洪湘瓊+徐曉諾+凌音+沈寒卉
摘要:選擇新鮮蘆薈為研究對(duì)象,運(yùn)用超聲波萃取法提取蘆薈中的防曬成分,利用紫外分光光度計(jì)測(cè)定蘆薈不同生長(zhǎng)部位的紫外吸收光譜圖。通過(guò)分析比較最大波長(zhǎng)值以及光譜圖中吸收峰的吸光度情況,了解蘆薈本體中蒽醌類物質(zhì)的分布情況。實(shí)驗(yàn)測(cè)得:牛長(zhǎng)時(shí)間較短的蘆薈葉皮中,蒽醌類物質(zhì)含量較高;同株蘆薈中,蒽醌類物質(zhì)主要集中在葉皮的尖端與邊緣部分。此外,不同品種的蘆薈本體中,蒽醌類物質(zhì)的具體成分及含量也存在顯著的差異。
關(guān)鍵詞:蘆薈;蒽醌類物質(zhì);超聲波萃取法;紫外光度分析;實(shí)驗(yàn)探究
文章編號(hào):1005-6629(2017)8-0047-04
中圖分類號(hào):G633.8
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B
萬(wàn)物生長(zhǎng)離不開(kāi)太陽(yáng),但是過(guò)多的紫外線會(huì)加速肌膚老化,廣大女性廣泛使用各類防曬霜來(lái)減少紫外線對(duì)皮膚的傷害。然而市售的防曬霜大多數(shù)以化學(xué)防曬為主,其中或多或少含有對(duì)人體有害的成分。本研究選取綠色植物蘆薈為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,采用超聲波萃取法將蘆薈中有效防曬成分進(jìn)行提取,利用紫外分光光度計(jì)多角度測(cè)量蘆薈各個(gè)部位的吸光度,著重研究波長(zhǎng)在UVB范圍內(nèi)( 280~320nm)的吸光度值,以找尋蘆薈中防曬成分的主要分布規(guī)律,并為天然防曬劑的研究提供相應(yīng)的數(shù)據(jù)資料。
1儀器與試劑材料
計(jì)算機(jī)、威尼爾紫外分光光度計(jì)、Derui超聲波洗滌器( DR-MS20)、50mL量筒、膠頭滴管、lOmL移液管、lOOmL容量瓶、玻璃棒、無(wú)水乙醇、蒸餾水、新鮮蘆薈
2實(shí)驗(yàn)過(guò)程
2.1防曬成分提取方法的設(shè)計(jì)
將蘆薈葉洗凈晾干、切成丁狀,混合均勻作為實(shí)驗(yàn)材料。取lg蘆薈丁用50mL50%乙醇浸泡lOmin,隨后將該蘆薈丁及溶液放入超聲波儀器中超聲萃取,提取時(shí)間分別為lOmin、20min、30min、40min、50min、60min。過(guò)濾后用lcm的石英比色皿以50%乙醇作參比,測(cè)其紫外吸收光譜。每組進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。并將其光譜圖與浸泡24h的蘆薈乙醇提取液的紫外吸收光譜進(jìn)行對(duì)比。
2.2同株蘆薈不同生長(zhǎng)部位防曬效果比較
取清洗好的蘆薈葉、蘆薈莖、蘆薈根,分別切成小塊,各自混合均勻。各取lg分別用50mL 50%乙醇浸泡lOmin,隨后將該蘆薈小塊及溶液放入超聲波儀器中超聲萃取30min。過(guò)濾后,用lcm的石英比色皿以50%乙醇作參比,測(cè)其紫外吸收光譜。每組進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。
2.3蘆薈的葉皮與葉肉防曬效果比較
把一片蘆薈葉小心切開(kāi)分為綠色的葉皮和透明狀的葉肉兩部分,分別切成小塊,各自混合均勻。參照2.2的方法測(cè)定它們的紫外吸收光譜。每組進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。
2.4同一片蘆薈葉皮不同部位防曬效果比較
(1)取干凈的蘆薈葉,剔除葉肉,將葉皮分成向陽(yáng)面和背陰面兩部分,然后將兩塊葉皮切成小塊,各自混合均勻。各取lg用50mL50%乙醇浸泡lOmin,隨后將溶液放入超聲波儀器中超聲萃取30min。過(guò)濾提取液取出lOmL用50%乙醇稀釋至lOOmL,混合均勻后用lcm的石英比色皿以50%的乙醇作參比,測(cè)其紫外吸收光譜。每組進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。
(2)取清洗好的一片蘆薈葉皮,分成尖部、中部、基部三個(gè)部分切好,隨后切成小塊,各自混合均勻。另取清洗好的一片蘆薈葉皮,按葉緣和葉中央兩個(gè)部分分開(kāi),隨后切成小塊,各自混合均勻。重復(fù)以上的操作,分別測(cè)它們的紫外吸收光譜。每組進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。
2.5不同葉齡的蘆薈防曬效果比較
取同一株蘆薈中的幼葉與成熟葉,將其葉皮切成小塊,各自混合均勻。參照2.4的方法測(cè)定它們的紫外吸收光譜。每組進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。
2.6不同生長(zhǎng)年份的蘆薈葉皮防曬效果比較
在一株當(dāng)年苗與一株2年苗上各取一片成熟葉葉皮,將其切成小塊,各自混合均勻。參照2.4的方法,分別測(cè)它們的紫外吸收光譜。每組進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。
2.7不同品種的蘆薈葉皮防曬效果比較
取不夜城蘆薈、庫(kù)拉索蘆薈、中華蘆薈、白樺蘆薈成熟葉的葉皮切成小塊,各自混合均勻。參照2.4的方法,分別測(cè)定它們的紫外吸收光譜。每組進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。
3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
3.1 利用超聲波萃取法超聲萃取30min,可以有效提取蘆薈中的蒽醌類物質(zhì)
蘆薈中防曬的主要成分為蒽醌類物質(zhì),蒽醌類物質(zhì)由于存在較長(zhǎng)的共軛體系,在紫外區(qū)域會(huì)出現(xiàn)較強(qiáng)的紫外吸收峰。本實(shí)驗(yàn)中所得到的紫外吸收光譜,均在波長(zhǎng)為294~298nm紫外區(qū)域出現(xiàn)較強(qiáng)的紫外吸收峰(見(jiàn)表1),這一數(shù)據(jù)表明提取成分確實(shí)含有醌樣結(jié)構(gòu)。蘆薈的防曬成分主要是對(duì)中波紫外線UVB (280~320nm)有較好的吸收效果,其防曬機(jī)制在于:蘆薈蒽醌類物質(zhì)在紫外線的激發(fā)下會(huì)吸收紫外線的光能,電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),當(dāng)電子重新回到基態(tài)時(shí),所吸收的光能以熒光的形式釋放出來(lái)。也就是說(shuō),在這個(gè)過(guò)程中,蘆薈蒽醌類物質(zhì)吸收了紫外線能量,并將其轉(zhuǎn)化為沒(méi)有損傷作用的熒光。
比較λmux值處測(cè)得的吸光度數(shù)據(jù)(見(jiàn)表1),可以發(fā)現(xiàn)超聲波萃取法比乙醇浸泡法更為省時(shí)高效;比較不同萃取時(shí)間下的吸光度值(見(jiàn)圖1),超聲萃取30min是相對(duì)最佳的實(shí)驗(yàn)條件。因此,本研究后續(xù)的對(duì)比實(shí)驗(yàn)都是取lg蘆薈用50mL50%乙醇浸泡lOmin,隨后超聲萃取30min以提取蘆薈中的蒽醌類物質(zhì)。
3.2 同株蘆薈蒽醌類物質(zhì)主要集中分布在葉片上
比較分析蘆薈中根、莖、葉的紫外吸收光譜圖,發(fā)現(xiàn)只有蘆薈葉片的紫外光譜圖中有吸收峰,而蘆薈根和蘆薈莖的紫外吸收光譜圖中沒(méi)有吸收峰(見(jiàn)圖2)。數(shù)據(jù)表明蘆薈中的蒽醌類物質(zhì)主要集中在葉片中,其根部和莖部幾乎不含蒽醌類物質(zhì)。
3.3 同一蘆薈葉蒽醌類物質(zhì)主要集中分布在葉皮中
同一蘆薈葉中,蘆薈葉皮λmax值與蘆薈葉肉是基本相近。不過(guò)在兩者λmax處測(cè)得的吸光度值存在很大的差異,葉皮的吸光度值明顯高于蘆薈葉肉(見(jiàn)圖3)。這說(shuō)明具有防曬作用的蒽醌類物質(zhì)主要集中在蘆薈的葉皮內(nèi),而白色透明狀的葉肉幾乎沒(méi)有防曬功能。
3.4 同一蘆薈葉皮不同部位的蒽醌類物質(zhì)分布不均勻
分析比較蘆薈葉皮的各部位紫外吸收光譜圖可以看出,背陰面葉皮中的蒽醌類物質(zhì)含量高于向陽(yáng)面葉皮(見(jiàn)圖4);葉尖的蒽醌類物質(zhì)含量高于葉片中部,葉片基部的蒽醌類含量最低(見(jiàn)圖5),葉緣部分的蒽醌類物質(zhì)含量高于中央部分(見(jiàn)圖6)。
3.5同種蘆薈蒽醌類物質(zhì)含量與生長(zhǎng)時(shí)間有關(guān)
同株蘆薈,上部幼葉中蒽醌類物質(zhì)含量明顯高于下部成熟葉(見(jiàn)圖7),不同株的蘆薈對(duì)比實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,生長(zhǎng)年份越長(zhǎng)的蘆薈蒽醌類物質(zhì)含量越低(見(jiàn)圖8)。
3.6不同品種蘆薈防曬效果不同
蘆薈的種類有許多種,從吸收峰以及吸光度(如表2)的差異可以推測(cè):不同品種的蘆薈其蒽醌類物質(zhì)的具體成分有明顯差異,且蒽醌類物質(zhì)的含量也存在高低之分。
4結(jié)語(yǔ)
蒽醌類物質(zhì)是蘆薈葉滲出物中的主要化學(xué)成分,也是蘆薈防曬中的主要成分。我們用超聲波萃取法對(duì)其提取并用紫外分光光度計(jì)對(duì)其在蘆薈中的分布情況進(jìn)行了深入的研究與探討。同一品種的蘆薈中,蒽醌類物質(zhì)主要集中在蘆薈葉皮的尖端與葉緣部分,而且生長(zhǎng)時(shí)間越短的蘆薈,蒽醌類物質(zhì)的含量越多。同時(shí),不同品種的蘆薈中蒽醌類物質(zhì)的具體成分不同,含量也有高有低。我們將在已有的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,繼續(xù)深入研究其他多肉植物的防曬效果,并嘗試自制天然的防曬劑,以降低化學(xué)防曬劑對(duì)人體皮膚的傷害。endprint