譯校│陳慧娟 穆佳毅 李琦(中國動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心)
監(jiān)測是豬群的疾病狀況、特點(diǎn)或狀態(tài)信息的常規(guī)收集方法。收集此類信息的目的在于發(fā)現(xiàn)影響豬群的傳染病學(xué)參數(shù)的變化。之后,對(duì)收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,以便讓獸醫(yī)處官員計(jì)劃并采取適當(dāng)?shù)男袆?dòng),確保美國動(dòng)物衛(wèi)生安全。
和所有的動(dòng)物疾病根除計(jì)劃一樣,病例發(fā)現(xiàn)與監(jiān)測是偽狂犬病毒(PRV)計(jì)劃的重要組成部分。此類活動(dòng)應(yīng)確定PRV的出現(xiàn)是否受到新的因素的影響。實(shí)施的監(jiān)測方法能夠發(fā)現(xiàn)感染豬群中的PRV陽性動(dòng)物。計(jì)劃官員也是通過抽樣監(jiān)測豬群,確保豬群為陰性。
PRV根除計(jì)劃采用六種采樣方法監(jiān)測商品豬群。一些州還監(jiān)測野生豬群將PRV傳播至商品豬的風(fēng)險(xiǎn)。計(jì)劃官員在決定采取何種抽樣方法時(shí),必須考慮到多種因素。這些因素包括:根除計(jì)劃的階段、可用于收集樣本的經(jīng)過培訓(xùn)的員工數(shù)量、可用于收集和檢測標(biāo)本的資金量、實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本檢測能力、豬群中預(yù)計(jì)的流行率、收集樣本的目的。
在大多數(shù)病例中,組合的抽樣方法可提供最佳信息。比如,在豬密度高且流行率高的地區(qū),資金可更好地用于快速查找新病例。在預(yù)計(jì)有新暴發(fā)的地區(qū),隨機(jī)選擇豬群進(jìn)行檢測,向動(dòng)物提供平等的機(jī)會(huì),并隨時(shí)監(jiān)測發(fā)病率可能是更穩(wěn)健的方法。這項(xiàng)長期疾病監(jiān)測可用于提供關(guān)于計(jì)劃有效性的信息。
特定時(shí)期內(nèi),在指定地區(qū)內(nèi)對(duì)所有豬群進(jìn)行采樣被稱為地區(qū)檢測或“路邊檢測”(DTR)。這些地區(qū)被規(guī)定為州內(nèi)的縣、鎮(zhèn)或區(qū)域。地區(qū)內(nèi)的豬群首先由最熟悉該地區(qū)的個(gè)人進(jìn)行確認(rèn),比如豬肉生產(chǎn)商、縣推廣教育負(fù)責(zé)人或獸醫(yī)。由于PRV血清檢測被認(rèn)為具有接近100%的敏感率和特異率,計(jì)劃官員決定,使用的統(tǒng)計(jì)學(xué)抽樣方法將滿足在陽性豬群中至少發(fā)現(xiàn)一個(gè)PRV陽性樣本的需要。
在伊利諾伊州PRV試點(diǎn)項(xiàng)目實(shí)施之前和期間,州官員檢測小部分種豬,確定與從豬群中轉(zhuǎn)移種豬相關(guān)的疾病風(fēng)險(xiǎn)。這一小部分包括檢測由最多10頭豬組成的種豬群中的所有豬,由11~35頭豬組成的豬群中的10頭豬,以及至少由36頭豬組成的豬群中30%的豬(最多30頭)。之后,其他州使用統(tǒng)計(jì)學(xué)公式計(jì)算抽樣量,根據(jù)不斷變化的流行率、豬群規(guī)模和選定的概率確定樣本數(shù)量。
在地區(qū)檢測中,經(jīng)常會(huì)使用州-聯(lián)邦-行業(yè)計(jì)劃標(biāo)準(zhǔn)中的官方隨機(jī)標(biāo)本檢測,也就是“95/10檢測”。若預(yù)計(jì)的PRV血清流行率至少為10%,且發(fā)現(xiàn)至少一個(gè)血清陽性動(dòng)物的把握為95%,則下面的抽樣集決定了從豬群中抽樣檢測的數(shù)量:若豬群規(guī)模低于100頭,則對(duì)25頭豬進(jìn)行取樣;若豬群規(guī)模在100~200頭,則對(duì)27頭豬進(jìn)行取樣;若豬群規(guī)模在201~999頭,則對(duì)28頭豬進(jìn)行取樣;若豬群的規(guī)模至少為1000頭豬,則對(duì)29頭豬進(jìn)行取樣。為了讓這一子集在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具備有效性,且能夠準(zhǔn)確地確定豬群的PRV資格,樣本收集者必須隨機(jī)選擇動(dòng)物,或確保組內(nèi)的動(dòng)物有同樣的概率進(jìn)行檢測。只要種豬的后代為隔離飼養(yǎng),這些生長育肥豬就被視為獨(dú)立的豬群。這樣的抽樣能準(zhǔn)確預(yù)測豬群的PRV資格,因?yàn)榇蠖鄶?shù)感染豬群的血清流行率都高于10%。
在許多豬群都接種了PRV疫苗,且PRV陽性豬群數(shù)量較少的州內(nèi),上述統(tǒng)計(jì)學(xué)方法以滿足95/5標(biāo)準(zhǔn)的官方隨機(jī)檢測為基礎(chǔ)。計(jì)劃官員將從豬群中收集額外的標(biāo)本,確保在預(yù)期血清流行至少為5%的情況下有95%的把握檢測出至少一個(gè)陽性的動(dòng)物。95/5的抽樣集包括:在數(shù)量低于100頭的豬群中,對(duì)45頭豬進(jìn)行取樣;在數(shù)量為100~200頭的豬群中,對(duì)51頭豬進(jìn)行取樣;在數(shù)量為201~999頭的豬群中,對(duì)57頭豬進(jìn)行取樣;在數(shù)量至少為1000頭的豬群中,對(duì)59頭豬進(jìn)行取樣。
采用地區(qū)檢測有諸多優(yōu)勢。在檢測結(jié)果出來后,計(jì)劃官員將盡快確定豬群的PRV狀態(tài)。此外,他們可確定并記錄動(dòng)物在標(biāo)本收集時(shí)的身份和類型。在標(biāo)本采集時(shí),已知?jiǎng)游锏囊呙鐮顟B(tài)和在動(dòng)物身上采用的疫苗品牌。若檢測結(jié)果為疑似,可重新進(jìn)行檢測,或安排豬群的采樣間隔時(shí)間。此外,即便標(biāo)本來自于不同的大型豬群,其采樣的數(shù)量也可預(yù)測。這有助于計(jì)劃官員更準(zhǔn)確地估計(jì)預(yù)算和實(shí)驗(yàn)室能力需求。該方法也允許從不同的年齡段的動(dòng)物中進(jìn)行取樣。在某些情況下,以服務(wù)費(fèi)來雇傭執(zhí)業(yè)獸醫(yī)從其客戶的豬群中收集標(biāo)本(見圖1)。該抽樣方法在PRV流行率高、疫苗使用率高以及豬的密度高的地區(qū)得到了令人滿意的結(jié)果。
◎圖1 收集血液樣本用于PRV檢測
與此同時(shí),計(jì)劃官員在采用地區(qū)檢測時(shí)發(fā)現(xiàn)了一些不足。首先,由于需要向標(biāo)本采集者支付費(fèi)用,包括驅(qū)車前往農(nóng)場、花時(shí)間限制動(dòng)物、記錄信息和收集血液樣本,收集樣本的總成本更高。其次,地區(qū)檢測的結(jié)果僅代表這個(gè)時(shí)間段的參考,因?yàn)樨i群的狀態(tài)由當(dāng)日采集的樣本決定。雖然鼓勵(lì)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行隨機(jī)采樣,但豬群所有者可能拒絕提供豬群進(jìn)行檢測,除非有規(guī)定強(qiáng)制采樣。
在動(dòng)物運(yùn)輸和所有權(quán)發(fā)生改變的第一點(diǎn)采集標(biāo)本被稱為第一點(diǎn)檢測。只要種豬從豬群中轉(zhuǎn)移出,并出售至屠宰場或牲畜拍賣市場,則所有權(quán)發(fā)生改變。一些州選擇在這些市場所在地來收集血液樣本。該策略提供了定期對(duì)來自多個(gè)豬群的豬進(jìn)行采樣的方法,這些豬群集中到相對(duì)較少的集中點(diǎn)。
第一點(diǎn)檢測有諸多優(yōu)勢。首先,該方法可以在豬離開來源豬群后立即進(jìn)行檢測。其次,計(jì)劃官員可在銷售之時(shí)獲得來源豬群的準(zhǔn)確身份。第三,可使用記錄系統(tǒng)控制每年從各個(gè)農(nóng)場收集的樣本數(shù)量。第四,由于動(dòng)物在樣本采集前只會(huì)在銷售渠道中停留較短的時(shí)間,動(dòng)物不太可能從來自其他豬群的被感染的豬接觸后發(fā)生血清轉(zhuǎn)化。第五,由于從一個(gè)地方的來自多個(gè)豬群的動(dòng)物身上采集樣本,勞動(dòng)力成本更低。因此,第一點(diǎn)檢測同以每個(gè)豬群為基礎(chǔ)的地區(qū)檢測相比,成本更低。最后,該方法可發(fā)現(xiàn)此前計(jì)劃官員未列出的豬群。
第一點(diǎn)檢測也有一些不足。比如,需要雇傭額外的員工在上述市場上收集樣本。另一個(gè)不足就是在收集樣本時(shí)不太可能獲得動(dòng)物的疫苗狀態(tài)。此外,第一點(diǎn)檢測可能會(huì)對(duì)大型種豬群進(jìn)行過度取樣,在小型種豬群中又取樣不足,這主要是因?yàn)楦黝愗i群中出售動(dòng)物的頻率不同。該方法同樣還需要對(duì)來源豬群進(jìn)行額外追蹤和檢測,然后才能確定豬群的狀態(tài)。最后,采用這種方法,對(duì)達(dá)到上市體重的豬進(jìn)行取樣的可能性較低,因?yàn)檫@類豬通常會(huì)被直接從農(nóng)場運(yùn)送至食品加工廠。因此,除非鄰近的州也采用同樣的樣本收集方法,否則無法對(duì)運(yùn)送至鄰近幾個(gè)州的市場上的豬進(jìn)行取樣。
當(dāng)豬在屠宰場處理期間收集標(biāo)本的方法被稱為屠宰監(jiān)測或商品豬監(jiān)測。來源豬群剔除種豬后直接被交付至豬市場或食品加工廠。在這兩種情況下,每頭豬都有防水標(biāo)識(shí)的標(biāo)簽,每個(gè)標(biāo)簽都有獨(dú)立的編號(hào)。標(biāo)簽粘貼到每頭豬背部的皮上。由于標(biāo)簽在動(dòng)物身上的位置,標(biāo)識(shí)標(biāo)簽也被稱為“背上標(biāo)簽”(見圖2)。
◎圖2 帶有背部標(biāo)簽的選擇性宰殺母豬
根據(jù)每個(gè)帶編號(hào)的標(biāo)簽或標(biāo)簽系列來記錄動(dòng)物的所有者。在動(dòng)物放血時(shí),收集并保留血液標(biāo)本和標(biāo)識(shí)標(biāo)簽。實(shí)驗(yàn)室將檢測為陽性的標(biāo)本及其標(biāo)簽編號(hào)報(bào)告至市場所在州的官員。計(jì)劃官員使用市場保留的記錄進(jìn)行追溯,一旦確定豬群來源,計(jì)劃官員開展調(diào)查確定從該豬群的動(dòng)物中收集多少額外的血液樣本。然后,他們使用檢測結(jié)果來確定豬群的PRV狀態(tài)。
和其他監(jiān)測方法一樣,在屠宰場收集標(biāo)本有諸多優(yōu)勢。其中最明顯的優(yōu)勢就是,收集每個(gè)標(biāo)本的成本低于其他任何收集方法。此外,在一整年中,來自于同一豬群的豬可能會(huì)被多次采樣,提供了在一整年內(nèi)監(jiān)控豬群的機(jī)會(huì)。屠宰場監(jiān)測的另一個(gè)重要優(yōu)勢就是,能夠?qū)λ羞\(yùn)至屠宰場的帶仔種豬群進(jìn)行檢測。只要遵照背部標(biāo)簽的程序,且標(biāo)簽一直固定在豬皮上直到計(jì)劃官員采集標(biāo)本和標(biāo)識(shí)標(biāo)簽。最后,這種方法能夠監(jiān)測到計(jì)劃官員未列出的種豬群。
屠宰場監(jiān)測也有一些劣勢。首先,這種方法需要精確地放置背上標(biāo)簽,保持準(zhǔn)確的記錄,充分地留存標(biāo)識(shí)標(biāo)簽。屠宰場監(jiān)測也需要聯(lián)系第三方(不受雇于監(jiān)管機(jī)構(gòu)或豬的所有者)來檢查記錄,并報(bào)告與樣本匹配的標(biāo)識(shí)編號(hào)的所有者姓名。此外,計(jì)劃官員在完成對(duì)來源農(nóng)場的調(diào)查之前,無法得知豬群的PRV免疫狀態(tài)。而且,將動(dòng)物追蹤至正確的來源豬群取決于標(biāo)識(shí)標(biāo)簽和血液標(biāo)本在食品加工廠和實(shí)驗(yàn)室的精準(zhǔn)配對(duì)。
屠宰場監(jiān)測的另外一些劣勢包括:由于在采樣時(shí)豬群的PRV狀態(tài)是未知的,計(jì)劃官員可能會(huì)采集和檢測了比其他方法更多的樣本,并且還需要額外的費(fèi)用來追蹤和調(diào)查已知被感染的豬群,這是因?yàn)樗椭镣涝讏龅母腥綪RV的種豬重復(fù)出現(xiàn)陽性標(biāo)本。樣本的質(zhì)量可能更低,在夏季送到實(shí)驗(yàn)室時(shí)的狀態(tài)不夠理想。商品豬并不在接收種豬的屠宰場進(jìn)行處理,因此不包括在這一類的屠宰場監(jiān)測中。但是,在后來在監(jiān)測計(jì)劃中制定了對(duì)這些商品豬進(jìn)行采樣的方法。見本文“六、肌紅蛋白監(jiān)測”部分,該部分講述了在其他屠宰場對(duì)商品豬進(jìn)行采樣的方法。
另一種對(duì)豬群進(jìn)行PRV監(jiān)測的方法是檢測從病豬或?yàn)l死的豬身上采集并提交至實(shí)驗(yàn)室的樣本(見圖3)。在計(jì)劃早期就確立了這種發(fā)現(xiàn)PRV病例的方法。如果獸醫(yī)懷疑其客戶的豬群中有疑似PRV病例,將提交標(biāo)本并要求進(jìn)行疾病檢測。許多州要求獸醫(yī)和診斷實(shí)驗(yàn)室向州級(jí)獸醫(yī)報(bào)告PRV監(jiān)測為陽性的病例。在根除計(jì)劃后期,PRV檢測申請(qǐng)出現(xiàn)的頻率更低。隨著技術(shù)的進(jìn)步,出現(xiàn)了更多的檢測方法——例如免疫組織化學(xué)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCV),用來發(fā)現(xiàn)病原的存在。在使用這些新的檢測方法后,實(shí)驗(yàn)室很少使用細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒進(jìn)行診斷。因此,除非疾病排除清單上專門包括了PRV,否則可能不會(huì)進(jìn)行專門的PRV檢測。
◎圖3 對(duì)在診斷實(shí)驗(yàn)室中可能涉及PRV的病例保持警戒
為了應(yīng)對(duì)PRV診斷檢測率的下降,幾個(gè)州制定了監(jiān)控計(jì)劃,為實(shí)驗(yàn)室的診斷專家提供PRV的病例定義和資金,用于從提交的PRV疑似病例的組織上進(jìn)行直接熒光抗體檢測和確認(rèn)PCR。計(jì)劃還允許對(duì)田間病例提交的最多五個(gè)血清樣本上進(jìn)行PRV檢測。這類監(jiān)控給計(jì)劃官員帶來了一個(gè)重要的好處——可以用PRV相似臨床癥狀的病例為目標(biāo)。實(shí)驗(yàn)室能夠發(fā)現(xiàn)涉及PRV的臨床病例,如果在提交診斷標(biāo)本時(shí)未要求進(jìn)行PRV檢測,則有可能錯(cuò)過這些病例。同所述的其他任何監(jiān)測方法相比,這種以PRV疑似病例為目標(biāo)的方法可以讓計(jì)劃官員在臨床暴發(fā)之初以最快的速度發(fā)現(xiàn)PRV。此外,PRV計(jì)劃的成本也降至最低,因?yàn)橐呀?jīng)為其他原因而收集標(biāo)本,計(jì)劃只需支付PRV檢測的費(fèi)用。
在診斷實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控PRV的主要劣勢是采集和檢測的標(biāo)本多為便利標(biāo)本。PRV感染豬群畜主擔(dān)心發(fā)現(xiàn)病例或可能的檢疫隔離,因此可能選擇不提交樣本。此外,小規(guī)模的農(nóng)場財(cái)力資源有限,可能因?yàn)槌杀径粚颖咎峤恢猎\斷實(shí)驗(yàn)室。因此,在使用這一疾病監(jiān)控方法期間可能會(huì)錯(cuò)過PRV病例。
在整個(gè)PRV計(jì)劃期間都會(huì)進(jìn)行檢測來保持已知為陰性的豬群的狀態(tài),或在各州之間運(yùn)輸或運(yùn)至展覽的個(gè)體動(dòng)物的陰性狀態(tài)。雖然陰性豬群狀態(tài)和個(gè)體動(dòng)物檢測通常不包括在監(jiān)控或監(jiān)測方法中,但結(jié)果提供了部分有用信息。
PRV監(jiān)控架子豬群、合格的PRV陰性豬群(QN)和合格的疫苗接種陰性豬群(QNV)等術(shù)語向這些豬群的購買者保證,已定期完成PRV檢測,且結(jié)果為陰性。這對(duì)希望能確保購買到的牲畜不受PRV感染的種豬或架子豬的購買者尤其有利。若種豬并非來自QN或QNV豬群,需要對(duì)出售的每頭豬進(jìn)行采樣并檢測為陰性。對(duì)經(jīng)常出售大量種豬的豬群所有者而言,個(gè)體動(dòng)物檢測不僅不方便,而且成本太高。重復(fù)的陰性PRV檢測記錄有助于買家和監(jiān)管官員相信這些豬群未被感染,且來自這些豬群的豬不可能向其他豬群傳播PRV。
在全國PRV根除計(jì)劃啟動(dòng)后,美國生豬行業(yè)經(jīng)歷了結(jié)構(gòu)和生產(chǎn)實(shí)踐上的最大變革。1989年之前,絕大多數(shù)農(nóng)場都位于一個(gè)地點(diǎn),或者都是在本地的生產(chǎn)業(yè)務(wù),種豬和育肥豬之間有密切接觸,接受同樣的日常管理。種豬位于所有主要的生產(chǎn)地區(qū)內(nèi)。因此,檢測定點(diǎn)的種豬群能夠?yàn)樗蓄愋偷呢i提供診斷參考。隨著多地飼養(yǎng)和早期斷奶生產(chǎn)的建立,地理上分散的農(nóng)場和豬的集中生產(chǎn)成為規(guī)范。育種和保育工作轉(zhuǎn)移到此前豬密度較低的地區(qū),而育肥地聚集在鄰近的地理地區(qū),促進(jìn)飼養(yǎng)、銷售、運(yùn)輸和管理控制。由于這些變化,集中程度較高的大型肥育豬群所在地區(qū)內(nèi)沒有了已經(jīng)在監(jiān)測計(jì)劃下的PRV標(biāo)記種豬。在愛荷華州、密蘇里州、明尼蘇達(dá)州和威斯康星州的傳統(tǒng)架子豬來源被來自北卡羅來納州、佐治亞州、俄克拉荷馬州、科羅拉多州和加拿大的斷奶豬代替。在20世紀(jì)90年代,每天都會(huì)建成新的育肥場點(diǎn)設(shè)施,但是當(dāng)?shù)貏?dòng)物衛(wèi)生官員很少知道。因此,對(duì)于大量豬的移動(dòng),沒有監(jiān)管設(shè)備來監(jiān)控PRV計(jì)劃的進(jìn)度。這些情況并非愛荷華州特有,已被復(fù)制到整個(gè)美國中西部、東南部的州和西南部的平原,以及加拿大西部平原的更小范圍內(nèi)。
與其育種區(qū)在地理上無關(guān)聯(lián)的大量育肥豬的出現(xiàn)形成了PRV監(jiān)測的真空區(qū)。檢測為陰性的種豬群和架子豬(跨州或在州內(nèi))運(yùn)送至育肥地后受了當(dāng)?shù)氐臍馊苣z傳播或生物安全措施被破壞后其他途徑的感染,持續(xù)成為未被發(fā)現(xiàn)的PRV感染儲(chǔ)主。依靠傳統(tǒng)的種豬和移動(dòng)檢測來確定地區(qū)的PRV狀態(tài)的意義降低。通過DTR檢測監(jiān)控這些豬群同樣也受限,原因在于涉及的運(yùn)送量和頻率。在沒有主動(dòng)的商品豬監(jiān)測系統(tǒng)的情況下,可能(實(shí)際上也確實(shí))存在未被發(fā)現(xiàn)的重要PRV宿主。
2000年,愛荷華州立大學(xué)(ISU)的一位研究員提出了一項(xiàng)試點(diǎn)商品豬項(xiàng)目,通過肌紅蛋白技術(shù)評(píng)估被感染豬群中的PRV抗體,正如此前在丹麥沙門氏菌控制計(jì)劃中制定和實(shí)施的方法。肌紅蛋白是肉類標(biāo)本在冷凍后釋放出的液體,可在常溫下融解,包含抗體和其他細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)的材料,反映出臨死動(dòng)物的狀態(tài)。
在從胴體中取出內(nèi)臟后即可使用肉標(biāo)本,實(shí)現(xiàn)了標(biāo)本采購的靈活性,可在安全衛(wèi)生的環(huán)境下獲得,且不會(huì)對(duì)胴體的價(jià)值造成實(shí)質(zhì)性影響(見圖4~5)。屠宰場通常使用批次標(biāo)識(shí)(印章、批次號(hào))用于生產(chǎn)商付款。因此,該標(biāo)識(shí)方法被認(rèn)為是標(biāo)本采購和追蹤的最佳選擇(見圖6)。該方法是此前州或聯(lián)邦的監(jiān)管機(jī)構(gòu)和生產(chǎn)商監(jiān)督認(rèn)證的機(jī)制。
同樣是在2000年,ISU的研究人員同美國農(nóng)業(yè)部的PRV根除加速項(xiàng)目合作,對(duì)196對(duì)血清和肌紅蛋白標(biāo)本進(jìn)行初步檢測,這些標(biāo)本來自于4個(gè)感染PRV豬群中的育肥豬。這四個(gè)豬群中既有陰性,也有陽性血清值。
◎圖4 從隔膜的柱狀物上收集豬肉標(biāo)本
◎圖5 密封在容器內(nèi)的豬肉標(biāo)本,標(biāo)有標(biāo)本編號(hào)。將連夜冷凍,然后解凍,得到用于檢測的肌紅蛋白
◎圖6 豬尸體上的印章(照片增強(qiáng)),確定尸體的所有者
從冷凍和解凍肉標(biāo)本得到肌紅蛋白,使用IDEXX HerdChek ELISA-gpE血清方法檢測標(biāo)本。血清和肌紅蛋白使用同樣的陰性-陽性判定標(biāo)準(zhǔn),肌紅蛋白標(biāo)本不再進(jìn)行進(jìn)一步的處理。個(gè)體比較結(jié)果顯示,196頭接受檢測的豬中,血清和肌紅蛋白標(biāo)本之間的一致性達(dá)到97%。除了6頭豬外,所有的豬的分類都與配對(duì)的標(biāo)本一致。這6頭豬的血清呈陽性,肌紅蛋白為5個(gè)疑似和1個(gè)陰性。基于這一數(shù)據(jù),基于個(gè)人興趣形成了一個(gè)包括州和聯(lián)邦監(jiān)管官員、州和國家豬肉生產(chǎn)商代表,以及ISU獸醫(yī)學(xué)院在內(nèi)的特別小組,其目標(biāo)是為試點(diǎn)計(jì)劃爭取更多的支持。根據(jù)特別小組的考慮和對(duì)病例查找項(xiàng)目必要特征的構(gòu)想,州和聯(lián)邦的PRV官員批準(zhǔn)了三個(gè)月的試點(diǎn)項(xiàng)目來確定肌紅蛋白技術(shù)作為商品豬監(jiān)測工具的潛力。
項(xiàng)目領(lǐng)導(dǎo)者尋求肉類企業(yè)主的合作,獲得標(biāo)本和數(shù)據(jù)所有權(quán),在ISU CVM建立處理實(shí)驗(yàn)室。2001年3月,第一批的3家肉類企業(yè)開始采樣并報(bào)告每天每一批豬的來源。ISU的獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室分析此類標(biāo)本,報(bào)告所有的陽性結(jié)果至愛荷華州的獸醫(yī)進(jìn)行評(píng)估和追蹤。根據(jù)其有效性的早期證據(jù),該試點(diǎn)項(xiàng)目在三個(gè)月內(nèi)擴(kuò)大至愛荷華州的8個(gè)主要屠宰場,代表了約25%全國商品豬日屠宰能力。生產(chǎn)商識(shí)別數(shù)據(jù)顯示,在接受采用這一方法的PRV監(jiān)控豬群中,約66%來自于愛荷華州,剩余的豬群追蹤到鄰近的10個(gè)州,主要為7個(gè)鄰近的州。2001年3月~10月,試點(diǎn)項(xiàng)目在愛荷華州共發(fā)現(xiàn)13個(gè)新感染的場點(diǎn)。2000年和2001年,愛荷華州處于第二階段的縣進(jìn)行了半年的廣泛DTR檢測,期間并未發(fā)現(xiàn)這些陽性場點(diǎn)。特別小組的成員根據(jù)試點(diǎn)項(xiàng)目的調(diào)查結(jié)果修改了采樣率,因?yàn)橛?jì)劃的需求從病例發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移至地區(qū)監(jiān)測。
在之后的三年內(nèi),動(dòng)物衛(wèi)生官員在愛荷華州使用市場或其他監(jiān)測方法并未找到新的被感染的豬群。這證明了商品豬監(jiān)測在病例尋找和地區(qū)監(jiān)測方面的價(jià)值。隨后的研究證明,肌紅蛋白是一種令人滿意的抗體檢測介質(zhì),可發(fā)現(xiàn)豬中一系列的病毒、細(xì)菌和寄生生物。這些市場檢測技術(shù)為一系列的抗體檢測項(xiàng)目提供了數(shù)據(jù),有助于未來控制、根除或認(rèn)證計(jì)劃的開發(fā)和監(jiān)控。
有野生豬的州可能存在PRV儲(chǔ)主,繼續(xù)成為將PRV引入商品豬的風(fēng)險(xiǎn)因素。在其中的幾個(gè)州,動(dòng)物衛(wèi)生官員制定了監(jiān)控和監(jiān)測方法評(píng)估這一風(fēng)險(xiǎn)。此類監(jiān)控計(jì)劃的實(shí)施是該州野生豬管理計(jì)劃的一部分。計(jì)劃包括對(duì)野生豬和商品豬群進(jìn)行取樣,這些豬群在戶外飼養(yǎng)且可能接觸到有報(bào)告病例的地區(qū)內(nèi)的野生豬。各州的自然資源部門和各州的農(nóng)業(yè)部門鼓勵(lì)積極誘捕和狩獵計(jì)劃,指導(dǎo)捕獸者或狩獵者就野生豬的捕殺向監(jiān)管官員提供警示。只要有可能,州或聯(lián)邦官員獲得血液或組織標(biāo)本后會(huì)將其提交至診斷實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行PRV檢測。由于戶外飼養(yǎng)的豬群有直接接觸野生豬的風(fēng)險(xiǎn),因此選擇其進(jìn)行地區(qū)檢測來重新確定PRV的狀態(tài)。此外,長期存在野生豬的州認(rèn)識(shí)到,野生豬有時(shí)會(huì)被當(dāng)作架子豬捕獲和出售。這些州了解商品豬和捕獲野生豬之間的聯(lián)系和可能在市場上存在的接觸。因此,一些州啟動(dòng)了第一點(diǎn)檢測來發(fā)現(xiàn)這些市場上可能通過與野生豬的接觸而感染PRV的野生豬或馴養(yǎng)豬。
總而言之,監(jiān)管官員使用一系列的方法來收集標(biāo)本用于PRV監(jiān)測或?qū)ふ也±H缟纤?,各種方法都有一些優(yōu)勢和劣勢??傮w而言,各州能夠根據(jù)其豬的數(shù)量、流行率、可用資金和個(gè)體目標(biāo)來選擇方法組合。