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        新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡的研制

        2018-03-01 02:37:08羅奕銘
        現(xiàn)代食品科技 2018年1期
        關(guān)鍵詞:布特倫特羅瘦肉精

        羅奕銘

        (廣州瑞森生物科技股份有限公司,廣東廣州 511400)

        進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái),食品安全問(wèn)題受到越來(lái)越多人的重視,我國(guó)多起瘦肉精中毒事件的頻繁發(fā)生,引起社會(huì)對(duì)食品安全監(jiān)管的強(qiáng)烈不滿。瘦肉精[1,2]是一類藥物,而不是一種特定的物質(zhì),是指能夠促進(jìn)瘦肉生長(zhǎng)的藥物添加劑,例如鹽酸克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、苯乙醇胺A、溴布特羅、馬布特羅、馬賁特羅、塞曼特羅、齊帕特羅、妥布特羅和特布他林[3,4]等。瘦肉精能使豬提高生長(zhǎng)速度,增加瘦肉率,豬毛色紅潤(rùn)光亮,收腹,賣相好;屠宰后,肉色鮮紅,脂肪層極薄,往往是皮貼著瘦肉,瘦肉豐滿。但對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生副作用[5],輕則導(dǎo)致心律不整,嚴(yán)重一點(diǎn)就會(huì)導(dǎo)致心臟病[6]。

        目前檢測(cè)瘦肉精主要有方法有色譜技術(shù)和免疫分析技術(shù)等方法。色譜法包括高效液相色譜法和氣質(zhì)聯(lián)用色譜法。高效液相色譜(HPLC)法的優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)精密度高,假陽(yáng)性率低,但存在樣品處理時(shí)間長(zhǎng)檢測(cè)過(guò)程繁瑣、儀器昂貴、難于操作等缺點(diǎn),在實(shí)際應(yīng)用中受到一定的限制。而氣質(zhì)聯(lián)用法(GC-MS)檢測(cè)前需要對(duì)分子上的羥基、氨基等極性基團(tuán)衍生化,難以作為常規(guī)方法應(yīng)用,不能進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。

        免疫分析檢測(cè)包括放射性免疫分析技術(shù)、酶免疫分析技術(shù)和金標(biāo)免疫分析技術(shù)等。放射性免疫分析技術(shù)具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確、快速、操作簡(jiǎn)便、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)[7~9]。但其所用儀器昂貴,且使用的放射性同位素存在輻射和污染,其廢棄物不易處理,限制了此種方法的廣泛應(yīng)用。酶聯(lián)免疫法和金標(biāo)免疫法是目前檢測(cè)瘦肉精較高效的免疫分析技術(shù),但常規(guī)的酶聯(lián)免疫檢測(cè)一次只能檢測(cè)一種瘦肉精,所以如果要對(duì)多種瘦肉精進(jìn)行檢測(cè)則需要進(jìn)行多次實(shí)驗(yàn),操作繁瑣費(fèi)時(shí),常規(guī)的金標(biāo)免疫檢測(cè)也有此缺陷,且傳統(tǒng)的檢測(cè)方法只能進(jìn)行粗略的陰性與陽(yáng)性判定,且判定時(shí)間相對(duì)較短,因此,我們需要一種能夠同時(shí)檢測(cè)多種瘦肉精的新型檢測(cè)方法[10,11]。

        本研究建立一種快速、有效、高靈敏度的新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡[12],試驗(yàn)根據(jù)膠體金免疫層析原理,實(shí)現(xiàn)特異性免疫檢測(cè)。

        1 材料和方法

        1.1 材料與設(shè)備

        主要試劑和儀器:牛血清白蛋白(BSA)(天津正將高科公司);聚乙二醇(PEG)、三羥甲基氨基甲烷(Tris)(北京鼎國(guó)生物);檸檬酸三鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸鈉、疊氮鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、吐溫-20、鹽酸(廣州化學(xué)試劑廠);氯金酸(上海國(guó)藥);羊抗鼠抗體(武漢博士德);新型瘦肉精多克隆抗體、瘦肉精-BSA(瑞森生物);硝酸纖維素膜(Sartorius);聚酯膜、玻璃纖維(Pall);吸水紙、磁白板(上海金標(biāo));塑料卡、鋁箔袋(廣州)。

        三維劃膜噴金儀HM3030、金標(biāo)試紙分切機(jī)WM-100(上海金標(biāo));連續(xù)點(diǎn)膜機(jī)R5DD-2(韓感);磁力攪拌器(國(guó)產(chǎn))。

        1.2 試驗(yàn)方法

        1.2.1 膠體金溶液的制備

        量取40 mL純水于潔凈的圓底燒杯,用磁力攪拌器加入至沸騰,加入0.04 mL 10%氯金酸溶液沸騰5 min后加入0.096 mL 10%檸檬酸三鈉溶液,保持沸騰10 min。待溶液溫度降至室溫后裝入棕色密封容量瓶中,避光保存。

        1.2.2 金標(biāo)記新型瘦肉精多克隆抗體的制備

        量取20 mL膠體金溶液,倒入潔凈離心管內(nèi),用0.1 M碳酸鉀溶液和0.1 M鹽酸溶液調(diào)膠體金溶液pH值至8.2。再稱取0.186 mg的新型瘦肉精多克隆抗體加入到膠體金溶液內(nèi),振蕩混勻,室溫放置20 min后加入0.02 mL 10% BSA溶液,振蕩混勻,室溫放置20 min后,把金標(biāo)記的抗體溶液分裝到離心管內(nèi),11000 r/min離心15 min。吸取上清液。再加入10 mL 0.1 M磷酸鹽緩沖液將沉淀混勻,于11000 r/min離心15 min,吸取上清液后加入4 mL金標(biāo)緩沖液將沉淀混勻,得到金標(biāo)記新型瘦肉精多克隆抗體溶液。

        1.2.3 金標(biāo)抗體結(jié)合墊的制備

        量取0.42 mL金標(biāo)新型瘦肉精多克隆抗體溶液倒入潔凈小離心管內(nèi)。設(shè)定噴金儀主機(jī)程序:噴金濃度為20 μL/cm,平臺(tái)移動(dòng)速度為132 mm/s,再將玻璃纖維膜放置于噴金儀平臺(tái),按設(shè)定程序?qū)⒔饦?biāo)抗體均勻噴灑于玻璃纖維膜上。將噴好的金標(biāo)抗體結(jié)合墊放置于真空干燥箱內(nèi)室溫抽干6 h后,再放于有干燥劑的自封袋中保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2.4 劃膜

        稱取0.332 mg瘦肉精-BSA原液于潔凈離心管內(nèi),加入劃膜緩沖液稀釋至終濃度為1 mg/mL,稱取1.79 mg羊抗鼠二抗溶液于另一離心管內(nèi),加入劃膜緩沖液稀釋終濃度為2 mg/mL。將硝酸纖維素膜放置于劃膜儀平臺(tái),兩端用壓條固定,設(shè)定劃膜儀主機(jī)程序:劃膜濃度為2 μL/cm,平臺(tái)移動(dòng)速度為128 mm/s。按設(shè)定程序?qū)⑹萑饩?BSA按一定比例混合后和二抗劃于硝酸纖維素膜上后置于真空干燥箱內(nèi)室溫抽干6 h,干燥后封袋保存?zhèn)溆?。使瘦肉?BSA所劃線標(biāo)記為檢測(cè)線T,羊抗鼠二抗所劃線標(biāo)記為質(zhì)控線C。

        1.2.5 膠體金免疫層析新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡組裝

        將樣品墊、膠體金墊、已包被好抗原抗體的NC膜、吸水紙依次粘貼到PVC底板上,切割成條,裝卡封口密封,置于干燥器中常溫保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2.6 樣品制備

        1.2.6.1 陰性樣品的制備

        經(jīng)GC-MS法(農(nóng)業(yè)部1031號(hào)公告-3-2008中的“豬肝和豬尿中β-受體激動(dòng)劑殘留檢測(cè)-氣相色譜-質(zhì)譜法”)檢測(cè)克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、西馬特羅、班布特羅、妥布特羅、特布他林、氯丙那林、馬布特羅、溴布特羅陰性的80份尿液。

        1.2.6.2 克倫特羅

        (萊克多巴胺、沙丁胺醇、西馬特羅、班布特羅、妥布特羅、特布他林、氯丙那林、馬布特羅、溴布特羅)添加陽(yáng)性樣品的制備。見(jiàn)表1。

        表1 標(biāo)準(zhǔn)品配制Table 1 Preparation of Standards

        1.2.6.3 實(shí)測(cè)陽(yáng)性樣品的準(zhǔn)備

        10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)克倫特羅為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于3 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)萊克多巴胺為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于5 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)沙丁胺醇為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于3 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)西馬特羅為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于5 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)班布特羅為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于5 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)妥布特羅為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于5 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)特布他林為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于8 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)氯丙那林為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于5 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)馬布特羅為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于3 μg/L)。10份經(jīng)GC-MS檢測(cè)溴布特羅為陽(yáng)性的實(shí)際豬尿樣品(濃度均大于8 μg/L)。見(jiàn)表2。

        表2 實(shí)際豬尿樣品Table 2 Pratical urine sample of pig

        1.2.7 靈敏度

        取3批次新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡分別檢測(cè)添加克倫特羅/沙丁胺醇濃度為0 μg/L、1 μg/L、3 μg/L和5 μg/L的豬尿樣;添加萊克多巴胺/西馬特羅/班布特羅/妥布特羅/氯丙那林/馬布特羅濃度為0 μg/L、3 μg/L、5 μg/L和8 μg/L的豬尿樣;添加特布他林/溴布特羅為0 μg/L、5 μg/L、8 μg/L和10 μg/L的豬尿樣各10份。室溫條件下操作,肉眼觀測(cè)進(jìn)行判定。

        1.2.8 假陽(yáng)性率試驗(yàn)

        新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡對(duì)80份經(jīng)GC-MS檢測(cè)為陰性的豬尿進(jìn)行檢測(cè),并分別以含克倫特羅/沙丁胺醇為0和3 μg/L的豬尿;特布他林/溴布特羅為0和8 μg/L的豬尿;萊克多巴胺/西馬特羅/班布特羅/妥布特羅/氯丙那林/馬布特羅為0和5 μg/L的豬尿?yàn)殛幮詫?duì)照和陽(yáng)性對(duì)照,計(jì)算假陽(yáng)性率。

        1.2.9 假陰性率試驗(yàn)

        新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡對(duì)40份陽(yáng)性豬尿(10份為3 μg/L克倫特羅/沙丁胺醇陽(yáng)性添加樣品,10份為8 μg/L特布他林/溴布特羅陽(yáng)性添加樣品,10份為5 μg/L萊克多巴胺/西馬特羅/班布特羅/妥布特羅/氯丙那林/馬布特羅陽(yáng)性添加樣品,10份為濃度均大于3 μg/L實(shí)測(cè)克倫特羅/沙丁胺醇陽(yáng)性樣品,10份為濃度均大于8 μg/L實(shí)測(cè)特布他林/溴布特羅陽(yáng)性樣品,10份為濃度均大于5 μg/L實(shí)測(cè)萊克多巴胺/西馬特羅/班布特羅/妥布特羅/氯丙那林/馬布特羅陽(yáng)性樣品)進(jìn)行檢測(cè),并分別以含克倫特羅/沙丁胺醇0和3 μg/L尿樣;特布他林/溴布特羅0和8 μg/L尿樣;萊克多巴胺/西馬特羅/班布特羅/妥布特羅/氯丙那林/馬布特羅0和5 μg/L尿樣為陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照,計(jì)算假陰性率。

        1.2.10 新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡的批內(nèi)和批間重復(fù)

        將同批和不同批次的新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡分別檢測(cè)上述陰性樣品、陽(yáng)性樣品、實(shí)測(cè)陽(yáng)性樣品,每個(gè)濃度重復(fù)10次,觀察其重復(fù)性。

        2 結(jié)果與討論

        圖1 試紙條結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1 Structure diagram of colloidal gold strip

        膠體金免疫試紙條的作用原理主要有雙抗夾心和競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合兩種。本試驗(yàn)研制的新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡采用了競(jìng)爭(zhēng)原理,如圖1所示拆開(kāi)卡殼的試紙條,底板為PVC底板(雙面膠白色塑料板),從加樣處開(kāi)始分別為樣品吸收墊、膠體金墊(玻璃纖維)、硝酸纖維素膜(NC膜)和吸水墊。膠體金墊上噴涂膠體金標(biāo)記的新型瘦肉精多克隆抗體,NC膜上分別噴涂偶聯(lián)新型瘦肉精-BSA(檢測(cè)線T)和羊抗鼠IgG(質(zhì)控線C)。該法檢測(cè)線T出現(xiàn)紅色條帶,結(jié)果顯示為新型瘦肉精陰性;檢測(cè)線無(wú)條帶,結(jié)果顯示為新型瘦肉精陽(yáng)性。這是因?yàn)楫?dāng)被檢物質(zhì)溶液中不含新型瘦肉精時(shí),玻璃纖維上釋放的膠體金標(biāo)記新型瘦肉精多克隆抗體便會(huì)被檢測(cè)線處的偶聯(lián)抗原新型瘦肉精-BSA物質(zhì)識(shí)別并結(jié)合,因而被截留在該處,當(dāng)累積到一定程度便出現(xiàn)紅色線,但弱陽(yáng)性時(shí)會(huì)出現(xiàn)反應(yīng)強(qiáng)度減弱的檢測(cè)線;當(dāng)被檢物質(zhì)溶液中新型瘦肉精的濃度達(dá)到一定時(shí),新型瘦肉精與膠體金標(biāo)記的全部多抗體的反應(yīng)位點(diǎn)結(jié)合,這樣當(dāng)免疫膠體金到達(dá)檢測(cè)線時(shí)不能再與偶聯(lián)抗原發(fā)生反應(yīng),因而不出現(xiàn)紅色線。無(wú)論被檢測(cè)物質(zhì)中有無(wú)新型瘦肉精,膠體金標(biāo)記的新型瘦肉精多克隆抗體都會(huì)與噴涂在NC膜上的羊抗鼠IgG發(fā)生免疫反應(yīng),即在質(zhì)控區(qū)出現(xiàn)紅色線。

        2.1 靈敏度與滴尿量

        圖2 梯度濃度顯色結(jié)果Fig.2 the results of color gradient concentration

        試驗(yàn)結(jié)果如圖2所示,三個(gè)批號(hào)各梯度濃度的檢測(cè)卡在3 min內(nèi)結(jié)果呈梯度變化,CLEN 3 μg/L、RAC 5 μg/L、SAL 3 μg/L、SiT 5 μg/L、BUT 5 μg/L、BBT 5 μg/L、TER 8 μg/L、CLOR 5 μg/L、MAT 5 μg/L、BUB8 μg/L的添加樣品質(zhì)控帶顯色,檢測(cè)帶無(wú)明顯顯色;CLEN 5 μg/L、RAC 8 μg/L、SAL 5 μg/L、SiT 8 μg/L、BUT 8 μg/L、BBT 8 μg/L、TER 10 μg/L、CLOR 8 μg/L、MAT 8 μg/L、BUB 10 μg/L的添加樣品質(zhì)控帶顯色,檢測(cè)帶無(wú)顯色;0 μg/L,樣品質(zhì)控帶和檢測(cè)帶均顯色。表明膠體金免疫層析試驗(yàn)具有良好的敏感性和特異性,故該膠體金檢測(cè)試紙卡的檢測(cè)限可定為CLEN 3 μg/L、RAC 5 μg/L、SAL 3 μg/L、SiT 5 μg/L、BUT 5 μg/L、BBT 5 μg/L、TER 8 μg/L、CLOR 5 μg/L、MAT 5 μg/L、BUB 8 μg/L。滴尿量約為70~90 μg/L,對(duì)判讀效果無(wú)大影響,但發(fā)現(xiàn)滴尿量超過(guò)200 μg/L以上,膠體金檢測(cè)卡會(huì)出現(xiàn)死金現(xiàn)象、或者層析墊因浸泡太多液體而出現(xiàn)假陽(yáng)性,通過(guò)圖示可知,三個(gè)批次的穩(wěn)定性及色度辨析達(dá)到判讀要求,可以實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè),對(duì)監(jiān)管檢測(cè)工作提供便捷的檢測(cè)利器。

        2.2 假陽(yáng)性率試驗(yàn)

        一般檢測(cè)豬尿出現(xiàn)假陽(yáng)性現(xiàn)象主要由以下因素導(dǎo)致:喂養(yǎng)的獸藥會(huì)產(chǎn)生干擾性物質(zhì),飼料中金屬離子濃度過(guò)高,過(guò)夜未保存好的豬尿影響檢測(cè)結(jié)果,尿液含有特殊的、或者其他新型瘦肉精導(dǎo)致交叉反應(yīng)等?,F(xiàn)對(duì)80份經(jīng)GC-MS法檢測(cè)為陰性的豬尿進(jìn)行檢測(cè),以該方法檢測(cè)限CLEN 3 μg/L、RAC 5 μg/L、SAL 3 μg/L、SiT 5 μg/L、BUT 5 μg/L、BBT 5 μg/L、TER 8 μg/L、CLOR 5 μg/L、MAT 5 μg/L、BUB 8 μg/L為判定限進(jìn)行判斷,80份尿樣均為陰性,該80份樣品的假陽(yáng)性率為0。見(jiàn)表3。

        表3 豬尿陰性樣本檢測(cè)結(jié)果Table 3 Results of negative samples of pig urine

        2.3 假陰性率試驗(yàn)

        新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡對(duì)160份陽(yáng)性豬尿進(jìn)行檢測(cè),以該方法檢測(cè)限CLEN 3 μg/L、RAC 5 μg/L、SAL 3 μg/L、SiT 5 μg/L、BUT 5 μg/L、BBT 5 μg/L、TER 8 μg/L、CLOR 5 μg/L、MAT 5 μg/L、BUB 8 μg/L為判定限進(jìn)行判斷,160份尿樣均為陽(yáng)性,該160份樣品的假陰性率為0。見(jiàn)表4。

        表4 豬尿陽(yáng)性樣本檢測(cè)結(jié)果Table 4 Results of positive samples of pig urine

        BUT陽(yáng)性樣品 檢測(cè)卡(10份) 陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性陽(yáng)性添加濃度/(μg/L) 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5實(shí)測(cè)BUT陽(yáng)性樣品 GC-MS測(cè)定/(μg/L) 6.8 8.3 7.8 9.2 7.9 7.9 9.1 8.3 8.2 8.8 BBT陽(yáng)性樣品 檢測(cè)卡(10份) 陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性陽(yáng)性添加濃度/(μg/L) 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5實(shí)測(cè)BBT陽(yáng)性樣品 GC-MS測(cè)定/(μg/L) 7.2 7.2 8.6 8.4 7.9 8.9 91 8.2 7.5 9.1 TER陽(yáng)性樣品 檢測(cè)卡(10份) 陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性陽(yáng)性添加濃度/(μg/L) 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8實(shí)測(cè)TER陽(yáng)性樣品 GC-MS測(cè)定/(μg/L) 10.911.29.3 10.29.8 10.911.1 9.2 9.9 11.1 CLOR陽(yáng)性樣品 檢測(cè)卡(10份) 陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性陽(yáng)性添加濃度/(μg/L) 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5實(shí)測(cè)CLOR陽(yáng)性樣品 GC-MS測(cè)定/(μg/L) 8.5 8.4 8.7 7.7 8.3 8.5 7.4 8.9 8.9 7.9 MAT陽(yáng)性樣品 檢測(cè)卡(10份) 陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性陽(yáng)性添加濃度/(μg/L) 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5實(shí)測(cè)MAT陽(yáng)性樣品 GC-MS測(cè)定/(μg/L) 8.0 9.2 8.7 7.9 6.7 8.3 9.5 8.3 8.5 8.8 BUB陽(yáng)性樣品 檢測(cè)卡(10份) 陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性 陽(yáng)性陽(yáng)性添加濃度/(μg/L) 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8實(shí)測(cè)BUB陽(yáng)性樣品 GC-MS測(cè)定/(μg/L) 9.8 10.410.810.79.9 9.9 11.3 11.2 10.710.4

        3 總結(jié)

        本文研究成功建立檢測(cè)新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡的方法,通過(guò)大量樣本的測(cè)試,梯度濃度顯色結(jié)果表明:新型瘦肉精多殘留膠體金檢測(cè)卡的靈敏度分別為CLEN 3 μg/L、RAC 5 μg/L、SAL 3 μg/L、SiT 5 μg/L、BUT 5 μg/L、BBT 5 μg/L、TER 8 μg/L、CLOR 5 μg/L、MAT 5 μg/L、BUB 8 μg/L,濃度梯度性可以有效確認(rèn)樣本的半定量結(jié)果,其檢測(cè)最快觀察時(shí)間為3 min,若想顯色更加穩(wěn)定,可以在5 min后進(jìn)行判讀,本研究沒(méi)有體系化的測(cè)試檢測(cè)卡的保質(zhì)期,沒(méi)法確保產(chǎn)品在長(zhǎng)期保存時(shí)間下的穩(wěn)定性,后續(xù)應(yīng)進(jìn)行保質(zhì)期穩(wěn)定性測(cè)試,通過(guò)大批實(shí)際樣品及加標(biāo)樣品的測(cè)試,批內(nèi)和批間重復(fù)性為100%,假陽(yáng)性率和假陰性率均為0,達(dá)到預(yù)期的測(cè)試效果,同時(shí),測(cè)通過(guò)測(cè)試,檢測(cè)滴加的最優(yōu)尿液量為70~90 μL。該方法應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù),實(shí)現(xiàn)一個(gè)樣本可同時(shí)檢測(cè)8種類似的激素,大大降低了檢測(cè)時(shí)間和檢測(cè)成本,比單檢技術(shù)更有優(yōu)勢(shì),這方法既簡(jiǎn)捷又可靠,是一種值得推廣的定性篩選方法,可作為液相色譜等儀器法的補(bǔ)充,通過(guò)與孫曉亮[12]針對(duì)豬尿中30種不同瘦肉精的藥物殘留進(jìn)行比對(duì),雖沒(méi)達(dá)到全面覆蓋所有的新型瘦肉精,但適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè),本方法屬于快速檢測(cè)法,是豬尿初篩的便捷途徑,能有廣泛應(yīng)用于全國(guó)基礎(chǔ)檢測(cè),減少資源的浪費(fèi),同時(shí),也作為新型瘦肉精快速檢測(cè)的利器,在我國(guó)家禽生產(chǎn)場(chǎng)、動(dòng)物性食品加工廠、國(guó)家和地方的檢驗(yàn)/監(jiān)督部門、食品衛(wèi)生與安全檢驗(yàn)/監(jiān)察部門等行業(yè)領(lǐng)域推廣應(yīng)用,將為我國(guó)農(nóng)藥/獸藥殘留檢測(cè)和監(jiān)控計(jì)劃提供技術(shù)支撐,促進(jìn)我國(guó)農(nóng)業(yè)全面發(fā)展,提升食品安全和質(zhì)量等級(jí)、提高市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力和增加進(jìn)出口貿(mào)易。

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