張 薇， 劉 丹， 張廣煒， 張 偉， 李紅芳， 楊志甫， 郭新玲

載脂蛋白A1(ApolipoproteinA-1，apoA-1)是高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)的主要結(jié)構(gòu)和功能組分，約占其蛋白質(zhì)含量的75%，其自身抗體抗apoA-1 IgG一方面通過影響apoA-1的功能繼而導(dǎo)致HDL功能障礙，參與到動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病中[1];另一方面，抗apoA-1 IgG能夠增加促炎性相關(guān)分子，如白細(xì)胞介素8(IL-8)和MMP-9的釋放。MMP-9作為炎癥因子已被證明是動脈粥樣硬化及腦梗死的血清標(biāo)志物，它是鋅依賴的蛋白水解酶，能夠催化細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的降解，可以選擇性的降解Ⅳ和Ⅴ型膠原蛋白，從而削弱動硬化斑塊纖維帽，使得斑塊更容易破裂[2,3]。國內(nèi)外研究已表明[4]，動脈粥樣硬化不僅是膽固醇的聚集、平滑肌細(xì)胞增殖的復(fù)雜過程，免疫介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在動脈粥樣硬化中也起著重要作用。動脈粥樣硬化的始因是動脈壁內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，表達(dá)的炎癥趨化因子導(dǎo)致白細(xì)胞遷移，早期主要是循環(huán)中的單核細(xì)胞，穿過內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)膜，從而導(dǎo)致后期的動脈粥樣硬化斑塊形成，隨著動脈粥樣硬化斑塊的增加，血管管腔不斷的阻塞，動脈血流逐漸減少，或斑塊破裂，最終導(dǎo)致急性腦梗死的發(fā)生。我們通過探討抗apoA-1 IgG、MMP-9與急性腦梗死患者頸動脈粥樣硬化的相關(guān)性，為動脈粥樣硬化及腦梗死的病因提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象 隨機(jī)選擇我科急性腦梗死患者120例,男性80例，女性40例，平均年齡(65.5±9.53)歲。均符合1996年全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會議修訂的腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)頭部CT或MRI檢查證實，并排除：自身免疫性疾病或服用免疫抑制劑、自身免疫機(jī)制參與發(fā)生、發(fā)展的疾病、嚴(yán)重肝、腎功能不全、惡性腫瘤及急慢性感染性炎癥者、急性冠脈綜合征的患者、心源性腦栓塞的患者。

1.2 方法與分組

1.2.1 抗apoA-1 IgG、MMP-9的測定 入組患者于入院次日清晨空腹采集肘靜脈血共計5 ml，置于全塑干燥管內(nèi)，在常溫環(huán)境中以3000 r/min離心5 min，分離后吸取上層血清放于-80.0 ℃冰箱保存，最后統(tǒng)一用ELISA方法檢測抗apoA-1 IgG、MMP-9水平。

1.2.2 頸動脈超聲檢查 采用飛利浦投資有限公司生產(chǎn)的EPIQ-7型彩色多普勒超聲診斷儀，由我院同一位超聲科醫(yī)生檢測。分別探查雙側(cè)頸總動脈遠(yuǎn)段(分叉下方)、頸總動脈球部(分叉部)、頸內(nèi)動脈近段(分叉上方)內(nèi)-中膜厚度(IMT)和血管管腔內(nèi)徑。內(nèi)-中膜厚度為管腔與血管內(nèi)膜交界處的垂直距離，取不同位點(頸總動脈遠(yuǎn)段、 頸動脈球部、頸內(nèi)動脈近段)的平均值作為內(nèi)-中膜增厚測值，觀察有無內(nèi)-中膜增厚或粥樣硬化斑塊形成，并進(jìn)行斑塊穩(wěn)定性評價。其中IMT≧1.00 mm即為內(nèi)-中膜增厚；局限性IMT≧1.50 mm定義為粥樣硬化斑塊形成，二者皆認(rèn)為存在頸動脈粥樣硬化。根據(jù)斑塊穩(wěn)定性進(jìn)一步分為不穩(wěn)定性斑塊和穩(wěn)定性斑塊，前者包括軟斑、混合斑；后者指硬斑。

1.2.3 分組 根據(jù)頸部血管超聲分為4組：(1)IMT正常組20例(IMT<1.00 mm)；(2)IMT增厚組10例(IMT≧1.00 mm)；(3)穩(wěn)定斑塊組57例；(4)不穩(wěn)定斑塊組33例，其中(1)組為頸動脈正常組；后3組均為頸動脈粥樣硬化組。

2 結(jié) 果

2.1 4組腦梗死患者一般臨床資料及抗apoA-1 IgG、MMP-9的比較 頸動脈IMT正常組、IMT增厚組、穩(wěn)定性斑塊組、不穩(wěn)定性斑塊組中，體重指數(shù)(Baric index,BMI)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、總膽固醇(Total cholesterol,TC)、抗apoA-1 IgG、MMP-9、低密度脂蛋白(Low density lipoprotein，LDL)水平依次逐漸升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表1)。

2.2 頸動脈粥樣硬化組與頸動脈正常組比較 入組的腦梗死患者根據(jù)頸部血管超聲分為頸動脈正常組(20例)與頸動脈粥樣硬化組(100例)；頸動脈粥樣硬化組的抗apoA-1 IgG、MMP-9的表達(dá)水平明顯高于頸動脈正常組(P<0.05)(見表2)。

2.3 抗apoA-1 IgG、MMP-9血清水平與頸動脈粥樣硬化程度的相關(guān)性 斯皮爾曼(Spearman)等級相關(guān)分析：抗apoA-1 IgG、MMP-9血清水平與頸動脈粥樣硬化程度呈正相關(guān)(抗apoA-1 IgG：r=0.407，P<0.01；MMP-9：r=0.316，P<0.01)。

2.4 Logistic回歸分析 分別以IMT、斑塊穩(wěn)定性為因變量;以年齡、性別、BMI、TG、TC、HDL、LDL、空腹血糖、抗apoA-1 IgG、MMP-9等與動脈粥樣硬化相關(guān)的危險因素作為自變量進(jìn)行Logistic回歸分析。結(jié)果顯示：抗apoA-1 IgG、MMP-9是發(fā)生頸動脈粥樣硬化和斑塊不穩(wěn)定的獨立危險因素[抗apoA-1 IgG (μg/ml)OR=23.226，95%CI4.204～128.305，P<0.01，MMP-9 (ng/ml)OR=2.287,95%CI0.890～5.872，P<0.05;抗apoA-1 IgG (μg/ml)OR=3.301，95%CI1.212～8.991，P<0.01，MMP-9 (ng/ml)OR=2.345,95%CI1.129～4.871，P<0.05]。

表1 4組患者一般臨床資料比較

與正常組比較*P<0.05；與增厚組比較#P<0.05；與穩(wěn)定斑塊組比較△P<0.05

表2 頸動脈正常組和頸動脈粥樣硬化組抗apoA-1 IgG、MMP-9的比較

與正常組比較*P<0.05，**P<0.01

3 討 論

在動脈粥樣硬化的發(fā)展過程中，一些自身抗體與加速動脈粥樣硬化有關(guān)，且在心血管疾病中得到了證實，Mizoguchi Etsuko[5]等發(fā)現(xiàn)有些自身抗體參與了冠狀動脈性疾病(Coronary cardiopathy，CAD)的發(fā)生，且與其范圍和嚴(yán)重程度相關(guān)。我們研究的抗apoA-1 IgG是apoA-1的自身抗體 。目前關(guān)于抗apoA-1 IgG的研究多集中于自身免疫性疾病及心血管疾病[6]，而關(guān)于血清抗apoA-1 IgG與腦梗死患者頸動脈粥樣硬化的相關(guān)性研究未見報道。

本實驗結(jié)果表明，在入組的急性腦梗死患者中，頸動脈粥樣硬化的發(fā)生率為83.3%，頸動脈粥樣硬化組的抗apoA-1 IgG、MMP-9的表達(dá)水平明顯高于頸動脈正常組，Logistic回歸顯示，抗apoA-1 IgG、MMP-9是頸動脈粥樣硬化發(fā)生的獨立危險因素，且與頸動脈粥樣硬化程度呈正相關(guān)。這提示血清抗apoA-1 IgG、MMP-9與頸動脈粥樣硬化的發(fā)生密切相關(guān)，且與頸動脈粥樣硬化程度密切相關(guān)。Dalia El-Lebedy[7]報道，抗apoA-1 IgG是心肌梗死與自身免疫性疾病相關(guān)血栓性事件血清標(biāo)志物，高水平的抗apoA-1 IgG使得許多血栓事件相關(guān)的疾病發(fā)病率增高，如重度頸動脈狹窄。

另有研究顯示[8]，在一些無自身免疫性、炎癥性疾病的腦梗死患者中，因頸動脈重度狹窄行動脈內(nèi)膜切除術(shù)(CEA)時，同時也檢測到了抗apoA-1 IgG水平的升高。我們的研究結(jié)果與上述研究一致。

本研究中，Logistic回歸分析顯示，血清抗apoA-1 IgG、MMP-9是頸動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定性的獨立危險因素。Montecucco[9]等在小鼠模型中用抗apoA-1 IgG被動免疫增加動脈粥樣硬化和動脈粥樣硬化斑塊的易損性。隨后人們在嚴(yán)重頸動脈狹窄患者和輸注多克隆抗apoA-1 IgG的去apoE小鼠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，斑塊內(nèi)膠原含量降低，巨噬細(xì)胞和MMP-9含量明顯升高，其中MMP-9在動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)炎性細(xì)胞聚集發(fā)揮核心作用，且MMP-9選擇性的降解明膠，破壞斑塊纖維帽，同時抗apoA-1 IgG誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞從血流向動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)浸潤，均使得斑塊更加不穩(wěn)定，最終增加動脈粥樣硬化斑塊易損性，這些都表明血清抗apoA-1 IgG和MMP-9水平可能反應(yīng)動脈粥樣硬化程度及斑塊的易損性[10]，我們的研究結(jié)果與以上實驗研究相符。

我們知道，動脈粥樣硬化及動脈粥樣硬化性血栓形成是腦梗死的主要病因及發(fā)病機(jī)制之一，尤其是頸動脈粥樣硬化，頸動脈位置比較表淺，便于超聲檢查，且頸動脈粥樣硬化的程度可相對反應(yīng)全身動脈粥樣硬化的程度[11]。

結(jié)合以上研究，檢測抗apoA-1 IgG、MMP-9的血清水平可能成為發(fā)現(xiàn)早期動脈粥樣硬化的新方法，而且抗apoA-1 IgG是自身抗體，我們可能通過特定的免疫靶向治療，為腦梗死頸動脈粥樣硬化患者提供一種新的治療方法。而且若將頸部血管超聲與血清抗apoA-1 IgG、MMP-9檢測有效結(jié)合，可能為動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的危險分層提供理論依據(jù)，為頸動脈粥樣硬化患者預(yù)防腦梗死等血栓性事件提供新的思路。

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