郭嬌，屈建新

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病，簡(jiǎn)稱(chēng)冠心病，已成為嚴(yán)重危害人類(lèi)生命的疾病之一，隨著我國(guó)社會(huì)生活方式的改變，其發(fā)病率逐年攀升[1,2]。冠心病在老年人群中發(fā)病率高，且預(yù)后較差、死亡率高。但冠心病的病因尚未完全闡明，除傳統(tǒng)的環(huán)境危險(xiǎn)因素外，越來(lái)越多的研究者開(kāi)始關(guān)注基因因素在冠心病發(fā)生發(fā)展中的作用[3-10]。隨著對(duì)冠心病發(fā)病機(jī)制研究的深入，基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MMP-1）逐漸受到重視。MMP-1能降低細(xì)胞外基質(zhì)中的Ⅰ、Ⅲ型膠原，主要在細(xì)胞外基質(zhì)的代謝中扮演重要的角色[11]。當(dāng)前有較多文獻(xiàn)探討了MMP-1基因-519A/G多態(tài)性與冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，但這些研究結(jié)論尚不一致。因此，本研究全面檢索了國(guó)內(nèi)外關(guān)于這一主題的病例-對(duì)照研究，并進(jìn)行Meta分析，以期為冠心病的病因研究提供參考。

1 資料和方法

1.1 文獻(xiàn)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 研究對(duì)象 均為經(jīng)臨床確診為冠心病的患者。

1.1.2 暴露因素 MMP-1基因-519位點(diǎn)突變。

1.1.3 結(jié)局指標(biāo) 冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

1.1.4 研究類(lèi)型 病例-對(duì)照研究。

1.1.5 排除標(biāo)準(zhǔn) 重復(fù)發(fā)表者；無(wú)有效數(shù)據(jù)者。

1.2 檢索策略 計(jì)算機(jī)檢索PubMed、Embase、CBM、CNKI、VIP和WanFang Data，查找關(guān)于MMP-1基因-519A/G多態(tài)性與冠心病相關(guān)性的病例-對(duì)照研究，檢索時(shí)限均為從建庫(kù)至2016年7月，文種不限。中文檢索詞包括：冠心病、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、急性冠脈綜合征、心肌梗死、基質(zhì)金屬蛋白酶、MMP、多態(tài)性；英文檢索詞包括：coronary heart disease、coronary artery disease、coronary atherosclerotic heart disease、acute coronary syndrome、myocardial infarction、matrix metalloproteinase-1、MMP-1、polymorphism、variation、mutation。

1.3 資料提取及質(zhì)量評(píng)價(jià) 由兩位作者獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)篩選，然后提取相關(guān)資料。提取的信息包括：第一作者、發(fā)表時(shí)間、樣本量、基因型分布、對(duì)照組哈迪-溫伯格平衡（HWE）及質(zhì)量評(píng)價(jià)的相關(guān)信息。完成后交叉核對(duì)，若遇分歧，則通過(guò)咨詢(xún)第三位作者解決。質(zhì)量評(píng)價(jià)采用針對(duì)觀察性研究質(zhì)量評(píng)價(jià)的NOS聲明標(biāo)準(zhǔn)[12,13]。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 二分類(lèi)資料采用比值比（odds ratio, OR）作為效應(yīng)量，并計(jì)算其95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）。計(jì)算MMP-1基因-519A/G多態(tài)性五種遺傳模型（G vs. A、GG vs. AA、AG vs. GG、GG+AG vs. AA和GG vs.AA+AG）下的冠心病易感風(fēng)險(xiǎn)[14-17]。對(duì)照組HWE檢驗(yàn)采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05。異質(zhì)性檢驗(yàn)采用Q值，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.1，若P＞0.1，表明納入研究間無(wú)明顯異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析；反之，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。并采用I2值對(duì)異質(zhì)性進(jìn)行定量分析[18,19]。亞組分析按照對(duì)照組人種進(jìn)行，敏感性分析采用排除對(duì)照組不符合HWE的研究進(jìn)行。Meta分析采用Stata 12.0軟件進(jìn)行[20]，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果 初檢出453篇文獻(xiàn)，經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的篩選，最終納入6篇文獻(xiàn)[21-26]，共計(jì)2027例患者，1654例對(duì)照；其中英文文獻(xiàn)2篇，中文文獻(xiàn)4篇。文獻(xiàn)篩選流程如圖1所示。

2.2 納入研究基本特征 納入研究的特征見(jiàn)表1。2篇文獻(xiàn)的研究對(duì)象為高加索人群，其余4篇均為亞洲人群；僅有1篇文獻(xiàn)的對(duì)照組基因型分布不符合HWE。NOS質(zhì)量評(píng)分均為6分以上。

2.3 Meta分析結(jié)果 除隱性基因模型（GG vs. AA+AG）中納入研究間無(wú)明顯異質(zhì)性外（I2=34.7%，P=0.16），其余基因模型均存在較為明顯的異質(zhì)性（G vs. A：I2=86.3%，P＜0.01；GG vs. AA：I2=60.1%，P=0.02；AG vs. GG：I2=86.9%，P＜0.01；GG+AG vs. AA：I2=87.7%，P＜0.01）。因此，隱性基因模型采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析，其他基因模型均采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行。

Meta分析結(jié)果顯示，MMP-1基因-519A/G多態(tài)性在等位基因模型（G vs. A：OR=0.68，95%CI：0.49～0.94，P=0.02；圖2）、雜合子模型（AG vs.AA：OR=0.62，95%CI：0.40～0.95，P=0.03）、顯性模型（GG+AG vs. AA：OR=0.61，95%CI：0.40～0.94，P=0.03）和隱性模型（GG vs.AA+AG：OR=0.76，95%CI：0.59～0.97，P=0.03）中降低冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，而在純合子模型中無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（GG vs. AA：OR=0.59，95%CI：0.35～1.00，P=0.05）（表2）。亞組分析結(jié)果顯示，降低冠心病的風(fēng)險(xiǎn)在亞洲人群中更加突出（表2）。

圖1 文獻(xiàn)篩選流程圖

表1 納入研究基本特征及質(zhì)量評(píng)價(jià)

2.4 敏感性分析結(jié)果 排除對(duì)照組不符合HWE的研究進(jìn)行敏感性分析，結(jié)果顯示，雜合子模型（OR=0.73，95%CI：0.53～1.00，P=0.05）和隱性模型（OR=0.82，95%CI：0.64～1.07，P=0.14）的結(jié)果有改變（表2），其余模型均無(wú)較大的變化。提示雜合子模型和隱性模型結(jié)果的穩(wěn)健性較差，而其余模型結(jié)果的穩(wěn)健性較好。

圖2 等位基因模型G vs. A的Meta分析結(jié)果

表2 Meta分析結(jié)果及亞組分析結(jié)果

3 討論

本Meta分析共納入6篇文獻(xiàn)，共計(jì)2027例患者，1654例對(duì)照；其中英文文獻(xiàn)2篇，中文文獻(xiàn)4篇，NOS質(zhì)量評(píng)分均為6分以上。Meta分析結(jié)果顯示，MMP-1基因-519A/G多態(tài)性在等位基因模型、雜合子模型、顯性模型和隱性模型中降低冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，而在純合子模型中無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。亞組分析結(jié)果顯示，降低冠心病的風(fēng)險(xiǎn)在亞洲人群中更加突出。

MMP-1屬于基質(zhì)金屬蛋白酶家族，主要在細(xì)胞外基質(zhì)的代謝中起重要作用。人類(lèi)MMP-1基因定位于11q22，與其他MMP家族基因及兩個(gè)假基因緊密連鎖，全長(zhǎng)8244bp，包含9個(gè)內(nèi)含子和10個(gè)外顯子，編碼470個(gè)氨基酸[27]。目前關(guān)于MMP-1基因-519A/G多態(tài)性對(duì)冠心病的致病機(jī)制尚不清楚。Pearce等[21]認(rèn)為-519位點(diǎn)在MMP-1基因啟動(dòng)子最保守的區(qū)域，因此，該區(qū)域的多態(tài)性突變可能會(huì)影響轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子的結(jié)合，從而影響MMP-1的基因轉(zhuǎn)錄，增加MMP-1的表達(dá)水平。有研究[28-30]表明，正常動(dòng)脈內(nèi)膜內(nèi)MMP-1含量極低，而在冠心病患者的內(nèi)膜內(nèi)其含量顯著增加。Lemaitre等[31]將小鼠載脂蛋白E基因敲除后，小鼠迅速發(fā)展為動(dòng)脈粥樣硬化，但將人類(lèi)MMP-1基因轉(zhuǎn)入小鼠后，其動(dòng)脈硬化的程度顯著降低，表明MMP-1可阻止和延緩動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。

本Meta分析發(fā)現(xiàn)，G等位基因人群的冠心病發(fā)病率顯著低于A等位基因人群，AG和GG+AG基因型人群顯著低于AA基因型人群，GG基因型人群顯著低于AA+AG基因型人群。這可能是由于-519位點(diǎn)G突變引起MMP-1表達(dá)水平升高，而MMP-1可能會(huì)阻止動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展，因此，攜帶G突變的人群其冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著低于A等位基因人群。此外，MMP-1基因存在其他位點(diǎn)的突變，后期可聯(lián)合分析該基因其他位點(diǎn)的突變，進(jìn)行單倍體分析，以便更加全面地分析MMP-1基因與冠心病的發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

本研究仍存在一定的局限性。首先，本研究的納入研究數(shù)量及樣本量仍相對(duì)不足，因此統(tǒng)計(jì)學(xué)效能也相對(duì)不足，降低了本研究結(jié)論的可信度。其次，本研究的主要研究對(duì)象為亞洲人群，高加索人群的研究?jī)H有2項(xiàng)，且亞組分析結(jié)果顯示，-519A/G多態(tài)性降低冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)僅在亞洲人群中觀察到，而高加索人群中無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此，本研究結(jié)論的外部有效性受到一定的限制。最后，由于納入研究報(bào)告數(shù)據(jù)的限制，未能進(jìn)行單倍體分析及基因-環(huán)境交互作用分析。

綜上所述，當(dāng)前證據(jù)表明，MMP-1基因-519A/G多態(tài)性可能會(huì)降低冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，尤其是亞洲人群。由于納入研究的數(shù)量限制，該結(jié)論尚需進(jìn)一步開(kāi)展研究加以驗(yàn)證。

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