◎ 岳倡平
(周口市糧油產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心,河南 周口 466000)
糧油的質(zhì)量關(guān)系食品的安全,是關(guān)系國(guó)民健康與安全的重要內(nèi)容,為保證糧油的質(zhì)量安全,需要對(duì)糧油中各種真菌毒素進(jìn)行有效的檢測(cè)。真菌毒素對(duì)糧油的質(zhì)量和安全影響較大,很多真菌毒素都具有致癌、致畸、免疫抑制性等作用,若人體在攝入糧油的過(guò)程中誤食此類物質(zhì),很可能導(dǎo)致人出現(xiàn)惡心、嘔吐、神經(jīng)紊亂等胃腸系統(tǒng)或神經(jīng)系統(tǒng)的病癥,嚴(yán)重的可能誘發(fā)癌癥甚至導(dǎo)致死亡。通過(guò)先進(jìn)的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)對(duì)糧油中真菌毒素進(jìn)行有效檢查能夠很好地降低此類危害[1]。
真菌毒素檢測(cè)技術(shù)是一種能夠?yàn)榧Z油或者其他物品提供有效真菌毒素檢測(cè)的方法,伴隨著科學(xué)技術(shù)的不斷更新和進(jìn)步,真菌毒素的檢測(cè)技術(shù)正在不斷發(fā)展。真菌毒素檢測(cè)技術(shù)根據(jù)其發(fā)展過(guò)程可以分為常規(guī)真菌毒素檢測(cè)技術(shù)以及新型真菌毒素檢測(cè)技術(shù)兩種。常規(guī)的真菌檢測(cè)技術(shù)是應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng)的較為經(jīng)典的檢測(cè)手法,包括薄層色譜法、色譜法、免疫分析法等,而新型真菌毒素檢測(cè)技術(shù)則是在傳統(tǒng)技術(shù)上進(jìn)行發(fā)展或者探尋到的新型檢測(cè)方法,如膠體金免疫層析測(cè)定、免疫生物傳感器檢測(cè)法、光譜篩選法、分子印跡技術(shù)等檢測(cè)方法。不同的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)特點(diǎn)不盡相同,它們或分別具有檢測(cè)準(zhǔn)確率高、檢測(cè)效果好、檢測(cè)便捷以及經(jīng)濟(jì)實(shí)惠等不同的特點(diǎn),為了保證在糧油檢測(cè)中真菌毒素檢測(cè)的準(zhǔn)確和高效,并盡可能地節(jié)約成本,檢驗(yàn)部門(mén)等需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行糧油真菌毒素檢測(cè)技術(shù)的選擇。
薄層色譜法是一種十分經(jīng)典的真菌毒素檢測(cè)技術(shù),主要應(yīng)用原理是借助真菌毒素在紫外線照射下的熒光特性,了解樣品中的真菌毒素分布情況。薄層色譜法在實(shí)際應(yīng)用中需要對(duì)檢測(cè)樣本進(jìn)行提取、濃縮以及薄層分離等操作,并且在進(jìn)行熒光性觀察時(shí)需要認(rèn)真分析,對(duì)真菌進(jìn)行有效的定量和定性,操作過(guò)程相對(duì)復(fù)雜。并且,由于薄層色譜法使用中具有一定的真菌霉素暴露風(fēng)險(xiǎn),需要操作人員注意保護(hù)自身安全。薄層色譜法檢測(cè)在實(shí)際應(yīng)用中已經(jīng)不再適應(yīng)現(xiàn)代的檢測(cè)需求,正在逐漸被其他新型檢驗(yàn)方法所取代。不過(guò),目前除了單純的薄層色譜法檢測(cè)外,多是將薄層色譜法與色譜法、質(zhì)譜法進(jìn)行聯(lián)合使用,這樣能夠較好地提高單一檢測(cè)的敏感度,因此聯(lián)合檢測(cè)方法成為當(dāng)前糧油真菌毒素檢測(cè)的新方法。但是,聯(lián)合檢測(cè)方法雖然準(zhǔn)確度較高,但對(duì)樣本、儀器等具有較高的要求,一定程度上提升了檢驗(yàn)的成本,在實(shí)際應(yīng)用中部分受限。
免疫分析技術(shù)是一種應(yīng)用較廣且準(zhǔn)確度較高的真菌毒素檢測(cè)技術(shù),在糧油等食品真菌毒素檢測(cè)中比較常用。免疫分析技術(shù)的作用原理是,由于真菌毒素本質(zhì)上屬于小分子物質(zhì),而將真菌通過(guò)蛋白質(zhì)等大分子載體結(jié)合形成人工抗原,利用抗原與抗體的特異性分析,能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)真菌毒素的檢測(cè)[2]。免疫分析檢測(cè)技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定性好、快速且靈敏度高等一系列特點(diǎn)。免疫分析檢測(cè)技術(shù)在使用中也需要對(duì)樣本進(jìn)行一定處理,真菌毒素本身屬于半抗原,不具備免疫原性,需要通過(guò)與大分子物質(zhì)結(jié)合后才能夠形成特異性免疫應(yīng)答,并且免疫分析檢測(cè)技術(shù)本身對(duì)設(shè)備也有一定的要求。常用的免疫分析檢測(cè)技術(shù)中有理化方法和生物學(xué)方法兩種,其中理化方法的儀器設(shè)備成本比較高。根據(jù)上述檢測(cè)技術(shù)的特點(diǎn),在進(jìn)行免疫分析檢測(cè)時(shí)也要注意根據(jù)其特點(diǎn)進(jìn)行選擇,在實(shí)現(xiàn)有效檢測(cè)的同時(shí)降低檢測(cè)的成本。
免疫分析檢測(cè)方法是當(dāng)前在糧油真菌毒素檢測(cè)中應(yīng)用較廣、發(fā)展較快的一種檢測(cè)方法。以免疫分析檢測(cè)為基礎(chǔ)對(duì)免疫分析檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行研究和優(yōu)化,研究出了一系列新型的免疫分析技術(shù),能夠更好地實(shí)現(xiàn)對(duì)糧油真菌毒素的檢測(cè)和分析。新型免疫分析技術(shù)中比較常見(jiàn)的有膠體金免疫層析測(cè)定、免疫生物傳感器、時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)等,新型免疫分析技術(shù)的基礎(chǔ)原理依舊是利用了真菌毒素的半抗原特性,但在檢測(cè)方法上進(jìn)行了更新。比如,膠體金免疫層析測(cè)定是將免疫金標(biāo)記技術(shù)與抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行結(jié)合而形成的新檢測(cè)方法。膠體金免疫層析測(cè)定使用膠體金標(biāo)記試劑與待檢物質(zhì)相結(jié)合進(jìn)而對(duì)其特異性結(jié)合進(jìn)行保留,將最終的檢測(cè)結(jié)果留在檢測(cè)帶上,通過(guò)肉眼可以清楚觀察到顯色結(jié)果并進(jìn)行測(cè)定,膠體金免疫層析測(cè)定具有準(zhǔn)確、快速、便捷、穩(wěn)定等特點(diǎn),更加適用糧油真菌毒素檢測(cè)。
除了較為常見(jiàn)的免疫分析新技術(shù),很多其他的新型檢測(cè)技術(shù),如生物芯片技術(shù)、膜載體酶標(biāo)記快速檢測(cè)技術(shù)、光譜篩選技術(shù)、噬菌體展示技術(shù)以及分子印跡技術(shù)等,也是能夠有效檢測(cè)糧油真菌毒素的技術(shù)。上述技術(shù)或者在免疫學(xué)基礎(chǔ)上進(jìn)行發(fā)展,或者利用了能源與物質(zhì)相互作用中的能源轉(zhuǎn)換等,通過(guò)不同的反應(yīng)表現(xiàn),光譜測(cè)定等對(duì)真菌毒素進(jìn)行分析。在糧油真菌毒素檢測(cè)當(dāng)中具有優(yōu)點(diǎn)也具有一定的局限性,不同的檢測(cè)方法對(duì)于樣本的前期處理要求,后續(xù)檢查的準(zhǔn)確度等都有不同的表現(xiàn),為了進(jìn)一步完善糧油真菌毒素的檢測(cè),仍需要不斷地探索,尋找一種更加經(jīng)濟(jì)、便捷、靈敏度高的檢測(cè)方法。
糧油中真菌毒素是一種具有較強(qiáng)危害性的物質(zhì),若未能成功檢測(cè),很容易通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體,威脅人體健康。采用薄層色譜法、免疫分析法以及儀器配合檢查等能夠比較好地檢驗(yàn)糧油中各種真菌毒素的情況。不同的檢測(cè)方法各具優(yōu)缺點(diǎn),需要結(jié)合實(shí)際需要進(jìn)行檢測(cè)技術(shù)的選擇。