指標(biāo) 于試驗第30天，每個重復(fù)挑選1頭接近平均體重的試驗豬，稱重后每頭豬前腔靜脈采血5 mL，3 000 r/min離心10 min制備血清樣品，分裝后存放于-20℃待測。

采用放射免疫法測定三碘甲狀腺原氨酸（T3）和甲狀腺素（T4），使用日立7600全自動生化儀測定總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）和尿素氮（UN）的含量。采用豬免疫球蛋白酶聯(lián)免疫反應(yīng)試劑盒檢測血清免疫球蛋白A（IgA）和免疫球蛋白G（IgG）含量，試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，具體操作按試劑盒說明進行。

1.3.3 養(yǎng)分消化率 于試驗第23天，從各處理組的每個重復(fù)中選擇接近平均體重、健康的公母仔豬各1頭，移入豬代謝籠中（購自北京環(huán)宇中科凈化工程有限公司），預(yù)試5 d后，在試驗第28、29、30天用0.25%三氧化二鉻作為外源指示劑，采用全收糞法測定飼料中總能、粗蛋白、干物質(zhì)的消化率。收糞時間為每天08:00、12:00和16:00。糞便收集后直接移入60～65℃烘箱中干燥至恒重，取出后粉碎過40目篩待測。飼料和糞樣中的粗蛋白用凱氏定氮法測定，能量用全自動氧彈測熱儀測定。養(yǎng)分消化率計算公式如下：

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

某養(yǎng)分消化率（%）=[1-（b×c）/（a×d）]×ad式中，a為飼料中某養(yǎng)分含量（%）；b為糞樣中某養(yǎng)分含量（%）；c為飼料中鉻含量（%）；d為糞樣中鉻含量（%）。

1.4 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)經(jīng)過Excel處理后，利用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行方差分析，差異顯著時采用Duncan's方法進行多重比較，試驗結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合酶對仔豬生長性能的影響 如表2所示，加酶試驗組仔豬生長性能較對照組有不同程度的改善，其中試驗2組效果最佳。與對照組相比，試驗2組末重提高了5.47%（P＜0.05），日增重提高了9.05%（P＜0.05），F(xiàn)/G降低了3.25%（P＜0.05）。試驗各組間的日采食量沒有顯著差異（P＞0.05）。試驗1、2、3組腹瀉率較對照組分別降低了3.83%、4.76%、4.17%（P＜0.05）。

2.2 復(fù)合酶對仔豬血液生化指標(biāo)的影響 如表3所示，與對照組相比，試驗2組血清中T3提高24.09%（P＜0.05）、TP提 高 16.66%（P＜0.05）、GLB提 高20.96%（P＜0.05），UN 降低11.73%（P＜0.05），IgG提高10.58%（P=0.08）。其余各組間血液生化指標(biāo)沒有顯著差異（P＞0.05）。

2.3 復(fù)合酶對仔豬養(yǎng)分消化率的影響 如表4所示，與對照組相比，試驗2組干物質(zhì)消化率提高8.79%（P＜0.05），粗蛋白提高10.43%（P＜0.05），能量表觀消化率提高7.13%（P＜0.05）。其余各組間養(yǎng)分消化率差異不顯著（P＞0.05）。

3 討 論

3.1 飼糧中添加復(fù)合酶對仔豬生長性能的影響 本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加復(fù)合酶能夠有效改善仔豬的ADG，提高飼料轉(zhuǎn)化效率。在飼糧中添加機體不能自行分泌的非淀粉多糖酶，能夠消除飼糧中非淀粉多糖造成的黏度效應(yīng)和籠蔽效應(yīng)，間接提高養(yǎng)分消化率；此外，飼糧中添加蛋白酶和淀粉酶，能夠有效彌補仔豬消化道發(fā)育不健全造成的內(nèi)源酶不足，直接提高干物質(zhì)、粗蛋白等養(yǎng)分的消化利用率，改善仔豬生長性能。同類研究中，劉利等[7]報道，在玉米-豆粕型飼糧中添加1 000 g/t復(fù)合酶（蛋白酶、淀粉酶、木聚糖酶和纖維素酶組成），仔豬ADG提升了44.1 g/d，F(xiàn)/G降低0.13；任建波等[8]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加組成酶種不同的復(fù)合酶，均對仔豬的生產(chǎn)性能有所改善，但改善幅度存在較大差異，預(yù)示著復(fù)合酶的應(yīng)用效果與組成酶種及搭配比例相關(guān)。

表2 復(fù)合酶對仔豬的生長性能的影響

表3 復(fù)合酶對仔豬血液生化指標(biāo)的影響

表4 復(fù)合酶對仔豬干物質(zhì)、粗蛋白和能量表觀消化率的影響 %

本試驗還發(fā)現(xiàn)，復(fù)合酶的作用效果同樣與添加水平有關(guān)，1 000 g/t復(fù)合酶添加組的仔豬生長性能高于300 g/t復(fù)合酶添加組，但低于500 g/t復(fù)合酶添加組，過高劑量的復(fù)合酶對仔豬生長性能并沒有進一步的改善效果。類似研究中，邊連全等[6]報道，飼糧中添加0.008%α-半乳糖苷酶和0.008%木聚糖酶，斷奶仔豬ADG和ADFI顯著高于添加0.012%α-半乳糖苷酶和0.012%木聚糖酶組。非淀粉多糖酶將底物酶解成相應(yīng)的單糖和寡糖，消除了非淀粉多糖的抗?fàn)I養(yǎng)作用，同時寡糖的生成有助于改善腸道菌群結(jié)構(gòu)，促進有益菌增殖，抑制有害菌在腸壁的黏附。研究證實，在飼糧中添加非淀粉多糖酶能夠有效降低斷奶仔豬糞便中的大腸桿菌數(shù)量[9]，提高乳酸菌和雙歧桿菌的數(shù)量[10]。但是，高劑量的非淀粉多糖酶沒有表現(xiàn)出進一步的促生長效果，可能與酶解產(chǎn)物更傾向于生成單糖，而相應(yīng)的寡糖生成量減少，益生效果減弱有關(guān)。另一方面，有試驗發(fā)現(xiàn)在飼糧中添加1 000 U/kg和3 000 U/kg的淀粉酶能夠提高肉雞前腸內(nèi)容物淀粉酶、總蛋白酶和胰蛋白酶活性，但高劑量的淀粉酶（9 000 U/kg）添加組總蛋白酶和淀粉酶活性呈下降趨勢[11]。綜上所述，高劑量的復(fù)合酶可能會弱化酶解產(chǎn)物的益生效果，并影響機體內(nèi)源酶活性，不利于畜禽生產(chǎn)性能的提高。

3.2 飼糧中添加復(fù)合酶對仔豬腹瀉的影響 本研究結(jié)果顯示，飼糧中添加復(fù)合酶能夠顯著降低仔豬的腹瀉率。腹瀉是仔豬斷奶后的常見疾病，根據(jù)產(chǎn)生原因可分為營養(yǎng)性腹瀉和病理性腹瀉兩大類。過往報道顯示，斷奶仔豬腹瀉多與斷奶過程中受到的應(yīng)激有關(guān)，其中以食物由液體乳汁轉(zhuǎn)變?yōu)楣腆w飼料導(dǎo)致的營養(yǎng)性應(yīng)激最突出。此前研究中，許梓榮等[12]報道，稻谷型飼糧中添加復(fù)合酶能夠有效提高斷奶仔豬對固體飼糧中養(yǎng)分的消化率，降低營養(yǎng)性腹瀉率；Omogbenigun等[13]研究證實，玉米-豆粕型日糧中添加復(fù)合酶同樣能夠顯著改善仔豬的養(yǎng)分消化率，降低腹瀉發(fā)生率。王向榮等[14]進一步研究發(fā)現(xiàn)，仔豬腹瀉率和腹瀉指數(shù)的變化是通過提高飼糧養(yǎng)分利用率實現(xiàn)的。本研究中，復(fù)合酶添加組干物質(zhì)、粗蛋白、能量表觀消化率均明顯高于對照組，同時腹瀉率顯著低于對照組，與王向榮等[14]的研究一致。

3.2 飼糧中添加復(fù)合酶對仔豬血液生化指標(biāo)的影響 本研究結(jié)果顯示，飼糧中添加復(fù)合酶能夠顯著提高血清中的TP濃度，降低UN含量。血清中的TP和UN是反映動物機體蛋白質(zhì)代謝狀況的有效指標(biāo)。UN作為機體蛋白質(zhì)代謝的終產(chǎn)物之一，能夠反映機體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝水平，而血清中UN含量提高，則意味著氨基酸沉積為體蛋白的效率下降[15]。血清中的TP濃度是評價機體蛋白質(zhì)合成代謝水平的有效指標(biāo)，通常TP濃度越高則體蛋白合成效率越高。喬家運等[16]報道，在飼糧中添加由木聚糖酶和甘露聚糖酶組成的復(fù)合酶，能夠有效提高血清中的TP濃度，降低UN含量，并且不同來源的復(fù)合酶對血清中蛋白質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)效果具有一致性，與本研究結(jié)果相似?？梢?，飼糧中添加復(fù)合酶不僅能夠提高蛋白質(zhì)消化率，而且會改善機體內(nèi)氨基酸的沉積效率和體蛋白的合成效率。

血清中TP和UN濃度的變化可能與甲狀腺激素濃度變化有關(guān)。甲狀腺激素是維持機體生長發(fā)育的重要激素，主要包含T3和T4。在機體內(nèi)T3的活性是T4的6～7倍，因此T3是機體內(nèi)發(fā)揮作用的主要甲狀腺激素[17]。甲狀腺激素具有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)代謝的重要作用，機體內(nèi)甲狀腺激素濃度的提高能夠增強促生長因子（IGF-1）作用效果，促進蛋白質(zhì)沉積，協(xié)同并加強外周組織對糖的利用。本研究中，飼糧中添加復(fù)合酶顯著提高了仔豬血清中T3濃度，可能預(yù)示著復(fù)合酶對機體蛋白質(zhì)代謝的調(diào)控是通過影響甲狀腺激素的分泌實現(xiàn)的。

4 結(jié) 論

飼糧中添加復(fù)合酶能夠有效提高仔豬粗蛋白、干物質(zhì)和能量的表觀消化率，增加血清TP含量，降低血清UN濃度，提高ADG和飼料轉(zhuǎn)化效率，改善仔豬生長性能，其中以添加500 g/t復(fù)合酶的效果最佳。

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