張琳靜

（河南省濟(jì)源市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)中心，濟(jì)源 459000）

0 引言

磺胺類藥物品種較多，如有磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲基異口惡唑等，它們抗菌范圍廣，作用強(qiáng)，而且價(jià)格比較低廉，被廣泛的應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中，它們通過添加在飼料、飲水或者注射的方式，用作疾病治療用藥或者保健用藥，效果非常顯著，但是這類藥物的殘留和飼料污染問題非常嚴(yán)重，常常引起人類或者畜禽的不良反應(yīng)，對(duì)人們的健康造成嚴(yán)重的威脅。

1 畜產(chǎn)品中藥物殘留的危害

磺胺類藥物在養(yǎng)殖生產(chǎn)中應(yīng)用較廣，其殘留問題也非常嚴(yán)重，對(duì)畜產(chǎn)品的安全造成嚴(yán)重的威脅。畜禽發(fā)生疾病以后，常用磺胺類藥物作為抗菌消炎藥物，如奶牛等感染乳房炎或發(fā)生全身性炎癥的時(shí)候，采用抗菌藥物治療，在治療過程中沒有把病畜所產(chǎn)的奶處理而是直接混在奶源中，作為加工奶制品的原料，人們食用以此加工的奶制品后就會(huì)引起疾病，常見有皮炎、蕁麻疹，嚴(yán)重的還會(huì)引起休克甚至死亡。磺胺類藥物的代謝產(chǎn)物在體內(nèi)的溶解度很低，常會(huì)在泌尿系統(tǒng)形成結(jié)晶，造成腎小管阻塞，引起腎臟機(jī)能障礙，出現(xiàn)血尿、尿痛、尿閉等癥狀，嚴(yán)重的還會(huì)使白細(xì)胞減少，也有的會(huì)出現(xiàn)粒細(xì)胞減少，而導(dǎo)致溶血性貧血的發(fā)生。由于磺胺類等抗菌藥物在養(yǎng)殖生產(chǎn)中的不規(guī)范使用，使用劑量偏大的情況經(jīng)常出現(xiàn)，這使得細(xì)菌的耐藥性成為亟待解決的問題[1]，甚至有的養(yǎng)殖場(chǎng)出現(xiàn)耐藥菌株，使得治療疾病的成本大大提高。因此，在畜禽生產(chǎn)中對(duì)藥物殘留加強(qiáng)監(jiān)管，建立有效的藥物檢測(cè)方法，是控制藥物殘留的關(guān)鍵措施。

2 藥物殘留標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)于磺胺類藥物的殘留問題已經(jīng)研究了有40多年了，而且近20年來，藥物殘留問題越來越嚴(yán)重，給人畜的健康都帶來了嚴(yán)重的威脅，于是許多國家和地區(qū)都對(duì)磺胺類藥物的殘留問題格外重視，一些藥物被列為了重點(diǎn)監(jiān)控的藥物，如在美國奶牛養(yǎng)殖生產(chǎn)中除了磺胺二甲氧嘧啶、磺胺溴甲嘧啶、磺胺乙氧嗪以外，其他的磺胺類藥物不讓使用，同時(shí)，各國也對(duì)畜產(chǎn)品中的藥物殘留的最大數(shù)量做了明確的規(guī)定，以確保畜產(chǎn)品安全。在美國，肉品和乳品中磺胺類藥物殘留量都不能超過100 ug/kg；歐盟國家對(duì)畜產(chǎn)品中磺胺類藥物的殘留量也有標(biāo)準(zhǔn)，肉品、乳品中磺胺類藥物的殘留量不能超過100 ug/kg，腎臟中不能超過600 ug/kg，肝臟中不能超過300 ug/kg，雞蛋中不能超過200 ug/kg；我國和其他的發(fā)達(dá)國家一樣，畜產(chǎn)品中磺胺類藥物的殘留量也有明確的規(guī)定，早在1994年，《動(dòng)物性食品中獸藥的最高殘留量試行》就已經(jīng)頒布，2005年，鹽酸克倫特羅（瘦肉精）事件發(fā)生以后，我國就重點(diǎn)監(jiān)控了畜產(chǎn)品中磺胺類藥物的殘留問題[2]。

3 檢測(cè)方法

根據(jù)國內(nèi)外的報(bào)道，經(jīng)常應(yīng)用的磺胺類藥物殘留的檢測(cè)方法主要有微生物檢測(cè)法、分光光度法、免疫分析法、色譜技術(shù)法、毛細(xì)管電泳（CE）法、聯(lián)用技術(shù)法等。

3.1 微生物檢測(cè)法

微生物檢測(cè)方法需要的設(shè)備簡(jiǎn)單，投入的資金少，適合大批量的樣本檢測(cè)，但是這種方法需要的時(shí)間長，穩(wěn)定性也較差，精確度以及靈敏度都較低，當(dāng)樣品中含有的特異微生物較少的時(shí)候很難檢測(cè)出來。

3.2 分光光度法

分光光度法操作比較簡(jiǎn)單，樣品的前處理容易，而且也不需要價(jià)格太高的儀器和試劑，在條件不完善的質(zhì)監(jiān)部門和生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)用較多，但是這種方法準(zhǔn)確度和靈敏度都不高。

3.3 免疫分析法

免疫分析法是近年來發(fā)展起來的藥物殘留的檢測(cè)方法，其應(yīng)用的范圍較廣，容易操作，靈敏度也較高，而且成本低，可以進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)操作。常用的有放射免疫分析技術(shù)、酶聯(lián)免疫技術(shù)和生物傳感技術(shù)[3]。

放射免疫分析技術(shù)是應(yīng)用比較早的一項(xiàng)分析技術(shù)，但是最早因?yàn)閷?duì)最小藥物殘留限量較高，很少應(yīng)用于檢測(cè)磺胺類藥物殘留。近年來，隨著技術(shù)的發(fā)展，免疫放射法與微生物受體法（Charm II）相互結(jié)合，使得靈敏度及特異性有了提高，也成為檢測(cè)磺胺類藥物殘留的有效方法之一。

酶聯(lián)免疫技術(shù)對(duì)于抗原抗體的定性定量分析有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，其在檢測(cè)磺胺藥物殘留的方面也有著非常大的作用。ELISA檢測(cè)方法，在實(shí)際工作中應(yīng)用較多，其檢測(cè)速度快，靈敏度高，而且最高殘留限量低于100 ng/mL。

生物傳感技術(shù)在檢測(cè)磺胺類藥物殘留上也有應(yīng)用，最早是在20世紀(jì)90年代由瑞典的BiacoreAB 公司將免疫生物傳感器技術(shù)應(yīng)用到對(duì)動(dòng)物組織內(nèi)的藥物殘留檢測(cè)中。應(yīng)用這種方法可以大批量的進(jìn)行藥物殘留檢測(cè)，而且快速、準(zhǔn)確度、靈敏度都較高。

3.4 色譜技術(shù)

目前用于檢測(cè)畜產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留的色譜方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜、薄層色譜以及免疫色譜法。其中應(yīng)用較多的就是高效液相色譜法，這種方法快速、效率高、靈敏度高，在檢驗(yàn)檢疫中被廣泛應(yīng)用。早期，對(duì)檢測(cè)樣品采用萃取的方法，處理比較復(fù)雜，隨著技術(shù)的發(fā)展，利用固相萃取小柱對(duì)樣品進(jìn)行提取和凈化，減少了處理時(shí)間。隨著檢測(cè)設(shè)備的完善和發(fā)展，現(xiàn)在多用紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了操作過程的自動(dòng)化。免疫色譜法是20世紀(jì)90年代初發(fā)展起來的一種檢測(cè)方法，檢測(cè)在15 min內(nèi)就可以完成，而且最低檢測(cè)能達(dá)5μg/kg，比其他的方法有著很大的優(yōu)勢(shì)[4]。薄層色譜法最早在藥物制品的檢測(cè)方面應(yīng)用較多，后來由于其沒有毒性、價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)，在動(dòng)物食品的藥物殘留檢測(cè)方面也逐漸被推廣應(yīng)用。

3.5 毛細(xì)管電泳（CE）法

毛細(xì)管電泳（CE）又稱高效毛細(xì)管電泳法（HPCE），是近來發(fā)展起來的一種檢測(cè)方法，檢測(cè)速度快，樣品分離的速度只需要2 s，但是這種方法的檢測(cè)限量在2～9 mg/kg之間，對(duì)再低的殘留量無法檢測(cè)。

3.6 聯(lián)用技術(shù)

在實(shí)際的工作中，為了提高準(zhǔn)確度和檢測(cè)速度，常常采用兩種或者兩種以上的方法共同分析。如對(duì)磺胺類藥物殘留進(jìn)行檢測(cè)經(jīng)常用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS）、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS）[5]等方法，提升了工作效率。

4 結(jié)語

總之，隨著檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，以后會(huì)逐漸向現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控和基層檢測(cè)進(jìn)行推廣，快速、操作簡(jiǎn)單、靈密度和準(zhǔn)確地高的檢測(cè)方法會(huì)得到應(yīng)用和推廣，這需要我們畜牧獸醫(yī)工作者做深入的研究，提高檢測(cè)技術(shù)水平。

[1] 蔡文金，張航俊，陳曉林，等．動(dòng)物源性食品中磺胺類藥物殘留檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J]．畜禽業(yè)，2015（5）：64-67．

[2] 劉怡君，邊海濤，曲寶成，等．食品中磺胺類藥物檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J]．食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2017（9）：3420-3430．

[3] 皮玉梅．加強(qiáng)畜禽產(chǎn)品藥物殘留檢測(cè)[J]．中國畜牧獸醫(yī)文摘，2018（2）：32．

[4] 于園．禽蛋中磺胺類藥物殘留的檢測(cè)[J]．北京農(nóng)業(yè)，2015（6）：104．

[5] 張?jiān)?，李偉青，周偉娥，等．食品中磺胺類藥物前處理及檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J]．食品科學(xué)，2015（23）：340-346．