653100玉溪市中醫(yī)醫(yī)院
乙型病毒性肝炎是乙型肝炎病毒(HBV)引起的一種嚴重危害人類健康的傳染病。據(jù)文獻報道,2008年4月最新全國人群乙肝血清流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,我國乙肝表面抗原攜帶率7.18[1]。本研究對298例患者進行乙型肝炎標志物定量檢測和乙肝病毒DNA(HBV-DNA)檢測進行分析。
研究對象:2015-2016年行乙型肝炎標志物定量檢測和HBV-DNA檢測的患者298例。
標本采集:清晨空腹采集靜脈血標本4 mL,置于血清分離膠管(非可替)中,顛倒混勻3~5次,3 000 r/min,分離血清。
試劑與儀器:①試劑:乙肝標志物定量檢測的試劑盒由SYSMEX公司提供。乙肝標志物定量DNA檢測TaqMan48。②儀器:離心機,SYSMEX HISCL-5000,羅氏熒光定量PCR儀H-80。
方法:乙肝兩對半定量采用超敏化學(xué)發(fā)光,正常參考區(qū)間:HBsAg 0~0.03 IU/mL,HBsAb 0~5.00 mIU/mL,HBeAg 0~1.00COI, HBeAb0~50.00COI,HBcAb 0~1.00 COI。乙肝兩對半DNA定量采用實時熒光定量PCR。正常結(jié)果:<5.00E+02 Copies/mL。
統(tǒng)計學(xué)分析:計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗,計量資料采用(±s)表示,組間比較采用t檢驗,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
檢測乙型肝炎患者血清298例。其中乙肝感染282例,未感染乙肝11例,HBsAb陽性5例。乙肝兩對半五項標志物檢測和乙肝兩對半DNA,結(jié)果見表1。
282例乙肝感染患者中大三陽38例,HBV-DNA<5.00E+02拷貝8例,>5.00E+02拷貝30例;小三陽156例,HBV-DNA<5.00E+02拷貝92例,>5.00E+02拷貝 64例;HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb(+)26例,HBV-DNA<5.00E+02拷貝10例,>5.00E+02拷貝16例;HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb(+)7例,HBV-DNA<5.00E+02拷貝4例,>5.00E+02拷貝 3例;HBsAg、HBsAb、HBeAg、 HBcAb(+)8 例 , HBV-DNA<5.00E+02拷貝1例,>5.00E+02拷貝7例;HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb(+)8例,HBV-DNA<5.00E+02拷貝0,>5.00E+02拷貝8例;另外HBcAb中兩對半異常的模式HBV-DNA均<5.00E+02拷貝。在感染乙型肝炎病毒282例的模式中HBV-DNA<5.00E+02的152例(53.9%),HBV-DNA>5.00E+02的130例(46.1%)。說明乙肝病毒DNA在乙肝患者中檢測的重要性,能提供科學(xué)的依據(jù)指導(dǎo)臨床醫(yī)師對患者進行及時治療、監(jiān)控等。
表1 298例乙肝兩對半定量標志物和HBV-DNA檢測結(jié)果
兩對半的檢測在乙肝病毒感染者中有重要意義,當HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb中任意1項或幾項陽性時,其臨床意義有幾種可能:急性HBV感染、慢性HBsAg攜帶者、急性HBV感染恢復(fù)期、急性HBV感染早期、急性或慢性乙肝活動期。HBV-DNA<5.00E+02的157例含兩對半的12種模式(52.68%),其中兩對半1.4.5陽性92例(30.87%);兩對半 2、4、5 陽性 18 例(6%);兩對半 1、3、4、5 陽性 10 例(3.3%); 兩 對 半 1、3、5陽 性 8 例(2.68%);兩對半 4、5陽性8例(2.68%)。HBV-DNA>5.00E+02的 128例(42.95%),其中兩對半1、4、5陽性64例(21.47%);兩對半 1、3、5 陽性 30 例(10%);兩 對 半 1、3、4、5 陽 性 16 例(5.36%);兩對半1、2、3、4、5陽性8例(2.68%);1、2、3、5 陽性 7 例(2.34%);1、2、4、5陽性3例(1%)。從檢測結(jié)果看兩對半1、4、5陽性的HBV-DNA含量較高,應(yīng)引起人們高度重視。HBV-DNA檢測水平可反映HBV復(fù)制水平,發(fā)現(xiàn)患有乙肝時就建議檢測HBV-DNA。在乙型肝炎病毒感染后的自然史中,HBeAg和HBV復(fù)制呈正相關(guān)[2]。一般來說,患者的具體情況可能會不太一樣,如果在一個病毒活動期,乙肝病毒DNA檢測可能需要頻繁一些,1~2個月就應(yīng)檢測1次,如果是在病毒耐受期,病情相對較穩(wěn)定,可以3~6個月檢測1次。在進行抗病毒治療過程中,也需要定期檢測HBV-DNA。一般來說至少3個月要檢查1次,檢測值越高說明乙肝病毒復(fù)制越活躍,傳染性越強,且轉(zhuǎn)氨酶升高超過正常值兩倍以上者;對一些肝臟有進行性損害(經(jīng)肝穿活檢證實)、乙肝病毒DNA陽性者,即使肝功能正常,必要時也應(yīng)考慮抗病毒治療。乙肝病毒DNA檢測對其病程有重要的監(jiān)控作用。兩對半的檢測在乙肝病毒感染者中有重要意義,血循環(huán)中HBVDNA與HBeAg和HBsAg有一定的相關(guān)性[3],HBV-DNA的水平可反映HBV復(fù)制水平,同時檢測乙肝兩對半可以提高臨床檢測效果[4]。因此同時用兩種方法對乙肝患者進行檢測,提高診斷率,有利于合理選擇治療方案、判斷藥物療效及監(jiān)控。