張小佛 王曼知 危松青 李嘉 吳蕾

[摘要] 目的 探討喘息性支氣管炎患兒血清維生素D與細胞因子、免疫球蛋白E（IgE）、嗜酸性粒細胞陽離子蛋白（ECP）的關系。 方法 選取2016年3月～2017年1月在長沙市中心醫(yī)院兒科確診的90例喘息性支氣管炎患兒（喘支組）、90例哮喘患兒（哮喘組）、90例健康兒童（對照組）為研究對象。檢測三組的血清25-（OH）D3、IgE、白細胞介素-4（IL-4）、白細胞介素-12（IL-12）、白細胞介素-2（IL-2）、γ-干擾素（IFN-γ）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、ECP的水平并進行比較分析。 結(jié)果 喘支組、哮喘組的25-（OH）D3水平均顯著低于對照組（P < 0.05）;喘支組高于哮喘組（P < 0.05）;喘支組、哮喘組的IL-4、TGF-β1、IgE、ECP水平均顯著高于對照組（P < 0.05），IL-12顯著低于對照組（P < 0.05）;喘支組的IL-12、IgE、ECP、IL-2、IFN-γ低于哮喘組（P < 0.05）、喘支組的IL-4高于哮喘組（P < 0.05）;喘支組患兒的血清25-（OH）D3水平與IL-4（r = -0.419，P = 0.001）、IL-12（r = -0.488，P = 0.000）、TGF-β1（r = -0.392，P = 0.002）、IgE（r = -0.527，P = 0.000）、IL-2（r = -0.539，P = 0.000）、INF-γ（r = -0.520，P = 0.000）呈負相關，與血清ECP無明顯相關性（r = -0.274，P = 0.063）。 結(jié)論 喘息性支氣管炎患兒血清25-（OH）D3水平降低，炎癥因子及IgE、ECP水平升高，并且與血清25-（OH）D3水平降低具有一定的關系。

[關鍵詞] 喘息;支氣管炎;維生素D;細胞因子;免疫球蛋白E;嗜酸性粒細胞陽離子蛋白

[中圖分類號] R725.622.5 ? ? ? ? ?[文獻標識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-7210（2018）12（c）-0079-04

[Abstract] Objective To investigate the relationship between serum vitamin D and cytokines， IgE and ECP in children with asthmatic bronchitis. Methods Ninety children with asthmatic bronchitis （hepatitis group）， 90 children with asthma （asthma group）， and 90 healthy children （control group） diagnosed in the Pediatric Department of Changsha Central Hospital from March 2016 to January 2017 were selected as the study objects. The levels of serum 25-（OH）D3， IgE， IL-4， IL-12， IL-2， IFN-γ， TGF-β1， and ECP in the three groups were compared and analyzed. Results The 25-（OH）D3 level in the asthma group and asthma group were significantly lower than that in the control group （P < 0.05）; the asthma group was higher than the asthma group （P < 0.05）. The levels of IL-4， TGF-β1， IgE and ECP in the asthma group and asthma group were significantly higher than those in the control group （P < 0.05）， and IL-12， IL-2， IFN-γ were significantly lower than those in the control group （P < 0.05）. The IL-12， IgE， IL-2， IFN-γ and ECP of the asthma group were lower than those of the asthma group （P < 0.05）. The IL-4 in the asthma group was higher than that in the asthma group （P < 0.05）. Serum 25-（OH）D3 level in the asthma group was negatively associated with IL-4 （r = -0.419， P = 0.001）， IL-12 （r = -0.488， P = 0.000）， TGF-β1 （r = - 0.392， P = 0.002）， IgE （r = -0.527， P = 0.000）， IL-2 （r = -0.539， P = 0.000）， and INF-γ （r = -0.520， P = 0.000）， while had no significant correlation with serum ECP （r = -0.274， P = 0.063）. Conclusion Serum 25-（OH）D3 level is decreased in children with asthmatic bronchitis， inflammatory factor， IgE and ECP levels are elevated， and that has certain relationship with serum 25-（OH）D3.

[Key words] Wheezing; bronchitis; Vitamin D; Cytokines; Immunoglobulin E; Eosinophil cationic protein

喘息性支氣管炎是兒科常見的呼吸系統(tǒng)疾病，多由病毒感染引起，好發(fā)生于嬰幼兒。病毒感染后機體產(chǎn)生大量的炎癥介質(zhì)和趨化因子，引起氣道高反應性、支氣管痙攣而發(fā)生喘息，部分患兒可能發(fā)展為哮喘，嚴重影響患兒的身心健康和生長發(fā)育[1]。喘息性支氣管炎患兒常有濕疹及其他過敏史，尤以肥胖者多發(fā)。隨年齡增長，起病漸呈急性過程，常在吸入塵螨、花粉、羽毛、霉菌等變應原后發(fā)作。早期干預和治療對改善喘息性支氣管炎患兒的預后具有重要的意義。目前炎性反應、免疫反應在喘息性支氣管的發(fā)生和進展中的作用已受到重視，并成為臨床治療的重要靶點[2]。已有的研究發(fā)現(xiàn)，血清維生素D水平及其受體基因多態(tài)性與哮喘的發(fā)生有關，血清25-（OH）D3水平降低可增加哮喘的發(fā)生風險和病情嚴重程度[3]。但血清維生素D水平與喘息性支氣管炎的關系相關研究報道較少?；诖⑿灾夤苎着c哮喘具有相似的發(fā)病機制，推測血清維生素D水平及其受體基因多態(tài)性與喘息性支氣管炎的發(fā)生也可能存在一定的相關性。本研究探討了喘息性支氣管炎患兒血清維生素D與細胞因子、免疫球蛋白E（IgE）、嗜酸性粒細胞陽離子蛋白（eosinophil cationic protein，ECP）的關系，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年3月～2017年1月在長沙市中心醫(yī)院（以下簡稱“我院”）兒科確診的90例喘息性支氣管炎患兒（喘支組）、90例哮喘患兒（哮喘組）、90例健康兒童（對照組）為研究對象。其中，喘支組，男48例，女42例;年齡6個月～3歲，平均（1.5±0.5）歲;體重（9.7±2.1）kg。哮喘組，男54例，女36例;年齡6個月～3歲，平均（1.6±0.7）歲;體重（10.0±2.5）kg。對照組，男51例，女39例;年齡6個月～3歲，平均（1.5±0.7）歲;體重（10.2±2.2）kg。三組年齡、性別、體重比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。具有可比性。

1.2 納入及排除標準

1.2.1 納入標準 ?①喘息性支氣管炎、哮喘患兒的診斷參考諸福棠《實用兒科學》[4]、中華醫(yī)學會兒科分會呼吸學組修訂的《兒童支氣管哮喘診斷標準》2008版[5]中的標準;②年齡6個月～3歲;③對照組兒童來源于我院兒?？频慕】祴胗變?④本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，所有研究對象及家屬均知情同意。

1.2.2 排除標準 ?①合并心、肺、肝、腎功能障礙;②合并凝血功能障礙性疾病;③結(jié)締組織疾病、免疫性疾病;④伴有惡性腫瘤、先天遺傳學疾病;⑤合并嚴重的全身感染、膿毒血癥等。

1.3 指標檢測方法

檢測三組的血清25-（OH）D3、IgE、白細胞介素-4（IL-4）、白細胞介素-12（IL-12）、白細胞介素-2（IL-2）、γ-干擾素（IFN-γ）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、ECP的水平并進行比較分析。

所有研究對象均清晨空腹抽取靜脈血，3000 r/min離心10 min分離血清，離心半徑10 cm。血清凍存于-70℃冰箱。統(tǒng)一采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中25（OH）D3、白細胞介素-4（IL-4）、白細胞介素-12（IL-12）、白細胞介素-2（IL-2）、γ-干擾素（IFN-γ）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、免疫球蛋白E（IgE）、嗜酸性粒細胞陽離子蛋白（eosinophil cationic protein，ECP）水平。檢測儀器為美國BIO-TEK全自動酶標儀。檢測試劑盒為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。維生素D試劑盒批號：170125;IL-4試劑盒批號：170223;IL-12試劑盒批號：170305;IL-2試劑盒批號：170301;IFN-γ試劑盒批號：170205;TGF-β試劑盒批號：170201;IgE試劑盒批號：170311;ECP試劑盒批號：170102。嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 三組的血清25-（OH）D3水平比較

喘支組、哮喘組的25-（OH）D3水平分別為（27.92±6.09）、（23.18±5.75） ng/mL，均顯著低于對照組[（54.17±11.30）ng/mL]（P < 0.05）;喘支組高于哮喘組（F = 33.092，P < 0.05）。

2.2 三組的血清IL-4、IL-12、TGF-β1、IL-2、INF-γ水平比較

喘支組、哮喘組的IL-4、TGF-β1水平均顯著高于對照組（P < 0.05），IL-12、IL-2、INF-γ顯著低于對照組（P < 0.05）;喘支組的IL-12、IL-2、INF-γ低于哮喘組（P < 0.05）、喘支組的IL-4高于哮喘組（P < 0.05）。見表1。

2.3 三組的血清IgE、ECP水平比較

喘支組、哮喘組的IgE、ECP水平均顯著高于對照組，喘支組的IgE、ECP低于哮喘組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。見表2。

2.4相關性分析

喘支組患兒的血清25-（OH）D3水平與IL-4（r = -0.419，P = 0.001）、IL-12（r = -0.488，P = 0.000）、TGF-β1（r = -0.392，P = 0.002）、IgE（r = -0.527，P = 0.000）、IL-2（r = -0.539，P = 0.000）、INF-γ（r = -0.520，P = 0.000）呈負相關，與血清ECP無明顯相關性（r = -0.274，P = 0.063）。

3 討論

喘息性支氣管炎是嬰幼兒呼吸系統(tǒng)的常見病，常伴有濕疹、其他過敏史，患兒常出現(xiàn)低熱或者不發(fā)熱，以喘息、刺激性干咳癥狀為主。喘息性支氣管炎多由病毒、細菌、支原體等致病微生物感染所致，其中呼吸道合胞病毒感染是其最常見的病因[6]。病毒感染后引起氣道高反應性、支氣管痙攣、氣道阻力增加而出現(xiàn)喘息癥狀，嚴重時可誘發(fā)呼吸衰竭而危及生命[7]。這是由于小兒呼吸系統(tǒng)發(fā)育不完善，小氣道平滑肌薄且少，易發(fā)生氣道塌陷;支氣管黏膜腺分泌多，易導致氣道堵塞;咳嗽反射弱、纖毛運動功能差，在黏膜分泌增加后形成痰栓，不易排出體外[8]。這就導致小兒喘息型支氣管炎的治療比較棘手，部分患兒病情進一步發(fā)展為支氣管哮喘，嚴重影響患兒的身體健康和生長發(fā)育[9]。

維生素D又稱抗佝僂病維生素，在體內(nèi)的活性代謝產(chǎn)物為1，25（OH）2D3，有助于維持血清和骨骼中鈣和磷的代謝平衡[10]。近年來有研究發(fā)現(xiàn)，1，25（OH）2D3具有新的生理作用，可通過結(jié)合相關受體產(chǎn)生其他的生物學效應，尤其在調(diào)控體內(nèi)的免疫應答、慢性氣道炎癥、減少呼吸道重塑等方面發(fā)揮著重要的作用[11]。但由于1，25（OH）2D3的檢測比較困難，25（OH）D3比1，25（OH）2D3更穩(wěn)定，易于檢測[12]。因此臨床上一般采用25（OH）D3檢測，可準確的反映體內(nèi)維生素D水平[13]。已有的臨床研究發(fā)現(xiàn)，維生素D有助于減輕哮喘癥狀，并增強哮喘患者的免疫功能，進而控制哮喘病情、減輕發(fā)作次數(shù)[14]。由于喘息性支氣管炎與哮喘具有相似的發(fā)病機制，因此推測血清維生素D水平及其受體基因多態(tài)性與喘息性支氣管炎的發(fā)生也可能存在一定的相關性。本研究檢測了喘息性支氣管炎患兒、哮喘患兒及健康兒童的血清25-（OH）D3水平發(fā)現(xiàn)，喘息性支氣管炎患兒、哮喘患兒血清25-（OH）D3水平均顯著低于健康兒童;喘息性支氣管炎患兒血清25-（OH）D3水平高于哮喘患兒。這一結(jié)果提示，隨著哮喘病情的進展，血清25-（OH）D3水平呈現(xiàn)逐步下降的趨勢。這是由于維生素D有助于調(diào)控喘息性支氣管炎的氣道慢性炎癥，緩解患兒的病情，阻止其進一步發(fā)展為哮喘。當維生素D缺乏時，可氣道上層通透性降低，使其固有防御功能降低，進而造成免疫功能低下，易發(fā)生呼吸道感染而導致喘息性支氣管炎及哮喘發(fā)作。

IgE是由B細胞合成的免疫球蛋白，可作為炎癥介質(zhì)參與機體過敏反應。IgE受體表達于嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、肥大細胞、巨噬細胞表面[15]。在哮喘的發(fā)病過程中，Th2細胞亞群功能亢進，分泌大量的IL-4、TGF-β1等細胞因子，趨化嗜酸性粒細胞，進而加重哮喘的癥狀[16]。IL-12可抑制Th2類因子的產(chǎn)生，是一種關鍵性免疫調(diào)節(jié)因子[17]。IL-2是免疫系統(tǒng)中的一類細胞生長因子，能調(diào)控免疫系統(tǒng)中白血球的細胞活性，促進Th0和CTL的增殖，也參與抗體反應、造血和腫瘤監(jiān)視。在各種氣道高反應性疾病患者體內(nèi)可見IL-2水平下降[18]。IFN-γ是水溶性二聚體細胞因子，又稱為巨噬細胞活化因子。IFN-γ具有抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤作用，可與γ-干擾素受體結(jié)合，并激活其受體調(diào)節(jié)JAK-STAT通路。γ-干擾素激活抗原提呈細胞，通過上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子T-bet而促進Th1細胞分化[19]。ECP是嗜酸性粒細胞釋放的一種堿性毒蛋白，可反映嗜酸性粒細胞參與炎性反應活動的情況[20]。

本研究中喘息性支氣管炎患兒、哮喘組患兒的IgE、ECP、IL-4、TGF-β1水平均顯著高于健康兒童，IL-12、IL-2、IFN-γ顯著低于健康兒童。喘息性支氣管炎患兒IgE、ECP、IL-4水平均低于哮喘組患兒，IL-12、IL-2、IFN-γ低于哮喘患兒。這一結(jié)果提示，炎癥因子水平及IgE、ECP水平升高是喘息性支氣管炎發(fā)生的主要病理變化，但其上升程度尚未達到引起哮喘的水平。通過抑制炎癥因子的升高有助于降低進展至哮喘的風險[21]。

相關性研究結(jié)果提示，喘息性支氣管炎患兒的血清25-（OH）D3水平與IL-4、IL-12、TGF-β1、IgE、IL-2、IFN-γ呈負相關，與血清ECP無明顯相關性。這是由于25-（OH）D3水平對樹突狀細胞具有調(diào)節(jié)作用，可通過抑制活化B細胞的增殖，并誘導其凋亡，抑制B淋巴細胞轉(zhuǎn)化成為漿細胞及記憶性B淋巴細胞，可進一步抑制免疫性球蛋白的分泌。此外，維生素D還可抑制IL-4、IL-12、TGF-β1、IL-2、IFN-γ的產(chǎn)生，可抑制上述炎癥介質(zhì)和趨化因子引起的氣道高反應性，進而減輕喘息性支氣管炎、哮喘的發(fā)作[22]。

綜上所述，喘息性支氣管炎患兒血清25-（OH）D3水平降低，炎癥因子水平及IgE、ECP水平升高，并且與血清25-（OH）D3水平降低具有一定的關系。

[參考文獻]

[1] ?袁藝，曹玲，于雪梅，等.兒科門診兒童毛細支氣管炎及喘息性支氣管炎治療現(xiàn)狀[J].中華實用兒科臨床雜志，2015，30（4）：267-270.

[2] ?薛秀麗，池紅井，冀楠，等.維生素D在喘息性支氣管炎發(fā)病中的作用[J].河北醫(yī)學，2016，22（12）：2068-2070.

[3] ?尹加林，楊樂，蒲海波，等.哮喘患兒血清1，25-二羥維生素D3和IL-25與肺功能及生活質(zhì)量的相關性研究[J].中國婦幼保健，2016，31（1）：106-108.

[4] ?胡亞美，江載芳.諸福棠實用兒科學[M].7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：1172-1177.

[5] ?中華醫(yī)學會兒科分會呼吸學組，《中華兒科雜志》編輯委員會.兒童支氣管哮喘診斷與防治指南[J].中華兒科雜志，2008，46（10）：745-753.

[6] ?徐建輝，黃祖輝.IL-12、IL-4、IL-8、轉(zhuǎn)化生長因子-β1及1，25-二羥基維生素D3在嬰幼兒喘息性支氣管炎表達水平及其臨床意義[J].貴州醫(yī)藥，2016，40（11）：1138-1140.

[7] ?林利平.維生素D缺乏與喘息性支氣管炎發(fā)病的關系探究[J].中國社區(qū)醫(yī)師，2016，32（3）：24-25.

[8] ?郭曉軍，盧敏君，魏麗華，等.小兒喘息型支氣管炎血清25-（OH）D3和IgE水平的檢測及臨床意義[J].中國醫(yī)藥科學，2015，5（14）：48-50.

[9] ?劉瑩，張紅，喬穎，等.維生素D受體基因的多態(tài)性與兒童喘息性疾病的關系[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志，2016，26（10）：36-39.

[10] ?鄧莉莉，何驍，雷曄飛，等.喘息患兒氣道炎癥細胞檢測的臨床意義[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志，2015，25（24）：61-65.

[11] ?徐建輝，黃祖輝.IL-12、4、8、轉(zhuǎn)化生長因子-β1及1，25二羥基維生素D3在嬰幼兒喘息性支氣管炎表達水平及其臨床意義[J].貴州醫(yī)藥，2016，40（11）：1138-1140.

[12] ?郁志偉，錢俊，顧曉虹，等.嬰幼兒喘息性社區(qū)獲得性肺炎患兒血清炎癥因子的變化[J].中國當代兒科雜志，2015， 8（8）：815-818.

[13] ?Ng MC，How CH. Recurrent wheeze and cough in young children：is it asthma？[J]. Singapore Med J，2014，55（5）：236-241.

[14] ?王秀芳，熊蕾蕾，楊慧彬，等.喘息型支氣管炎患兒外周血25-（OH）D3和IgE水平及意義[J].中國婦幼保健，2015，30（21）：3600-3602.

[15] ?Irani A M.The relationship between a specific IgE level and asthma outcomes： results from the 2005-2006 National Health and Nutrition Examination Survey [J].Pediatrics，2014，134（3）：168.

[16] ?王曉靜，劉燕春，孔繼昌，等.血清25-羥維生素D及總IgE水平與兒童哮喘急性發(fā)作的嚴重程度的關系[J].中國醫(yī)藥導報，2016，13（29）：63-66.

[17] ?黃靜，項珊，張曉霞，等.哮喘患兒血清維生素D水平改變與炎癥因子和肺功能的相關性研究[J].臨床肺科雜志，2016，21（9）：1611-1614.

[18] ?張海蓉，姜孝芳，高麗，等.新疆維吾爾族與漢族哮喘患者外周血CD4+T淋巴細胞白介素2、白介素4、干擾素γmRNA表達水平研究[J].中國全科醫(yī)學，2016，19（16）：1911-1916.

[19] ?葉武成，葉鵬，賀波，等.MP感染對哮喘患兒BALF中T細胞功能及細胞因子水平的影響分析[J].湖南師范大學學報：醫(yī)學版，2017，14（2）：125-128.

[20] ?肖碩，文九芳.維生素D與嬰幼兒哮喘的關系[J].實用藥物與臨床，2016，19（11）：1435-1438.

[21] ?劉后存.探討維生素D水平在哮喘兒童吸入皮質(zhì)激素治療中的意義[J].安徽醫(yī)藥，2017，21（12）：2260-2262.

[22] ?陳江，任翼，何娜，等.維生素D3的補充對兒童哮喘控制的隨機對照研究[J].重慶醫(yī)學，2017，46（32）：4505-4507，4510.

（收稿日期：2018-06-07 ?本文編輯：任 ? 念）